迟略有增加，但酵母细胞中的铁含量随加铁时间的延迟而大大降低，故 在发酵初始时加铁为宜。
[0112] 2.6发酵培养基初始抑对产航假丝酵母生物量和酵母细胞中铁含量的影响结果
[0113] 发酵培养基初始抑对产航假丝酵母生物量和酵母细胞中铁含量的影响结果见表 8。
[0114] 表8发酵培养基初始抑对产航假丝酵母生物量和酵母细胞中铁含量的影响。 阳115]
阳116] 由表8可见，初始抑对产航假丝酵母的生长和富铁能力有较大影响。当初始抑 5. 0时生物量较高，其细胞内铁含量最高。因此，发酵初始pH应控制在5. 0左右为宜。 阳117] 3小结
[0118] 产航假丝酵母菌株化CC4-0021具有较好的富集铁与转化铁的能力，其生产的富 铁酵母可作为食品强化剂和饲料添加剂的铁源，在工业化生产上具有一定的开发和应用价 值。经对其发酵条件优化试验筛选出其适宜发酵条件为500mL^角瓶装量50~751^，发 酵溫度23~28 °C，接种量为2%，发酵培养基最适初始抑为5.0,发酵用铁源为硫酸亚铁。 利用产航假丝酵母制备富铁酵母的条件初步优化结果为发酵罐大生产奠定了基础。
[0119] 实施例3:产航假丝酵母对铁的耐受性
[0120] 1材料与方法
[0121] 1.1材料 阳122] 菌种：经紫外诱变筛选得到的产航假丝酵母（Candidautilis)BLCC4-0021。
[0123] 试剂：硫酸亚铁、盐酸径胺、邻二氮菲、醋酸钢、硝酸、高氯酸，均是分析纯。
[0124] 液体发酵培养基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸馈水1000血。 阳125] 1.2方法
[01%] 在液体发酵培养基中添加不同浓度的硫酸亚铁，使其化2+浓度分别为0μg/mL、 400μg/血、800μg/mL、1200μg/mL、1600μg/mL、2000μg/mL，于 30 °C、200;rpm摇床培养 24h结束。 阳127] 2结果
[0128] 产航假丝酵母对铁的耐受性结果见表9。
[0129] 表9产航假丝酵母对铁的耐受性结果 阳130]
阳131 ] 从表9各浓度组的酵母生物量可w看出，随着培养基中化2+浓度的增加，酵母细胞 中的铁含量逐渐上升，但是酵母细胞生物量及铁的转化率并没有呈现递增现象。在化2+浓 度0~800μg/血范围内，随着化2+浓度的增加，酵母生物量并没有呈下降趋势，说明在该 浓度范围内的铁离子并不影响酵母细胞的生长；Fe2+浓度从1200μg/mL开始，酵母生物量 随Fe2^度增加而迅速减少，说明高浓度的化2+对酵母细胞的生长有明显的抑制作用，而铁 的转化率则随着培养基中化2+浓度的增加而呈下降趋势。从富铁酵母产品工业生产的角度 综合考虑，培养基中的化2+添加量W400μg/mL较优。 阳132] 实施例4小型发酵罐发酵试验
[0133] 1仪器设备
[0134] 实验室化机械揽拌发酵罐、电热恒溫摇床、离屯、机、分光光度计、电热板、通风楓。 阳135] 2材料与方法 阳136] 2.1材料 阳137] 菌种：紫外诱变得到的产航假丝酵母（Candidautilis)I3LCC4-0021。
[0138] 液体发酵培养基：酵母膏5g，蛋白腺lOg，葡萄糖20g，KH2P〇42g，蒸馈水lOOOmL。 阳139] 2. 2方法
[0140] 采用筛选出的产航假丝酵母（Candidautilis)BLCC4-0021，在实验室7升机械揽 拌发酵罐中进行发酵。发酵罐装量为化，采用上述液体发酵培养基，发酵溫度28°C，2 %接 种量，发酵培养基初始抑为5. 0,培养基中加入化2+浓度400μg/mL的硫酸亚铁。试验中 每化取样一次，测定生物量和酵母细胞中的铁含量（表10)，绘制富铁酵母生长曲线（图 1)及铁富集曲线（图2)。 阳141]表10产航假丝酵母小罐发酵数据阳142]
阳143] 由表10、图1和图2可W看出，发酵罐生产富铁酵母，其生物量和酵母细胞中的铁 含量在24h达到最大，为14. 53g/L和24976μg/g，铁的富集量达到36290μg/100血，发酵 时间W24h左右为宜。
[0144] 综上，产航假丝酵母（Candidautilis)化CC4-0021制备富铁酵母产品的生产工艺 为：
[0145]
阳146] 实施例5产航假丝酵母在预防保育猪缺铁性贫血上的应用
[0147] 1材料与方法
[0148] 1.1 材料
[0149] 产航假丝酵母化CC4-0021、硫酸亚铁、氯化钻、维生素Bi2、硫酸铜、维生素C、巧樣 酸、植物乳杆菌LP、玉米淀粉及石粉等。维生素C购自上海易蒙斯化工科技有限公司，其他 成分均为山东宝来利来生物工程股份有限公司提供。 阳150] 试验动物：妊娠母猪由山东宝来利来己夫己夫农业科技有限公司提供。 阳151] 其它：血清铁、总铁结合力、铁蛋白、转铁蛋白测定试剂盒。 阳152] 1.2方法 阳153] 1. 2. 1预防保育猪缺铁性贫血的微生态制剂
[0154]产品A:产航假丝酵母化CC4-0021的发酵产物（富铁酵母）20份，氯化钻0.06份，硫酸铜0.8份，VBi2〇. 3份，Vc10份，巧樣酸10份，植物乳杆菌LP5X108cfu/g，载体60份； 载体为玉米淀粉和石粉的混合物，淀粉和石粉的质量比为7:3。 阳巧5] 产品B:产航假丝酵母化CC4-0021的发酵产物（富铁酵母）10份，硫酸亚铁10 份，氯化钻0. 06份，硫酸铜0. 8份，VBi2〇. 3份，Vc 10份，巧樣酸10份，植物乳杆菌LP5X 108c化/g，载体60份；载体为玉米淀粉和石粉的混合物，淀粉和石粉的质量比为7:3。 阳156] 产品C:硫酸亚铁20份，氯化钻0. 06份，硫酸铜0. 8份，VBi2〇. 3份，Vc 10份，巧樣 酸10份，植物乳杆菌LP 5 X 108c化/g，载体60份；载体为玉米淀粉和石粉的混合物，淀粉和 石粉的质量比为7:3。 阳157] 1.2. 2试验设计
[0158] 选择品种、分娩日期、胎次相近的黑猪和白猪20头（妊娠后第12周的母猪），随机 分为4组，每组5个重复，分别饲喂不同饲粮（如表11)。比较添加补铁产品A、B、C后对母 猪及仔猪生长性能和体内铁胆的影响。正式试验期2个月。
[0159] 表11复合补铁微生态制剂对仔猪缺铁性贫血的影响试验分组 [01601
阳16U 妊娠母猪采用自配料，预混料使用的是六和的SB54粉料，基础饲料配方为（％，W/ W):玉米63,豆巧13,教皮20,预混料4。母猪进行限量饲喂，自由饮水，每天早晚各喂2次。 试验母猪的饲养管理与免疫程序按正常操作规程进行。 阳162] 本饲养试验在山东宝来利来己夫己夫农业科技有限公司宁阳猪场进行。 阳163] 1. 2. 3仔猪表观现象的观察
[0164] 观察出生仔猪的厮带血色和血量、仔猪初生及哺乳期的皮毛色泽及精神状态。 阳1化]1.2. 4样本采集及检测方法阳166] ①生产性能测定
[0167] 准确记录母猪产活仔数、死胎数、仔猪平均出生个体重、28日龄仔猪头数及均重 等。于产后28d对仔猪进行称重，计算平均日增重。 阳168] ②母猪初乳中铁含量的测定
[0169] 在分娩当天采集母猪的乳汁（初乳）。分别从前、中、后3个乳头采集乳样后混合， 每头采集lOmU样品采集后-20°C保存。采用试剂盒测定初乳中铁、铁蛋白（SF)、转铁蛋白 (SFI)、总铁结合力灯IBC)的含量。 阳170]③血常规指标的测定 阳171] 采集母猪分娩当天和仔猪28日龄时的血液。于母猪分娩当天空腹绑定采血及仔 猪出生28日龄时固定采血。每头母猪耳缘静脉或耳根部静脉采血每窝仔猪选取3头 仔猪，固定后，与前腔静脉采血2mL。采血后立即置于血浆抗凝管中保存