专利名称：opaque-2基因导入微胚乳玉米的育种方法
技术领域：
本发明涉及一种opaque-2基因导入微胚乳玉米的育种方法，属于玉米品种选育领域。
背景技术：
微胚乳玉米胚乳含量极少，胚成为其种子的主要成分，以胚为主要产品。而胚的蛋白质和赖氨酸含量比胚乳高得多。玉米胚的蛋白质大部分是白蛋白和球蛋白，富含人体必需氨基酸。玉米胚特别是脱脂后的玉米胚是一种以蛋白质为主的营养物质。所以微胚乳玉米棒油后的油柏可制作闻蛋白闻赖氣酸的闻级食品。因此如何提闻微胚乳玉米的赖氣酸等主要营养成分的含量是对微胚乳玉米进行育种改良的主要研究方向之一。opaque-2 (简称o2)基因通过调节蛋白质的合成方向，减少胚乳中的醇溶蛋白，增·加清蛋白、球蛋白、白蛋白和富含赖氨酸的谷蛋白，进而提高胚乳中赖氨酸的含量。o2基因能够将玉米胚乳中的赖氨酸和色氨酸含量提高近一倍，全籽粒赖氨酸和色氨酸含量提高约70%。
发明内容
本发明的目的是提供一种将02基因导入微胚乳玉米中，培育出含有02基因的微胚乳玉米育种的方法，将o2基因导入到微胚乳玉米中，进一步提高了微胚乳玉米的赖氨酸等营养成分的含量。本发明的技术方案是
opaque-2基因导入微胚乳玉米的育种方法，包括如下步骤
a.通过杂交将o2基因导入微胚乳玉米以隐性纯合体o2玉米自交系(o2o2)与微胚乳玉米自交系杂交，收获硬粒型杂交种种子F1。种植所得的硬粒型F1种子，从F1植株所结的果穗上分离的籽粒中采用直观方法选取已导入02基因的微胚乳玉米。将其播种，当植株生长到散粉吐丝期，套袋自交。在自交的同时用这些植株的花粉与02隐性纯合体测交，成熟后同时收获自交和测交的果穗，选择测交果穗为不透明胚乳对应的自交果穗，留种，即可确定为已导入02基因的微胚乳玉米；
b.自交选育将确定为已导入o2基因的微胚乳玉米，连续套袋自交5-8代，直至各主要性状稳定，保种或适当进行系内彼此交，保种，即可获得导入o2基因的微胚乳玉米自交系。可进一步作为亲本利用，组配更高营养品质的微胚乳玉米杂交种。本发明产生的效益是
通过本发明的方法所选育出的导入02基因的微胚乳玉米自交系，赖氨酸和必需氨基酸总量等营养成分含量高。这些自交系可作为亲本，用于组配更高营养成分含量的微胚乳玉米杂交种。对以玉米胚为主要产品的高营养食品的加工业提供了较好的开发前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的效果作详细描述
取隐性纯合体o2玉米自交系(o2o2)种子和微胚乳玉米自交系种子，同时播种，当植株生长到散粉吐丝期，给每个植株套袋，取隐性纯合体02玉米自交系植株的花粉与微胚乳玉米自交系植株杂交，收获硬粒型杂交种种子匕。种植所得的硬粒型F1种子，从F1植株所结的果穗上分离的籽粒中采用直观方法选取已导入o2基因的微胚乳玉米。种植这些直观选出的已导入02基因的微胚乳玉米，当植株生长到散粉吐丝期，套袋自交，在自交的同时用这些植株的花粉与02隐性纯合体测交。成熟后同时收获自交和测交的果穗，选择测交果穗为不透明胚乳对应的自交果穗，留种，即可确定为已导入02基因的微胚乳玉米；
将确定为已导入o2基因的微胚乳玉米种子，连续套袋自交5-8代，直至各主要性状稳定，保种，即可获得导入02基因的微胚乳玉米自交系。可进一步作为亲本利用，组配更高营养品质的微胚乳玉米杂交种。随机取30粒导入o2基因的微胚乳玉米自交系种子和随机取30粒未导入o2基因的微胚乳玉米同型自交系种子(对照)，粉碎烘干后测整粒赖氨酸的含量，再随机各自取30粒种子，用自来水浸泡24小时，将种子胚与非胚部位分别剥离出来，烘干后分别粉碎后测胚与非胚部氨基酸含量，利用日立L8800型高速氨基酸分析仪测定。所得数据如下表所示
表I :本发明方法导入o2基因的微胚乳玉米自交系的种子与对照的种子的营养成分的
比较
权利要求
1.一种opaque-2基因导入微胚乳玉米的育种方法，其特征在于包括以下步骤 a.通过杂交将o2基因导入微胚乳玉米以隐性纯合体o2玉米自交系(o2o2)与微胚乳玉米自交系杂交，收获硬粒型杂交种种子F1 ;种植所得的硬粒型F1种子，成熟后从F1植株所结的果穗上分离的籽粒中采用直观方法选取已导入02基因的微胚乳玉米；将其播种，当植株生长到散粉吐丝期，套袋自交，在自交的同时用这些植株的花粉与02隐性纯合体测交；成熟后同时收获自交和测交的果穗，选择出测交果穗为不透明胚乳对应的自交果穗，留种，即可确定为已导入o2基因的微胚乳玉米； b.自交选育将确定为已导入o2基因的微胚乳玉米，连续套袋自交5-8代，直至各主要性状稳定，保种或适当进行系内彼此交，保种，即可获得导入o2基因的微胚乳玉米自交系O
全文摘要
本发明提供一种提高微胚乳玉米赖氨酸等营养成分含量的选育方法。以隐性纯合体opaque-2(简称o2)玉米自交系与微胚乳玉米自交系杂交，在F1植株所结的果穗上观察表现型差异，采用直观方法选择出已导入o2基因的微胚乳玉米，将其播种后自交，在自交的同时用其花粉与o2隐性纯合体测交，成熟后选择测交结果为不透明胚乳(o2玉米表现型)所对应的自交果穗留种。连续自交选育5-8代，可获得导入o2基因的微胚乳玉米自交系。
文档编号A01H1/02GK102919119SQ20121047492
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月21日 优先权日2012年11月21日
发明者郝小琴 申请人:广西大学