本发明涉及组织培养技术领域，尤其涉及一种葡萄的组培快繁方法。
背景技术：
葡萄是广受人们欢迎的水果，可直接食用，还可以做成葡萄干、葡萄酒等。葡萄的繁殖是葡萄种植中非常关键的环节，目前，葡萄的繁殖方法主要是生物学的方法，包括扦插繁殖和嫁接繁殖。传统的繁殖方法周期非常的长，成活率也不理想。组织培养的方法能够大大缩短葡萄的繁殖周期，但是需要在无菌条件下进行，外植体的消毒是组织培养中的关键，目前，组织培养的污染率仍较高。
技术实现要素：
发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种葡萄的组培快繁方法，污染率低。
一种葡萄的组培快繁方法，包括：
1)挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段；
2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再将茎段依次于70～75％的酒精中浸泡30s、0.2～0.3％的升汞浸泡3min、0.3～0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s；
3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段依次经分化培养、增殖培养、生根培养后，获得葡萄组培苗。
所述分化培养的培养基的配方为MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
所述增殖培养的培养基的配方为MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
所述生根培养的培养基的配方为1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂。
葡萄的品种为“巨峰”。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明葡萄的组培快繁方法简单、高效，污染率低。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发 明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于70％的酒精中浸泡30s后，再用0.2％的升汞浸泡3min，最后用0.5％次氯酸钠浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为4.9。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，采用本发明三步消毒后，污染率仅为2％。
实施例2
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于75％的酒精中浸泡30s后，再用0.3％的升汞浸泡2min，最后用0.3％次氯酸钠浸泡8min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为4.9。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，采用本发明三步消毒后，污染率仅为1.4％。
对比例1
一种葡萄的组培快繁方法，具体步骤如下：
(1)于每年的3月份，挑选生长健壮、无病虫害的“巨峰”葡萄植株，取当年新生的嫩梢，用剪刀剪去葡萄的叶子，留取4cm长的带芽的茎段。
(2)取得的茎段用流水冲洗20分钟，再在超净工作台中进行消毒处理，消毒时，将茎段于75％的酒精中浸泡30s后，再置于0.2％的升汞中浸泡5min，浸泡结束后，再用无菌水冲洗三次，每次30s。
(3)将消毒后的茎段简单修剪后，留取2cm左右的带芽茎段接种在培养基(MS+GA30.3mg/L+IBA0.5mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上，25℃光照培养，，45天左右分化成2cm左右的小苗，再将小苗接种到增殖培养基(MS+GA30.3mg/L+6-BA0.6mg/L+IBA0.3mg/L+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行增殖培养，温度为25℃，每天光照10个小时，50天后形成丛生苗。增殖系数为5.3。
(4)取增殖培养后的小苗，对根部进行修剪后接种到生根培养基(1/2MS+1.5mg/L IAA+30g/L蔗糖+10g/L琼脂)上进行生根培养，温度为25℃，一般15天左右生根，生根率可达95％。
茎段接种到培养基上25天统计污染率，经统计，本发明的污染率为8％。