一种乌绿或绿乌天麻的培育方法
【专利摘要】本发明公开了一种乌绿或绿乌天麻的培育方法，包括以下步骤：选育出第一代自交系的乌天麻和绿天麻，调控天麻花期相遇，分别杂交，培育出乌绿或绿乌天麻种子，再将乌绿或者绿乌天麻种子通过仿生种植或者田间种植的方法，培育出需要的乌绿或者绿乌天麻。本发明的乌绿或绿乌天麻，采用天麻素含量较高的乌天麻和绿天麻分别自交，再杂交，培育出的天麻素含量高，且产量高的乌绿或绿乌天麻。
【专利说明】一种乌绿或绿乌天麻的培育方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天麻培育【技术领域】，具体涉及一种乌绿或绿乌天麻的培育方法。
【背景技术】
[0002]我国境内，天麻有乌天麻、红天麻、黄天麻、绿天麻四个品种。历年来，我国以栽培乌、红两种天麻为主。乌天麻主产云南，形态好、药用品质好、折干率高，但适应范围小，分生力差，产量低；红天麻主产三峡一带，适应性广、产量高、繁殖力强、抗病力强，但干湿比大、药用质量比乌天麻差。乌红杂交天麻则是以云南乌天麻自交系同三峡地区红天麻自交系杂交而成，集合了父母系的优点:抗病虫害力强、形态好、药用品质即天麻素含量高达0.6%，比乌天麻高60.24%,比红天麻高出一倍多；乌红杂交天麻产量高，每平方米单产达7.5公斤，比乌天麻高出4公斤，比红天麻高出 两公斤,生长周期与乌、红两种天麻差不多。
[0003]虽然乌红天麻产量高，但天麻素含量却并不是很高，所以如何解决天麻产量的同时，还能保证天麻素的含量，成为目前天麻种植的一个难题。
【发明内容】
[0004]本发明提供一种乌绿或绿乌天麻的培育方法，采用天麻素含量较高的乌天麻和绿天麻杂交培育，然后进一步通过仿野生种植或田间种植，同时保证天麻种植产量和天麻素含量。
[0005]为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为:
[0006]一种乌绿或绿乌天麻的培育方法，包括以下步骤:选择地理位置为东经102。19' 22" -102。56' 18"，北纬 29° 28' 4" -29。57' 4"，海拔高度在800-1000米，年平均气温13-15°C，相对湿度80-83%的地方为天麻的育种基地；在育种基地中选择本县不同区域的乌天麻和绿天麻分别纯化自交，通过24个月的培育，选育出第一代自交系的乌天麻和绿天麻；同时分别测定出乌天麻和绿天麻的生物学积温，根据乌天麻和绿天麻的生物学积温和生物学起点温度，调控天麻花期相遇，在温室育种房中将第一代自交系的乌天麻作为母本，绿天麻作为父本，培育出杂交乌绿天麻种子；或者将乌天麻作为父本，绿天麻作为母本，培育出杂交绿乌天麻种子。
[0007]确定种植地的环境状况:如果为田间种植，则选择栽培袋培养模式；如果为仿野生种植，则选择仿野生种植模式。其中:
[0008]在栽培袋培养模式下，具体操作步骤为:
[0009]材料准备:育种袋、洁净河沙、杂木屑、密环菌栽培种、萌发菌栽培种、菌材、阔叶杂树叶和乌绿或绿乌天麻种子；
[0010]浸泡杀菌:把育种袋、洁净河沙、杂木屑、菌材和阔叶杂树叶经过25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液杀菌处理后，浸泡杀菌4小时备用；将阔叶杂树叶和乌绿或绿乌天麻种子密环菌栽培种、萌发菌栽培种装袋育种。
[0011]袋装育种:将乌绿或绿乌天麻种子均匀地拌在萌发菌栽培种中，将菌材、密环菌种、培养基，装入塑料育种袋中育种，将育种袋四周扎小孔；
[0012]育种管理:将塑料育种袋放到育种房育种基地中进行培养，育种袋上面覆盖5-6cm的河沙和杂木屑；在自然光照下，保持通风良好；经过6-8个月培育后，选择体形荷苞为长椭圆，饱满，颜色白嫩，生长旺盛，无病虫害，长度为2-4cm的种麻送入6-9°C环境中再培育20-25天，即可移入大田种植，培育出乌绿或绿乌杂交天麻；
[0013]在仿野生种植模式下，具体操作步骤为:
[0014]种植基地:海拔高度在1000米-2000米之间，地温在18-23度，土壤p H值在5_6之间的酸性沙壤土，在采挖过野生天麻的林间杂灌林下，同时具有50%遮荫率的地方作为种植基地；
[0015]菌材准备:选择直径6cm_8cm、长30cm的阔叶树鲜段材为大菌材,大菌材取40斤，每节段材上砍2-3面的鱼鳞口 ；选择直径3cm以下，长IOcm的阔叶树枝条为小菌材，取10斤；将蜜环菌种、大小菌材通过多菌灵液浸泡4小时后待用；取5斤干树叶，并使用25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液浸泡24小时后待用；
[0016]菌丝培养:先挖底长70cm,宽70cm,深为10_15cm的坑,然后消毒,摆放一层浸泡过的树叶，将浸泡过 4小时的大菌材按鱼鳞口向上的方向竖排摆放，在大菌材之间放置一层小菌材；蜜环菌菌种分成小块状放入大菌材鱼鳞口处以及两头,并在大菌材之间填充腐质土,浇灌足水份,使大菌材、小菌材、菌种和土壤均匀打湿接触；再摆放一层树叶，并盖10-15cm厚的栽培土，浇灌适量水；最后盖上3cm-5cm厚的树叶或稻草。
[0017]种麻点播:经过4-6个月的培养，待蜜环菌菌丝浸入大菌材以后，先将遮盖物和上层栽培土取开，把乌绿或绿乌天麻种子放到长有蜜环菌菌丝的大菌材处，并成错窝摆放，窝距IOcm,在麻种间填充长3cm以下的新小技材,先回填刚挖起来栽培土,与大菌材齐平,烧灌足水份，使大菌材、小菌材、天麻种子和土壤均匀打湿接触，又摆放一层泡过的树叶，回填10cm-15cm厚的土壤,最后盖上3cm_5cm厚的树叶；在培养好的天麻蜜环菌床中，经过I年的生长，培养出乌绿或绿乌杂交天麻。
[0018]萌发菌菌种的培养包括:
[0019]母种培养，培养基质:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾lg、硫酸镁Ig水1000mil ;培养温度25±1°C，培养时间15-20天；
[0020]原种培养，培养基质:将质量百分比为37%的阔叶杂木屑、42%的杂木碎枝叶、18 %的麸皮、1.5 %的白糖、1.5 %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接母种，培养室温度25土 1°C，时间55-65天；
[0021]栽培种培养，培养基质:将质量百分比为78%的阔叶杂树叶、19%的麸皮、1.5%的白糖、1.5%的石膏；装袋，灭菌，无菌室接原种，培养室温度25± 1°C，时间65-75天。
[0022]蜜环菌菌种的培养包括:
[0023]母种培养，培养基质:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾lg、硫酸镁Ig水1000miI，培养温度25 ± I °C，培养时间15-20天；
[0024]原种培养，培养基质:将质量百分比为37%的阔叶杂木屑、30%的麸皮、30%的玉米面、1.5 %的白糖、1.5 %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接母种，培养室温度25土 1°C，时间35-45 天；
[0025]栽培种培养，培养基质:将质量百分比为78%的阔叶杂细技条、10%的木屑、10 %的麸皮、1 %的白糖、1 %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接原种，培养室温度25± 1°C，时间35-40 天。
[0026] 装袋育种过程中的培育基采用河沙、木屑、树叶和树枝菌材。
[0027]在仿野生种植模式下，育种基地的地势坡度为9-10度。
[0028]在育种管理时，自然光照的条件下，温度超过25°C时采用遮阳网遮阳。
[0029]在菌丝培养时，大菌材放置的间距为4_5cm。
[0030]装袋育种中，培养基采用河沙、木屑、树叶和大小菌材混合而成。
[0031]在育种管理时，培养温度为18-23°C，湿度为50-60%。
[0032]由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是:
[0033]本发明的一种乌绿或绿乌天麻的培育方法，采用乌天麻和绿天麻分别纯化自交后杂交，然后分别仿野生种植或田间种植，产出乌绿或绿乌天麻，天麻产量高，而且天麻素的含量也明显提高；同时提供了生产天麻用的蜜环菌菌种和萌发菌菌种，非常有助于自交天麻和杂交天麻的培育。
【具体实施方式】
[0034]下面结合具体地实施例，阐述本发明的乌绿或绿乌天麻的培育方法。本发明中所指的乌绿天麻是指乌绿杂交天麻的母本是乌天麻，父本是绿天麻；而绿乌杂交天麻的母本是绿天麻，父本是乌天麻。
[0035]乌绿或绿乌天麻的培育方法，包括以下步骤:选择地理位置为东经102。19' 22" -102。56' 18"，北纬 29° 28' 4" -29。57' 4"，海拔高度在 800-1000米，年平均气温13-15°C，相对湿度80-83%的地方为天麻的育种基地；在育种基地中选择不同区域的乌天麻和绿天麻分别纯化自交，通过24个月的培育，选育出第一代自交系的母本和父本；通过3-4年的重复观察分别测定出乌天麻和绿天麻的生物学积温，根据乌天麻和绿天麻的生物学积温和生物学起点温度。该地区乌天麻的起点温度是12.3°C，绿天麻的起点温度是12.9°C。乌天麻的箭麻从移栽到开花阶段的生物学积温是895°C，绿天麻的箭麻从移栽到开花阶段的生物学积温是936°C。然后建立调控天麻花期相遇的微分方程，
[0036]Y4= -6239189865X+50.34926378，
[0037]IYI = I 0.89358736 | > Zci tltl6 = 0.6481 ；
[0038]Ygj= -546834569X+60.63783492，
[0039]IYI = 1-0.987236935 | > Zci tltl7 = 0.7648。
[0040]根据该微分方程，在温室育种房中通过第一代自交系的母本和父本，培育出杂交天麻种子，根据母本或父本的选择不同，可分别培育出乌绿或绿乌杂交天麻种子。
[0041]计算本方程是:在当年的12月5日将本县乌天麻作母本与另一地区的绿天麻作父本进行杂交；同时放入6~8°C的空调内，乌天麻在次年的4月25日从空调内取出移栽到育种盆中；绿天麻在次年的3月25日从空调内取出移栽到育种盆中；乌天麻和绿天麻的花期于5月23日后相遇，就可授粉杂交。
[0042]确定种植地的环境状况，如果为田间种植，选择栽培袋培养模式；如果为仿野生种植，则选择仿野生种植模式，其中:
[0043]在栽培袋培养模式下，具体操作步骤为:[0044]材料准备:育种袋、洁净河沙、杂木屑、密环菌栽培种、萌发菌栽培种、菌材、阔叶杂树叶；采摘杂交天麻蒴果10-15个,抖出杂交天麻种子；
[0045]浸泡杀菌:把育种袋、洁净河沙、杂木屑、菌材、菌材和阔叶杂树叶经过25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液杀菌处理后，浸泡杀菌4小时备用；将阔叶杂树叶和乌绿或绿乌天麻种子、密环菌栽培种、萌发菌栽培种装袋育种。
[0046]袋装育种:将杂交天麻种子均匀地拌在萌发菌栽培种中，使用长43cm宽36cm塑料育种袋、长25cm直径3cm以下的小菌材、枝条密环菌种、培养基，采用分层或混播的方式装入塑料育种袋中育种，将袋装四周扎小孔。培育基采用河沙、木屑、树叶和大小菌材混合而成。
[0047]育种管理:将塑料育种袋放到育种房或育种基地中进行培养，育种袋上面覆盖5-6cm的河沙和杂木屑；在自然光照下，培养温度为18-23°C，湿度为50-60% ;保持通风良好，温度超过25°C时采用遮阳网遮阳。经过6-8个月培育后，选择体形荷苞为长椭圆，饱满，颜色白嫩，生长旺盛，无病虫害，长度为2-4cm的种麻送入6-9°C环境中再培育20-25天，即可移入大田种植，培养出乌绿或绿乌杂交天麻；[0048]在仿野生种植模式下，具体操作步骤为:
[0049]种植基地:海拔高度在1000米-2000米之间，地温在18_23度，土壤pH值在5_6之间的酸性沙壤土，在采挖过野生天麻的林间杂灌林下，同时具有50%遮荫率的地方作为种植基地；育种基地的地势坡度为9-10度。
[0050]菌材准备:选择直径6cm_8cm、长30cm的阔叶树鲜段材为大菌材,大菌材取40斤，每节段材上砍2-3面的鱼鳞口 ；选择直径3cm以下，长IOcm的阔叶树枝条为小菌材，取10斤；将大小菌材通过多菌灵液浸泡4小时后待用；取5斤干树叶，并使用25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液浸泡24小时后待用。
[0051]菌丝培养:先挖底长70cm,宽70cm,深为10_15cm的坑,然后消毒,摆放一层浸泡过的树叶，将浸泡过4小时的大菌材按鱼鳞口向上的方向竖排摆放，大菌材放置的间距为4-5cm。在每节大菌材间放置一层小菌材；蜜环菌菌种分成块状放入大菌材鱼鳞口处以及两头,并在大菌材之间填充腐质土,浇灌足水份,使大菌材、小菌材、菌种和土壤均匀打湿接触；再摆放一层树叶，并盖10-15cm厚的栽培土，浇灌适量水；最后盖上3cm-5cm厚的树叶、稻草等杂草。
[0052]种麻点播:经过4-6个月的培养，待蜜环菌菌丝浸入菌材以后，先将遮盖物和栽培土取开，把种麻放到长有蜜环菌菌丝的大菌材处，并成错窝摆放，窝距10cm，在麻种间填充长3cm以下的新小技材，先回填刚挖起来的栽培土，与大菌材齐平，浇灌足水份，使大菌材、小菌材、种麻和土壤均匀打湿接触，又摆放一层泡过的树叶，回填10cm-15cm厚的土壤,最后盖上3cm-5cm厚的树叶；在培养好的天麻蜜环菌床中，经过I年的生长，培养出乌绿或绿乌杂交天麻。
[0053]本发明所采用的萌发菌菌种的培养包括:
[0054]母种培养，培养基PDA:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾lg、硫酸镁Ig水1000mil ;培养温度25±1°C，培养时间15~20天。
[0055]原种培养，培养基质:按质量百分比计算，将除去有毒汁、芳香及油脂外的阔叶杂木屑37%、杂木碎枝叶42%、麸皮18%、白糖1.5%、石膏1.5% ;装瓶经高压灭菌，无菌室接母种，培养室温度25± I°C，时间55~65天。
[0056]栽培种培养，培养基质:按质量百分比计算，将除去有毒汁、芳香和油脂外的阔叶杂树叶78%、麸皮19%、白糖1.5%、石膏1.5%;装袋经高压灭菌，无菌室接原种，培养室温度25±1°C，时间65~75天。
[0057]本发明所采用的蜜环菌菌种的培养包括:
[0058]母种培养，培养基PDA:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾19、硫酸镁Ig水lOOOmil。培养温度25± I°C，培养时间15~20天。
[0059]原种培养，培养基质:按质量百分比计算，除去有毒汁、芳香和油脂外的阔叶杂木屑37%、麸皮30%、玉米面30%、白糖1.5%、石膏1.5%。装瓶经高压灭菌，无菌室接母种，培养室温度25 ± I °C，时间35~45天。
[0060]栽培种培养，培养基质:按质量百分比计算，除去有毒汁、芳香和油脂外的阔叶杂细技条78%、木屑10%、麸皮10%、白糖I %、石膏I %。装瓶经高压灭菌，无菌室接原种，培养室温度25±1°C，时间35~40天。
[0061]杂交第一代种麻生长出来的天麻，包括可作为商品麻的箭麻，以及可作为下一代种植的白麻和米麻；种麻继续种植，又可繁育出箭麻和下一代种麻；按照这样的无性繁殖，可连续进行3年种植，三年无性繁殖后可淘汰。然后再通过乌天麻和绿天麻的自交、杂交的繁殖方法来培育出新天麻 种麻。
【权利要求】
1.一种乌绿或绿乌天麻的培育方法，其特征在于，包括以下步骤: 选择地理位置为东经102 ° 19 ' 22 " -102 ° 56 ' 18 "，北纬29° 28' 4" -29° 57' 4 "，海拔高度在800-1000米，年平均气温13_15°C，相对湿度80-83 %的地方为天麻的育种基地；在育种基地中选择不同区域的乌天麻和绿天麻分别纯化自交，通过24个月的培育，选育出第一代自交系的乌天麻和绿天麻；同时分别测定出乌天麻和绿天麻的生物学积温，根据乌天麻和绿天麻的生物学积温和生物学起点温度，调控天麻花期相遇，在温室育种房中将第一代自交系的乌天麻作为母本，绿天麻作为父本，培育出杂交乌绿天麻种子；或者将乌天麻作为父本，绿天麻作为母本，培育出杂交绿乌天麻种子; 确定种植地的环境状况:如果为田间种植，则选择栽培袋培养模式；如果为仿野生种植，则选择仿野生种植模式，其中: 在栽培袋培养模式下，具体操作步骤为: 材料准备:育种袋、洁净河沙、杂木屑、密环菌栽培种、萌发菌栽培种、菌材、阔叶杂树叶和乌绿或绿乌天麻种子； 浸泡杀菌:把育种袋、洁净河沙、杂木屑、菌材、阔叶杂树叶经过25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液杀菌处理后，浸泡杀菌4小时备用；将阔叶杂树叶和乌绿或绿乌天麻种子、密环菌栽培种、萌发菌栽培种装袋育种。 袋装育种:将乌绿或绿乌天麻种子均匀地拌在萌发菌栽培种中，将菌材、密环菌种、培养基，装入塑料育种袋中育种，将育种袋四周扎小孔； 育种管理:将塑料育种袋放到育种房或育种基地中进行培养，育种袋上面覆盖5-6cm的河沙和杂木屑；在自然光照下，保持通风良好；经过6-8个月培育后，选择体形荷苞为长椭圆，饱满，颜色白嫩，生长旺盛，无病虫害，长度为2-4cm的种麻送入6-9°C环境中再培育20-25天，即可移入大田种植，培育出乌绿或绿乌杂交天麻； 在仿野生种植模式下，具体操作步骤为: 种植基地:海拔高度在1000米-2000米之间，地温在18-23度，土壤pH值在5_6之间的酸性沙壤土，在采挖过野生天麻的林间杂灌林下，同时具有50%遮荫率的地方作为种植基地； 菌材准备:选择直径6cm-8cm、长30cm的阔叶树鲜段材为大菌材，大菌材取40斤,每节段材上砍2-3面的鱼鳞口 ；选择直径3cm以下，长IOcm的阔叶树枝条为小菌材，取10斤；将蜜环菌种、大小菌材经过多菌灵液浸泡4小时后待用；取5斤干树叶，并使用25%多菌灵可湿性粉剂200~300倍液浸泡24小时后待用； 菌丝培养:先挖底长70cm,宽70cm,深为10_15cm的坑,然后消毒,摆放一层浸泡过的树叶，将浸泡过4小时的大小菌材按鱼鳞口向上的方向竖排摆放，在大菌材之间放置一层小菌材；蜜环菌菌种分成小块状放入大菌材鱼鳞口处以及两头,并在大菌材之间填充腐质土，浇灌足水份,使大菌材、小菌材、菌种和土壤均匀打湿接触；再摆放一层树叶,并盖10-15cm厚的栽培土，浇灌适量水；最后盖上3cm-5cm厚的树叶或稻草。 种麻点播:经过4-6个月的培养，待蜜环菌菌丝浸入大菌材以后，先将遮盖物和栽培土取开，把乌绿或绿乌天麻种子放到长有蜜环菌菌丝的大菌材处，并成错窝摆放，窝距IOcm,在麻种间填充长3cm以下的新小技材，先回填刚挖起来栽培土，与大菌材齐平，烧灌足水份，使大菌材、小菌材、天麻种子和土壤均匀打湿接触，又摆放一层泡过的树叶，回填10cm-15cm厚的土壤,最后盖上3cm_5cm厚的树叶；在培养好的天麻蜜环菌床中，经过I年的生长，培养出乌绿或绿乌杂交天麻。
2.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培育方法，其特征在于，萌发菌菌种的培养包括， 母种培养，培养基质:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾lg、硫酸镁Ig水1000mil ;培养温度25±1°C，培养时间15-20天； 原种培养，培养基质:将质量百分比为37 %的阔叶杂木屑、42 %的杂木碎枝叶、18 %的麸皮、1.5 %的白糖、1.5 %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接母种，培养室温度25土 1°C，时间55-65 天； 栽培种培养，培养基质:将质量百分比为78 %的阔叶杂树叶、19 %的麸皮、1.5 %的白糖、1.5%的石膏；装袋，灭菌，无菌室接原种，培养室温度25± 1°C，时间65-75天。
3.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培育方法，其特征在于，蜜环菌菌种的培养包括: 母种培养，培养基质:马铃薯200g、琼脂20g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾lg、硫酸镁Ig水1000mi I，培养温度25±1°C，培养时间15-20天； 原种培养，培养基质:将质量百分比为3 7 %的阔叶杂木屑、3 O %的麸皮、3 O %的玉米面、1.5 %的白糖、1.5 %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接母种，培养室温度25± I °C，时间35-45 天； 栽培种培养，培养基质:将质量百分比为78%的阔叶杂细技条、10%的木屑、10%的麸皮、I %的白糖、I %的石膏，装瓶，灭菌，无菌室接原种，培养室温度25± 1°C，时间35-40天。
4.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培育方法，其特征在于，装袋育种过程中的培育基采用河沙、木屑、树叶和树枝菌材。
5.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培育方法，其特征在于，在仿野生种植模式下，育种基地的地势坡度为9-10度。
6.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培养方法，其特征在于，在育种管理时，自然光照的条件下，温度超过25 °C时采用遮阳网遮阳。
7.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培养方法，其特征在于，在菌丝培养时，大菌材放置的间距为4-5cm。
8.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培养方法，其特征在于，在育种管理时，培养温度为18-23°C，湿度为50-60%。
9.根据权利要求1所述的乌绿或绿乌天麻的培养方法，其特征在于，所述的装袋育种中，培养基采用河沙、木屑、树叶和大小菌材混合而成。
【文档编号】A01G1/04GK103947429SQ201410195503
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年5月4日 优先权日:2014年5月4日
【发明者】刘修文 申请人:刘修文