本发明属于生物农药技术领域，具体涉及一种生物杀线剂组合物及其应用。
背景技术：
植物根结线虫(Meloidogyne spp.)是一类世界性分布的重要植物病原物，其寄生范围广，环境适应性强，可危害蔬菜、粮食、烟草、花生、果树、观赏植物以及中草药等2000多种植物，尤其以番茄、黄瓜等大棚蔬菜作物受损严重。目前，全世界已经发现报道的根结线虫有100多种，我国以南方根结线虫(M.incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、象耳豆根结线虫(M.enterolobii)、花生根结线虫(M.arenaria)、北方根结线虫(M.hapla)等发生危害较为严重，平均产量损失达20-30％，严重的可达70％，甚至绝产。作物根结线虫已成为保护地蔬菜发展的主要限制因素。
植物根结线虫危害日趋严重，但缺少合适的生防制剂。植物根结线虫的主要生防因子有捕食性和寄生性生物两大类,其中研究最多的是捕食线虫真菌、内寄生真菌以及内寄生细菌。真菌或细菌的次生代谢产物作为第二代线虫生防因子，具有作用快、环境相容性好、不易造成二次污染等优点，已成为国内外研究的热门领域。尽管已经报道的真菌或细菌杀线虫活性代谢物很多，但作为生物农药登记、用于防治植物线虫病害的极少，目前在生产上使用较多的有淡紫拟青霉、蜡样芽孢杆菌等，但这些生物杀线虫剂单独使用时用量大、效果不佳，且对线虫的防治效果受土壤环境因素影响较大。因此，需要开发作用效果稳定、防治效果较好的生物防治制剂。
总状共头霉真菌(Syncephalastrum racemosum)Sr18是天津师范大学从土壤分离的线虫生防真菌，其发酵液对植物根结线虫、大豆孢囊线虫和松材线虫等均具有较好的防治效果，处理48小时后线虫死亡率在85％以上，已在生产上应用于防治黄瓜、番茄、芹菜、辣椒等作物根结线虫，但单独使用总状共头霉真菌Sr18发酵液防治根结线虫时用量较大。
阿维菌素是由链霉菌中阿维链霉菌Streptomyces avermitilis发酵产生的一类十六元大环内酯化合物，具有杀菌、杀虫、杀螨、杀线虫活性。在生产上用于防治线虫的主要有阿维菌素乳油、阿维菌素颗粒剂等，也有阿维菌素与噻唑膦、毒死蜱等混用的产品，但未见阿维菌素与生防制剂混合使用的组合。长期单一使用阿维菌素防治线虫，易使线虫产生抗药性。
技术实现要素：
本发明针对目前蔬菜、瓜果等作物中易发生根结线虫危害、且难以治理的问题，提出一种生物杀线剂组合物。
本发明的目的还在于提供一种生物杀线剂组合物的应用。
一种生物杀线剂，由总状共头霉Sr18发酵液和阿维菌素乳油混合而成，所述总状共头霉Sr18发酵液的干物质含量为5.0-6.0g/L，阿维菌素乳油为1.5-2.0％阿维菌素乳油，所述总状共头霉Sr18发酵液与阿维菌素乳油的体积比为4:3～6:1。
所述总状共头霉Sr18的发酵培养基为30％马铃薯浸汁+2％蔗糖+0.2％进口麦芽精。
所述总状共头霉Sr18发酵液为浓缩水剂，其干物质含量为5.4g/L，阿维菌素乳油为1.8％阿维菌素乳油，所述总状共头霉Sr18发酵液与阿维菌素乳油的体积比为4:3～5:2。
上述生物杀线剂防治作物根结线虫中的应用。
所述的线虫为作物根结线虫。
所述的作物为黄瓜、番茄、辣椒、马铃薯。
所述的应用是将生物杀线剂喷施至作物土壤中。
上述生物杀线剂的用量为7ml/m2。
作物移栽前喷施，将土壤深翻20-30cm后起垄，移栽前2天，将生物杀线剂组合物用水稀释20倍，均匀浇灌于垄上。
本申请的生物杀线剂组合可以达到以下效果：(1)组合物表现出较好的增效作用，组合物的杀线虫效果比单剂均有明显提高，同时降低了杀线剂的使用剂量，减少了对环境的不良影响；(2)本发明组合物能促进作物生长，增加作物产量。
具体实施方式：
下面结合实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1生物杀线剂的配置
1)、制备总状共头霉Sr18发酵液：Sr18菌种(可以对公众发放)活化后，将孢子悬浮液(孢子浓度为107个/L)接入装有22L培养基的种子罐中，26℃培养24h，作为一级种子。以4％接种量将一级种子接入装有150L发酵培养基的200L发酵罐中进行发酵，发酵条件为：搅拌转速198r/min，罐压0.05MPa，通气量以维持溶氧水平为20％为原则，发酵时间40h。所述的发酵培养基(w/w)为：30％马铃薯浸汁+2％蔗糖+0.2％进口麦芽精。发酵结束后，发酵醪液采用板框过滤去除菌体，所得滤液在70℃条件下进行真空浓缩，制备成8倍重量浓缩水剂。
2)、阿维菌素乳油，自北京中农大生物技术股份有限公司购买，有效成分含量为1.8％，剂型为乳油。
3)、配置生物杀线剂组合。将总状共头霉Sr18发酵液与阿维菌素乳油两种生物杀线剂按比例混匀，用清水稀释20倍后备用。
实施例2生物杀线剂的应用方法
按照以下步骤进行：
(1)将土壤深翻20-30cm后起垄；
(2)移栽前2天，将已经用水稀释20倍的生物杀线剂稀释液，均匀浇灌于垄上。
(3)对长季节蔬菜，在种植中期，增加1次用药，方法同上。
(4)用药后45-60天，调查对线虫的控制效果。
线虫分离及危害程度评价方法为：
土壤根结线虫分离，采用浅盘法；
根系中侵入线虫数量观察，采用酸性品红染色法；
根系危害程度评价，采用根结指数法；
根结线虫防治效果的计算方法：
土壤线虫死亡率计算方法为：死亡率(％)＝(对照区线虫增长率-处理区线虫增长率)×100/(1-对照区线虫增长率)。
根系中侵入线虫的减退率计算方法为：减退率(％)＝(对照区侵入线虫数-处理区侵入线虫数)×100/对照区侵入线虫数。
根系危害程度评价计算方法为：
根结线虫分级标准为：
0级，无根结，根系(块茎)健康；
1级，仅有少量根结,根结占全根系(块茎)的10％以下；
3级，根结明显，根结占全根系(块茎)的11-25％
5级，根结特别明显，根结占全根系(块茎)的26-50％；
7级，根结数量很多，占全根系(块茎)的51-75％；
9级，根结数量特多，占全根系(块茎)的75％以上。
根结指数计算方法为：
防治效果计算方法为：
组合物田间防治试验1
防治对象：黄瓜南方根结线虫。试验点：天津市宝坻区。在施药前旋耕土壤，按照试验小区面积划分小区后起垄，按照使用剂量分装药剂(表1)，加适量清水稀释20倍后，通过喷雾器均匀施药，施药后2天进行移栽。施药后50天调查发现，组合物可降低土壤线虫数量90.7％，减少根系中侵入线虫数量86.7％，根结指数防治效果达74.3％，增加黄瓜产量44.1％，综合评价，高于总状共头霉Sr18发酵液和阿维菌素乳油单独使用时的效果，且可降低阿维菌素用量33.3％。
表1生物杀线剂组合物对黄瓜根结线虫的防治效果
组合物田间防治试验2
防治对象：番茄南方根结线虫。试验点：北京市大兴区。在施药前旋耕土壤，按照试验小区面积划分小区后起垄，按照使用剂量分装药剂(表2)，加适量清水稀释20倍后，通过喷雾器均匀施药，施药后2天进行移栽。施药后60天调查发现，组合物可降低土壤线虫数量77.5％，减少根系中侵入线虫数量73.7％，根结指数防治效果达68.1％，增加黄瓜产量33.9％，综合评价，高于总状共头霉Sr18发酵液和阿维菌素乳油单独使用时的效果，且可降低阿维菌素用量50％。
表2生物杀线剂组合物对番茄根结线虫的防治效果
组合物田间防治试验3
防治对象：辣椒象耳豆根结线虫。试验点：海南省海口市。在施药前旋耕土壤，按照试验小区面积划分小区后起垄，按照使用剂量分装药剂(表3)，加适量清水稀释20倍后，通过喷雾器均匀施药，施药后2天进行移栽。施药后70天调查发现，组合物可降低土壤线虫数量72.5％，减少根系中侵入线虫数量48.2％，根结指数防治效果达57.3％，增加黄瓜产量31.3％，高于总状共头霉Sr18发酵液与阿维菌素单独使用时的效果，且可降低阿维菌素用量16.7％。
表3生物杀线剂组合物对辣椒根结线虫的防治效果
组合物田间防治试验4
防治对象：马铃薯爪哇根结线虫。试验点：广东省湛江市。在施药前翻耕土壤，按照试验小区面积划分小区后起垄、覆膜，按照使用剂量分装药剂，加适量清水稀释20倍后，通过手持式喷壶均匀浇灌，2天后进行移植。施药后60天调查发现，组合物可降低土壤线虫数量65.0％，减少块茎中侵入线虫数量56.9％，根结指数防治效果达65.2％，增加马铃薯产量27.8％，综合评价，高于总状共头霉Sr18发酵液与阿维菌素乳油单独使用时的效果，但可降低阿维菌素用量50％。
表4生物杀线剂组合物对马铃薯根结线虫的防治效果
以上所有试验表明：上述组合物有较好的增效作用，对番茄、黄瓜、辣椒、马铃薯根结线虫均有很好的防治效果，且可以减少阿维菌素的用量，延缓线虫抗药性的产生。
以上所述仅为本发明的较佳实施实例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则以内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
本发明得到国家自然科学基金项目资助(项目编号31272019，31272022) 。