一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法与流程

本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法。

背景技术：

白珠树属(Gaultheria Kalm ex Linn.)大多数种类的枝和叶含有芳香油,是轻工业和医药工业的天然型精细化工原料。该属植物开花乳白色，花冠钟形且下垂，果实红、白或蓝色，且果期较长，又是珍贵的园林观赏植物。作为重要经济价值的资源植物，白珠树属植物具有较大的开发潜力。中国拥有白珠树属植物35种，占世界物种量的近四分之一，其中14种为特有。然而，目前国内对于这个种质资源丰富、经济价值和开发潜力较高的类群，仅有形态分类、物种鉴定、起源和演化、化合物分离提取等基础性研究，而对该类群种质资源引种驯化及保护性开发研究还处于停滞阶段，对其组培繁殖方面的研究也尚未见报道。为加快合理开发利用我国丰富的白珠树资源，开展该属植物的组培快繁技术具有十分重要的意义。

本发明中涉及的平铺白珠树(Gaultheria procumbens L.)是白珠树属中的一个极具观赏性的种类，别名美国鹿蹄草，为10-15cm的低矮常绿灌木，具鹿蹄草香味，花白色，果为浆果状、5爿裂的蒴果，包藏于花后膨大而成为肉质的萼内，红色，观赏性极高，现已成为国际花卉市场上十分热销的观果植物。近两年，随着国内家庭园艺的兴起，平铺白珠树逐渐受到了国内花卉生产商的关注。但是，由于平铺白珠树的种子细如沙砾，常规播种育苗中存在着播种不便、出苗率低及养护困难等问题，且会受到季节和资源的限制，短时间内很难开展大规模育苗工作。为此，研发出一种适宜平铺白珠树的组培快速繁殖技术，能够有效解决实际生产中的育苗量低且速度缓慢的问题，以促进我国白珠属植物资源合理开发及保护。

技术实现要素：

为有效解决实际生产中平铺白珠树育苗出苗率低且速度缓慢的技术问题，本发明提供一种培养周期短、不受季节限制、并且成活率高的平铺白珠树的组培快速繁殖方法，以促进平铺白珠树产业发展及该属植物资源的保护开发利用。

本发明的技术方案如下：

1、一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法，包括以下步骤：

(1)平铺白珠树种子的消毒处理

在无菌条件下，将当年生的平铺白珠树种子在质量分数为25％的H₂O₂溶液中浸泡20min，用无菌滤纸吸干种子表面水分，备用；

(2)无菌苗的获得

在无菌条件下，将经步骤(1)消毒处理的种子播种在种子萌发培养基上，培养30-40天，获得高度为2-3cm的无菌苗，培养条件为：温度25℃±2℃，光照12h·d^-1，光照度为4000lx；所述种子萌发培养基为：WPM+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

(3)丛生芽的获得

在无菌条件下，在步骤(2)获得的无菌苗上切取带芽茎段接入丛生芽诱导培养基，培养30-40天，获得丛生芽，培养条件与步骤(2)所述的培养条件相同，所述的丛生芽诱导培养基为：WPM+ZT 1.0～3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

(4)生根培养

将步骤(3)获得的丛生芽接入生根培养基，培养30天-40天，得带根植株，培养条件与步骤(2)所述的培养条件相同，所述的生根培养基为：WPM+IBA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.2～0.75mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

2.根据技术方案1所述的一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法，步骤(3)中所述的丛生芽诱导培养基为：WPM+ZT 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；步骤(4)中所述的生根培养基为：WPM+IBA 1.0mg/L+NAA 0.50mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

3.根据技术方案1或2所述的一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法，步骤(3)中切取的带芽茎段的长度为1～2cm。

4.一组平铺白珠树的组培快速繁殖的专用培养基，所述的专用培养基由以下种子萌发培养基、丛生芽诱导培养基和生根培养基组成：

所述种子萌发培养基为：WPM+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

所述的丛生芽诱导培养基为：WPM+ZT 1.0～3.0mg/L+IBA 0.1mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

所述的生根培养基为：WPM+IBA 0.5～1.5mg/L+NAA 0.2～0.75mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

5.根据技术方案4所述的一组平铺白珠树的组培快速繁殖的专用培养基，所述的专用培养基由以下种子萌发培养基、丛生芽诱导培养基和生根培养基组成：

所述种子萌发培养基为：WPM+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

所述的丛生芽诱导培养基为：WPM+ZT 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4；

所述的生根培养基为：WPM+IBA 1.0mg/L+NAA 0.50mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

本发明的有益效果在于：

本发明首次针对白珠树属植物平铺白珠树的组培快繁技术进行研究，提出一种平铺白珠树的组培快速繁殖方法以及专用的培养基。采用本发明方法，单芽诱导出的丛生芽数量多，约3-8个,丛生芽诱导率高，诱导率为83.33-100％，芽苗生长健壮，单株可高达3-5cm，繁殖系数高，繁殖系数达4.12-5.58，生根率高，生根率可达75.00-97.20％，繁殖周期短，繁殖周期90-120天。繁殖出的组培苗健壮，根系发达，每株生根3-10条，平均根长0.92-1.26cm，其组培苗移栽成活率达到95％以上，移栽后长势强。

附图说明

图1：平铺白珠树的带芽茎段接入丛生芽诱导培养基。

图2：组培获得的平铺白珠树丛生芽。

图3：平铺白珠树的生根诱导培养。

图4：平铺白珠树组培获得的生根苗。

具体实施方式

以下实施例无特殊说明的为常规植物组培方法，各例中所用的试验材料均为市售。各实施例均设置三次重复，结果取平均值。

各实施例培养基的制备根据培养基配方按常规植物组织培养的培养基制备方法制备。

实施例1

(1)平铺白珠树种子的消毒处理

在无菌条件下，将当年生的平铺白珠树种子在质量分数为25％的H₂O₂溶液中浸泡20min，用无菌滤纸吸干种子表面水分，备用。

(2)无菌苗的获得

在无菌条件下，将经步骤(1)消毒处理的种子播种在种子萌发培养基上，培养35天，获得高度为2-3cm的无菌苗，培养条件为：温度25℃±2℃，光照12h·d^-1，光照度为4000lx；所述种子萌发培养基为：WPM+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

(3)丛生芽的获得

在无菌条件下，在步骤(2)获得的无菌苗上切取长度为1～2cm的带芽茎段接入丛生芽诱导培养基，培养35天，获得丛生芽，培养条件与步骤(2)所述的培养条件相同，所述的丛生芽诱导培养基为：WPM+ZT 1.0mg/L+IBA 0.1mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

(4)生根培养

将步骤(3)获得的丛生芽接入生根培养基，培养35天，得带根植株，培养条件与步骤(2)所述的培养条件相同，所述的生根培养基为：WPM+IBA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂6g/L+蔗糖30g/L，pH5.4。

实施例2和实施例3除表1所列措施不同外，其余措施均与实施例1相同，不再赘述。

表1实施例2-实施例3各步骤与实施例1的区别

实施例1-3的繁殖效果见表2。

表2实施例1-实施例3的繁殖效果

本发明方法单芽诱导出的丛生芽数量多，约3-8个,丛生芽诱导率高，诱导率为83.33-100％，芽苗生长健壮，单株可高达3-5cm，繁殖系数高，繁殖系数达4.12-5.58，生根率高，生根率可达75.00-97.20％，繁殖周期短，繁殖周期90-120天。繁殖出的组培苗健壮，根系发达，每株生根3-10条，平均根长0.92-1.26cm，其组培苗移栽成活率达到95％以上，移栽后长势强。