1.一种遗字138甘薯的脱毒快繁方法,其特征在于,具体步骤为:
(1)无菌外植体的获得:
选取遗字138甘薯苗顶部1.5cm长的茎尖,先用70%的酒精浸泡10-15s,再用0.1%的氯化汞消毒6-8min,然后将其用无菌水冲洗6-8次,在超净工作台上,采用解剖镜观察进行茎尖的剥离,获得0.3-0.4mm的茎尖分生组织;
(2)茎尖分生组织培养脱毒:
将剥离获得的茎尖分生组织接种在茎尖诱导培养基上,静置于温度为30℃、光照强度为3000lx的条件下,每天进行18h光照培养,培养时间为18-25天,将其转入普通培养基上,每天进行15h光照培养,培养时间为55-60天,得到茎尖试管苗;
(3)脱毒鉴定:
首先采取目测法,淘汰弱苗和显症苗,然后再采用血清学法鉴定甘薯病毒,淘汰没有脱毒的遗字138甘薯苗;
(4)脱毒甘薯苗快繁:
在无菌条件下,将经过茎尖分生组织培养和脱毒鉴定后的优质遗字138甘薯苗茎尖,切成单节接种到普通培养基上,静置于温度为30℃,光照强度为3000lx的条件下,每天进行15h光照培养,培养时间为20-23天,按此程序不断的转接培养,进行脱毒遗字138甘薯苗的快繁。
2.根据权利要求1所述的一种遗字138甘薯的脱毒快繁方法,其特征在于,所述茎尖诱导培养基的组成为MS+3%蔗糖+0.7%琼脂+1mg/L6-BA。
3.根据权利要求2所述的一种遗字138甘薯的脱毒快繁方法,其特征在于,所述普通培养基的组成为MS+3%蔗糖+0.7%琼脂。
4.根据权利要求3所述的一种遗字138甘薯的脱毒快繁方法,其特征在于,所述血清学法鉴定遗字138甘薯病毒的具体操作方法为:每试管苗取基部2-3片叶装入塑料袋中,加入1mlTBS-DIECA提取缓冲液,轻轻碾压,使样品与组织液混匀,4℃下静置70-80min,取上清液点样在准备好的硝酸纤维素样膜上,进行斑点酶联免疫吸附实验,然后冲洗、显色,如果呈现蓝紫色为没有脱毒,无色为脱去病毒。