用于治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料及中药组合物的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。本发明提供的中药组合物其抗菌、抗病毒、副作用小、无残留、无耐药性，是抗生素的良好替代品，在治疗猪致病性大肠杆菌病方面具有广阔的发展前景。
【专利说明】用于治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料及中药组合物
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及中医药【技术领域】，尤其涉及一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料及中药组合物。
[0002]
【背景技术】
[0003]猪致病性大肠杆菌病是由猪致病性大肠杆菌病引起的一种急性传染病，临床主要引起猪腹泻，主要表现为肠炎、肠毒血症等多种临床症状，本病在世界各地均有发生，在我国特别是养猪业发达的广东地区造成了新生仔猪的大批死亡或生长发育不良，已经成为发展养猪业的严重障碍之一，也是造成养猪业者经济损失最大的疾病之一。它一年四季均可发生，无季节性，寒冬和炎夏潮湿多雨季节发病多。猪集约化饲养发病严重，分散饲养的猪发病少。猪致病性大肠杆菌病呈散发或地方流行性，发病率、致死率均很高。
[0004]该病的防治主要依靠抗生素等化学药物。然而，抗生素等药物的大量使用引起药物残留和细菌、病毒产生耐药性，进一步加大疾病控制的难度。由于抗菌药的长期使用，还会使病原菌产生耐药性。此外，长期的用药所造成的药物残留给人类健康也带来了危害。
[0005]中兽医学有着悠久的历史和丰富的应用经验，在抗生素使用以前，对保障家畜健康起着重要作用。随着畜牧业规模化、集约化的发展，以及抗生素长期滥用而造成的病原菌抗药性日趋增强和药物残留问题显现时，中药以抗菌、抗病毒、副作用小、无残留、无耐药性等特点，已经成为替代抗生素解决耐药性和药残的重要方案。
[0006]本发明提供一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其抗菌、抗病毒、副作用小、无残留、无耐药性，是抗生素的良好替代品，具有广阔的发展前景。
[0007]
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是提供一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其抗菌、抗病毒、副作用小、无残留、无耐药性，是抗生素的良好替代品，具有广阔的发展前景。
[0009]为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料，原料包括玉米、麸皮、花生柏、菜柏、鱼粉、磷酸氢钙、食盐、蛋氨酸、苏氨酸、维生素和用于治疗猪致病性大肠杆菌病中药组合物添加剂。
[0010]其中，所述饲料中各原料的重量分别为玉米7kg?9kg、麸皮2kg?3kg、花生柏
0.5kg ?0.7kg、菜柏 0.8kg ?1.2kg、鱼粉 0.5kg ?0.7kg、憐酸氧隹丐 0.05kg ?0.15kg、食盐 0.05kg ?0.15kg、蛋氨酸 0.0lkg ?0.03kg、苏氨酸 0.0lkg ?0.03kg、维生素 0.1kg ?
0.2kg、中药组合物添加剂Ikg?1.5kg。
[0011]其中，所述饲料中各原料的重量分别为玉米8kg、麸皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、鱼粉0.6kg、磷酸氢I丐0.1kg、食盐0.1kg、蛋氨酸0.02kg、苏氨酸0.02kg、维生素0.15kg、中药组合物添加剂1.2kg。
[0012]其中，所述中药组合物添加剂中的原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。
[0013]其中，所述中药组合物添加剂中各原料药的重量分别为穿心莲20g?30g、黄芩55g?65g、白苟25g?35g、侧柏叶25g?35g、牡荆叶20g?30g、白头翁35g?45g、党参30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、乌梅25g?35g、鹅不食草20g?30g、山楂25g?35g、陈皮15g?25g、黄精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙参25g?35g、芡实20g?30g、延胡索15g?25g、银杏叶30g?40g、瞿麦25g?35g和莱菔子25g?35g。
[0014]本发明还提供了一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。
[0015]其中，所述中药组合物中各原料药的重量分别为穿心莲20g?30g、黄芩55g?65g、白芍25g?35g、侧柏叶25g?35g、牡荆叶20g?30g、白头翁35g?45g、党参30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、乌梅25g?35g、鹅不食草20g?30g、山楂25g?35g、陈皮15g?25g、黄精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙参25g?35g、芡实20g?30g、延胡索15g?25g、银杏叶30g?40g、瞿麦25g?35g和莱菔子25g?35g。
[0016]所述中药组合物中各原料进一步优选为穿心莲25g、黄芩60g、白芍30g、侧柏叶30g、牡荆叶25g、白头翁40g、党参35g、柴胡25g、茜草35g、乌梅30g、鹅不食草25g、山楂30g、陈皮20g、黄精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙参30g、芡实25g、延胡索20g、银杏叶35g、瞿麦30g和莱菔子30g。
[0017]本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，具体为:
将各原料药组分按重量混合，获得混合物，加醇浓度为50%?70%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为3L?5L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物。
[0018]本发明还提供了上述饲料的制备方法，其包括:
第一步，将所述中药组合物添加剂中的各原料药组分按重量混合，获得混合物，加醇浓度为50%?70%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为3L?5L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得所述中药组合物添加剂；
第二步，取所述饲料中除所述中药组合物添加剂的各原料先进行粉碎，然后将粉碎后的原料放入混合机进行混合，再加入第一步制备的中药组合物添加剂进一步混合，混合后的物料进入调制器，调制温度为70°C，调制时间10秒，经调制后，送入熟化罐进行熟化，熟化时间为5分钟，熟化温度70°C，最后进入制粒器进行制粒，得到成品饲料。
[0019]本发明的有益效果:
本发明提供的中药组合物其抗菌、抗病毒、副作用小、无残留、无耐药性，是抗生素的良好替代品，在治疗猪致病性大肠杆菌病方面具有广阔的发展前景。
[0020]
【具体实施方式】
[0021]本发明以清热解毒、利水消肿、涩肠止泻为治疗原则，提供一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。
[0022]进一步,所述中药组合物仅由上述原料药构成。
[0023]所述中药组合物中各原料药的重量分别为穿心莲20g?30g、黄芩55g?65g、白芍25g?35g、侧柏叶25g?35g、牡荆叶20g?30g、白头翁35g?45g、党参30g?40g、柴胡20g?30g、菌草30g?40g、乌梅25g?35g、鹅不食草20g?30g、山楂25g?35g、陈皮15g?25g、黄精35g?45g、山柰20g?30g、忍冬藤30g?40g、高良姜20g?30g、南沙参25g?35g、突实20g?30g、延胡索15g?25g、银杏叶30g?40g、瞿麦25g?35g和莱菔子 25g ?35g。
[0024]所述中药组合物中各原料进一步优选为穿心莲25g、黄芩60g、白芍30g、侧柏叶30g、牡荆叶25g、白头翁40g、党参35g、柴胡25g、茜草35g、乌梅30g、鹅不食草25g、山楂30g、陈皮20g、黄精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙参30g、芡实25g、延胡索20g、银杏叶35g、瞿麦30g和莱菔子30g。
[0025]本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，具体为:
将各原料药组分按重量混合，获得混合物，加醇浓度为50%?70%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取2h?3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为3L?5L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物。
[0026]所述中药组合物中各原料药的药理如下:
穿心莲:味苦，性寒，归心、肺、大肠、膀胱经，具有清热解毒，凉血，消肿，燥湿的功效，主治感冒发热，咽喉肿痛，口舌生疮，顿咳劳嗽，泄泻痢疾，热淋涩痛，痈肿疮疡，毒蛇咬伤等证。
[0027]黄芩:味苦、性寒，入心、肺、胃、胆、大肠经，有清热燥湿，泻火解毒，安胎，止血的作用，主要用于湿热所致之腹泻、痢疾、黄疸、热淋；肺热咳嗽，口渴咽痛，还可用于胎热不安，热毒火邪侵淫皮肤之疮痈毒肿之证。
[0028]白芍:味苦、酸，性凉，入肝、脾经，具有养血柔肝，缓中止痛，敛阴收汗的功效，主治胸腹胁肋疼痛，泻痢腹痛，自汗盗汗，阴虚发热，月经不调，崩漏，带下等证。
[0029]侧柏叶:味苦、涩，性寒，入心、肝、大肠经，具有凉血止血，祛风湿，散肿毒的功效，主治吐血、衄血、尿血、血痢、肠风、崩漏，风湿痹痛，细菌性痢疾，高血压，咳嗽，丹毒，痄腮，烫伤等证。
[0030]牡荆叶:味辛；苦；性平，归肺经，具有解表化湿，祛痰平喘；解毒，祛风解表，除湿,杀虫,止痛的功效,主治伤风感冒，咳嗽哮喘；胃痛；腹痛；暑湿泻痢；脚气肿胀；风疹瘙痒；脚癣；乳痈肿痛；蛇虫咬伤等证。[0031]白头翁:味苦，性寒，入胃、大肠经，有清热解毒、凉血止痢的作用，主要用于肠胃有湿热积滞之发热腹痛，下痢脓血，里急后重等证。
[0032]党参:味甘，性平，入肺、脾经，有补气益脾，养血生津的作用，主要用于脾肺气虚或气血两虚之倦怠乏力、气短，咳嗽自汗等证。
[0033]柴胡:味苦，性微寒，归肝、胆经，具有疏散退热，升阳舒肝的功效，主治感冒发热、寒热往来、疟疾，肝郁气滞，胸肋胀痛，脱肛，子宫脱落，月经不调等证。
[0034]茜草:性寒，味苦，归肝经,功效:凉血止血；活血化瘀,主治血热咯血、吐血、衄血、尿血、便血、崩漏、经闭、产后瘀阻腹痛、跌打损伤、风湿痹痛、黄疸、疮痈、痔肿等证。
[0035]乌梅:味苦、酸、潘，性温，入肝、肺、脾、大肠经，具有敛肺，涩肠，止血，生津的作用，用于治疗久痢不止，湿热泻痢，便血、尿血、雪崩等证。
[0036]鹅不食草:味辛，性温，入肺、肝经，具有祛风寒，通鼻鸾，止咳祛痰，散瘀消肿的作用，用于风寒表证，鼻塞流涕及鼻渊，咳嗽痰多，百日咳，疮痈肿痛等证。
[0037]山楂:味酸、甘，性微温，归脾、胃、肝经，用于消食健胃，行气散瘀，主要用来治疗食积不化，泄泻，痢疾，山楂为治疗消化不良之常用品，山楂能增加胃消化酶的分泌，促进消化；对痢疾杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌等具有明显的抑制作用。
[0038]陈皮:性温，味辛、苦；归脾、肺经，辛散通温，气味芳香，长于理气，能入脾肺，故既能行散肺气壅遏，又能行气宽中，用于肺气拥滞、胸膈痞满及脾胃气滞、脘腹胀满等证。
[0039]黄精:味甘，性平，入肺、脾、肾经，具有养气养阴，健脾润肺，益肾填精的功效，用于脾胃气阴亏虚，食少无力，阴虚肺燥，干咳少痰，阴虚内热之消渴，肾虚精亏、阳痿遗精、头晕耳鸣、目昏眼花等证。
[0040]山柰:味辛、性温，归胃经，具有行气温中，消食止痛的功效，主治胸膈胀满，脘腹冷痛，饮食不消等证。
[0041]忍冬藤:味甘，性寒，归肺、胃经，具有清热解毒，疏风通络的功效，主治温病发热，热毒血痢，痈肿疮疡，风湿热痹，关节红肿热痛等证。
[0042]高良姜:味辛，性热，归脾、胃经，具有温胃散寒，消食止痛的功效。用于脘腹冷痛，胃寒呕吐，嗳气吞酸等证。
[0043]南沙参:味甘、微苦，性微寒，入肺、胃经，有润肺止咳，养胃生津的作用，主要用于阴虚肺燥、干咳少痰、劳嗽痰血，胃阴不足、口感咽燥、大便秘结、舌红少苔等证。
[0044]芡实:味甘，涩，性平。归脾、肾经。具有益肾固精，补脾止泻，祛湿止带的功能，主治梦遗滑精，脾虚泄泻，脾虚白浊，带下等证。
[0045]延胡索:味苦、辛，性温，归肝、心、胃经，具有善行走散，可升可降，具有活血散瘀，行气止痛的功效，主治胸痹心痛，胁肋、脘腹诸痛，头痛、腰痛、疝气痛、筋骨痛、痛经、经闭，产后瘀腹痛，跌打损伤等证。
[0046]银杏叶:味甘、苦、涩，性平，入心、肺经，具有敛肺平喘，活血养心、涩肠止泻的功效，用于肺虚咳喘，胸闷心痛，头晕头痛，泄泻，痢疾等证。
[0047]瞿麦:味苦，性寒，归心、小肠经，具有利尿通淋，破血通经的功效，用于热淋，血淋，石淋，小便不通，淋浙涩痛，月经闭止等证。
[0048]莱菔子:性平，味辛、甘，归肺、脾、胃经，消具有食除胀，降气化痰的功效，主治饮食停滞、脘腹胀痛、大便秘结、积滞泻痢、痰壅喘咳等证。[0049]本发明还提供了一种治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料，原料包括玉米、麸皮、花生柏、菜柏、鱼粉、磷酸氢钙、食盐、蛋氨酸、苏氨酸、维生素和上述的中药组合物添加剂。
[0050]所述饲料中各原料的重量分别为玉米7kg?9kg、麸皮2kg?3kg、花生柏
0.5kg ?0.7kg、菜柏 0.8kg ?1.2kg、鱼粉 0.5kg ?0.7kg、憐酸氧隹丐 0.05kg ?0.15kg、食盐 0.05kg ?0.15kg、蛋氨酸 0.0lkg ?0.03kg、苏氨酸 0.0lkg ?0.03kg、维生素 0.1kg ?
0.2kg、中药组合物添加剂Ikg?1.5kg。
[0051]进一步，所述饲料中各原料的重量分别为玉米8kg、麸皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、鱼粉0.6kg、磷酸氢I丐0.1kg、食盐0.1kg、蛋氨酸0.02kg、苏氨酸0.02kg、维生素
0.15kg、中药组合物添加剂1.2kg。
[0052]所述维生素可以为维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K3、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、泛酸、叶酸等多种维生素的混合，也可以为维生素预混料，如优维素(北京优利保生物技术有限责任公司提供)。
[0053]本发明还提供了上述饲料的制备方法，具体为取除所述中药组合物添加剂以外的上述各原料先进行粉碎，然后将粉碎后的原料放入混合机进行混合，加入所述中药组合物添加剂，混合后的物料进入调制器，调制温度为70°C，调制时间10秒，经调制后，送入熟化罐进行熟化，熟化时间为5分钟，熟化温度70°C，最后进入制粒器进行制粒，得到成品饲料。
[0054]以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
[0055]实施例1中药组合物I
将穿心莲25g、黄芩60g、白芍30g、侧柏叶30g、牡荆叶25g、白头翁40g、党参35g、柴胡25g、茜草35g、乌梅30g、鹅不食草25g、山楂30g、陈皮20g、黄精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙参30g、芡实25g、延胡索20g、银杏叶35g、瞿麦30g和莱菔子30g混合，获得混合物，加醇浓度为60%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为4L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物I。
[0056]实施例2中药组合物2
将穿心莲20g、黄芩55g、白芍25g、侧柏叶25g、牡荆叶20g、白头翁35g、党参30g、柴胡20g、茜草30g、乌梅25g、鹅不食草20g、山楂25g、陈皮15g、黄精35g、山柰20g、忍冬藤30g、高良姜20g、南沙参25g、芡实20g、延胡索15g、银杏叶30g、瞿麦25g和莱菔子25g混合，获得混合物，加醇浓度为60%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为4L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物2。
[0057]实施例3中药组合物3
将穿心莲30g、黄芩65g、白芍35g、侧柏叶35g、牡荆叶30g、白头翁45g、党参40g、柴胡30g、茜草40g、乌梅35g、鹅不食草30g、山楂35g、陈皮25g、黄精45g、山柰30g、忍冬藤40g、高良姜30g、南沙参35g、芡实30g、延胡索25g、银杏叶40g、瞿麦35g和莱菔子35g混合，获得混合物，加醇浓度为60%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为4L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物3。[0058]实施例4毒理学试验 急性毒性试验
性试验观察，因无法测出LD5tl，故进行了最大给药量的测定。将实施例1制备的中药组合物溶解在蒸馏水中，配置成溶液灌胃小鼠，结果显示，以药物最大给药浓度11.1lg生药/ml,最大给药体积40ml/kg于24小时内给小鼠灌胃给药两次,小鼠最大给药量为888.8g生药/kg，动物未出现不良反应及死亡。解剖观察各脏器未见异常。
[0059]长期毒性试验
本试验应用SD大鼠80只，将实施例1制备的中药组合物溶解在蒸馏水中，配置成溶液灌胃，设对照组及14.5g、29g、58g生药/kg剂量组，连续灌胃给药4周，观察本发明的中药组合物对动物各项指标的影响。试验结果表明，连续给药4周，本发明的中药组合物对大鼠的体重、摄食量、外周血象、凝血时间、心电图、脏器指数等均无明显影响；血液生化十二项指标测定结果，给药4周低剂量组BiLi值高于对照组(P < 0.05)，可能与其中三个血清样本溶血有关；低剂量组、中剂量组TP值高于对照组(P < 0.05)，但均在正常生理范围之内，其它指标与对照组比较无明显差异。恢复期各给药组各项指标测定值与对照组比较均无明显差异。各组各脏器大体观察未见异常。
[0060]综上所述，该药的小鼠急性毒性试验未见毒性反应，大鼠长期毒性试验亦未见明显毒性反应。
[0061]实施例5饲料
取玉米8kg、麸皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、鱼粉0.6kg、磷酸氢隹丐0.1kg、食盐
0.1kg、蛋氨酸0.02kg、苏氨酸0.02kg、维生素0.15kg先进行粉碎,然后将粉碎后的原料放入混合机进行混合，加入实施例1制备的中药组合物添加剂1.2kg进一步混合，混合后的物料进入调制器，调制温度为70°C，调制时间10秒，经调制后，送入熟化罐进行熟化，熟化时间为5分钟，熟化温度70°C，最后进入制粒器进行制粒，得到成品饲料。
[0062]实施例6体外抑菌试验 培养基
普通营养肉汤、普通营养琼脂、麦康凯营养琼脂(由北京奥博星生物技术责任有限公司生产)。
[0063]受试菌株
猪源致病性大肠杆菌02(|、O48和O161来自山东农业大学实验室，从临床患病仔猪尸体中分离经中监所鉴定并保存的优势菌株各I株。
[0064]主要仪器设备
隔水式恒温培养箱、光学显微镜、超低温冰箱、数显恒温水浴锅、电子天平。
[0065]培养基制备
普通营养肉汤、普通营养琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基均按厂家说明书配制，4°C冰箱保存待用。
[0066]致病性大肠杆菌的培养
将菌种接种于麦康凯琼脂培养基上，37°C培养24h，挑取典型菌落接种于普通肉汤培养基中，置37°C培养24h后，取各菌液0.5 mL接种于普通营养琼脂平板上培养8?12h后，用L棒刮取菌苔，用灭菌生理盐水稀释至含菌量5X IO4?5X IO5 CFU/mL备用。[0067]抑菌试验
药液
将实施例1制备的中药组合物溶解在蒸馏水中，获得生药浓度为lg/ml的药液。
[0068]抑菌试验
最小抑菌浓度(MIC)测定
取灭菌试管10支,依次编号,每管先加入灭菌肉汤培养基1.0 mL,然后于第一管中加入制备好的中药水提液1.0 mL，混匀后取出1.0 mL放入第二管，依此类推至第9管，弃掉ImL,第10管不加药物，作为阳性对照，重复制备三套管，取一套重复管不加细菌稀释液用于阴性对照管，另二套重复管一套备用一套做重复实验用。取制备好的细菌稀释液0.1 mL分别加入上述1至10管中混匀，使第1管至第9管药物浓度(mg/mL)分别为500、250、125、62.50,31.25、15.60,7.80,3.90、1.95。置各管于恒温培养箱中37°C培养24h，观察结果。阳性对照细菌生长，呈均匀浑浊状，阴性对照管无细菌生长呈澄清、透明状时，试验成立，观察其它各管情况。
[0069]抑菌试验结果的判断
用重复对照管与试验管和重复实验管的相应各管进行比较，如2组试管内液体全部澄清、透明，则判定无菌生长。如1组澄清另1组浑浊，则用浑浊管中的液体移取0.1 mL进行传代接种到相应管的重复备用管中，如在第二代管内液体澄清、透明，则判定无菌生长，如浑浊则判定有菌生长。以无菌生长的最低稀释度即为最小抑菌浓度。MIC〈7.82 mg/mL，为高度敏感，介于7.82mg/mL~250 mg/mL,为中度敏感，>250 mg/mL,为不敏感。
[0070]最小杀菌浓度(MBC)测定
将上述MIC测定中各管培养物分别画线接种于普通营养琼脂平板，37°C恒温培养24~48h观察结果。菌落数少于3个视为无菌生长，以无细菌生长的药物最低浓度，作为该种药物对该菌的最小杀菌浓度(MBC)。
[0071]抑菌圈直径测定
用灭菌棉签拭子蘸取菌液，在普通琼脂平板表面均匀涂片接种。用孔径6 mm灭菌金属打孔器打孔，每孔加入药液0.05 mL左右以加满而不溢出孔外为宜。做5个重复板，结果求平均值。置于37°C培养24h，然后用游标卡尺测量抑菌圈直径，判断药液对大肠杆菌的抑菌效果，抑菌圈直径〈8 mm，为不敏感，抑菌圈直径8~13 mm之间，为低度敏感，抑菌圈直径在13~19 mm之间，为中度敏感，抑菌圈直径在>19 mm，为高度敏感。
[0072]结果，见表1和表2。
[0073]表1中药组合物对猪源大肠杆菌的MIC和MBC (mg/mL)
【权利要求】
1.一种用于治疗猪致病性大肠杆菌病的饲料，其特征在于:其原料包括玉米、麸皮、花生柏、菜柏、鱼粉、磷酸氢钙、食盐、蛋氨酸、苏氨酸、维生素和用于治疗猪致病性大肠杆菌病中药组合物添加剂。
2.如权利要求1所述的饲料，其特征在于:所述饲料中各原料的重量分别为玉米7kg~9kg、麸皮2kg~3kg、花生柏0.5kg~0.7kg、菜柏0.8kg~1.2kg、鱼粉0.5kg~0.7kg、磷酸氢钙 0.05kg ~0.15kg、食盐 0.05kg ~0.15kg、蛋氨酸 0.01kg ~0.03kg、苏氨酸0.01kg~0.03kg、维生素0.1kg~0.2kg、中药组合物添加剂Ikg~1.5kg。
3.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于:所述饲料中各原料的重量分别为玉米8kg、麸皮2.5kg、花生柏0.6kg、菜柏1kg、鱼粉0.6kg、磷酸氢钙0.1kg、食盐0.1kg、蛋氨酸0.02kg、苏氨酸0.02kg、维生素0.15kg、中药组合物添加剂1.2kg。
4.如权利要求1至3所述的饲料，其特征在于:所述中药组合物添加剂中的原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。
5.如权利要求1至4所述的饲料，其特征在于:所述中药组合物添加剂中各原料药的重量分别为穿心莲20g~30g、黄芩55g~65g、白芍25g~35g、侧柏叶25g~35g、牡荆叶20g~30g、白头翁35g~45g、党参30g~40g、柴胡20g~30g、菌草30g~40g、乌梅25g~35g、鹅不食草20g~30g、山楂25g~35g、陈皮15g~25g、黄精35g~45g、山柰20g~30g、忍冬藤30g~40g、高良姜20g~30g、南沙参25g~35g、芡实20g~30g、延胡索15g~25g、银杏叶30g~40g、瞿麦25g~35g和莱菔子25g~35g。
6.一种 用于治疗猪致病性大肠杆菌病的中药组合物，其特征在于:其原料药包括穿心莲、黄芩、白芍、侧柏叶、牡荆叶、白头翁、党参、柴胡、茜草、乌梅、鹅不食草、山楂、陈皮、黄精、山柰、忍冬藤、高良姜、南沙参、芡实、延胡索、银杏叶、瞿麦和莱菔子。
7.如权利要求6所述的中药组合物，其特征在于:各原料药的重量分别为穿心莲20g~30g、黄芩55g~65g、白芍25g~35g、侧柏叶25g~35g、牡荆叶20g~30g、白头翁35g~45g、党参30g~40g、柴胡20g~30g、菌草30g~40g、乌梅25g~35g、鹅不食草20g~30g、山楂25g~35g、陈皮15g~25g、黄精35g~45g、山柰20g~30g、忍冬藤30g~40g、高良姜20g~30g、南沙参25g~35g、芡实20g~30g、延胡索15g~25g、银杏叶30g~40g、瞿麦25g~35g和莱菔子25g~35g。
8.如权利要求6或7所述的中药组合物，其特征在于:各原料药的重量分别为穿心莲25g、黄芩60g、白芍30g、侧柏叶30g、牡荆叶25g、白头翁40g、党参35g、柴胡25g、茜草35g、乌梅30g、鹅不食草25g、山楂30g、陈皮20g、黄精40g、山柰25g、忍冬藤35g、高良姜25g、南沙参30g、芡实25g、延胡索20g、银杏叶35g、瞿麦30g和莱菔子30g。
9.权利要求6至8所述中药组合物的制备方法，其特征在于: 将各原料药组分按重量混合，获得混合物，加醇浓度为50%~70%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取2h~3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为3L~5L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得中药组合物。
10.权利要求1至5所述饲料的制备方法，其特征在于，包括: 第一步，将所述中药组合物添加剂中的各原料药组分按重量混合，获得混合物，加醇浓度为50%~70%的乙醇溶液进行加热回流提取2次，每次回流提取2h~3h，每Ikg的混合物添加乙醇溶液的量为3L~5L，获得的提取液合并并过滤，静置24h，回收乙醇并浓缩，浓缩成稠膏，干燥，粉碎成细粉，获得所述中药组合物添加剂； 第二步，取所述饲料中除所述中药组合物添加剂的各原料先进行粉碎，然后将粉碎后的原料放入混合机进行混合，再加入第一步制备的中药组合物添加剂进一步混合，混合后的物料进入调制器，调制温度为70°C，调制时间10秒，经调制后，送入熟化罐进行熟化，熟化时间 为5分钟，熟化温度70°C，最后进入制粒器进行制粒，得到成品饲料。
【文档编号】A23K1/10GK103815134SQ201410078818
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2014年3月6日 优先权日:2014年3月6日
【发明者】郝智慧 申请人:郝智慧