本发明涉及一种杉木种植
技术领域：
，具体涉及一种杉木茎尖组织培养繁殖方法。
背景技术：
：杉木是我国特有的速生商品材树种，生长快，材质好，在大丰杉木基地大量人工培育。木材纹理通直，结构均匀，不翘不裂，材质轻韧，强度适中，质量系数高。具香味,材中含有“杉脑”，能抗虫耐腐，加工容易。广泛用于建筑、家具、器具、造船等各方面。近年虽然小径材市场低迷，但中、大径材销路仍好，今后要培养中大径材杉木为主，目前，较为成熟的杉木快速繁殖方式较多，主要包括有性繁殖和无性繁殖两种，在林木生产中，有性繁殖是指通过种实培育生苗，无性繁殖则包括通过插条、插根、压条、埋条、根蘖、插叶、嫁接和组织培养方式培育营养繁殖苗，在杉木组织培养过程中，目前技术并不十分成熟，因此培养成功率较低。技术实现要素：本发明提供一种杉木茎尖组织培养繁殖方法。本发明技术方案如下：一种杉木茎尖组织培养繁殖方法，包括以下步骤：（1）选择杉木茎尖作为外植体，将茎尖浸渍于质量浓度为2-2.8%的碘化银水溶液中，在功率为130-140W的超声波下处理10-12秒；（2）将灭菌后的茎尖置于消毒后的湿度为85-90%的沙床上诱导形成愈伤组织，向沙床中均匀喷洒3-4%质量浓度的硫酸小檗碱溶液调节沙床湿度；（3）将形成愈伤组织的茎尖置于温度为25-28℃、并在光照强度为800-1000Lx的红光下诱导生芽，诱导生芽期间，每隔2小时，在茎尖表面雾喷一次3-4%质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子溶液；（4）将已生成从芽的茎尖基部浸渍于质量浓度为1%的二水合磷酸氢二钠溶液与质量浓度为2%的氯化锌溶液按3:1混合得到的生根诱导液中诱导生根，诱导生根期间将小分子团水与氧气混合缓慢通入生根诱导液中，保持生根诱导液以5-7cm/s的速率流动。本发明有益效果在于，本发明以杉木茎尖作为外植体诱导培养杉木小苗，诱导成本低，诱导方法简单，可大量成批诱导，能使茎尖快速形成带根带芽小苗；将外植体浸渍于碘化银水溶液中并超声波下处理，可快速充分灭除外茎尖表面及孔隙内的一切微生物，降低培养过程中细菌和真菌的污染率；3-4%质量浓度的硫酸小檗碱溶液能提高茎尖细胞分化活跃度，与沙床混合可促使茎尖愈伤组织快速形成，愈伤组织诱导率在99.98%以上，诱导形成的愈伤组织呈淡黄色且生长旺盛；3-4%质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子溶液能够促进茎尖合成生长素和细胞分裂素，促进茎尖腋芽生长，分阶段雾喷于茎尖表面可促使茎尖生成数量较多的不定芽，从芽诱导发芽率可达到99.5%以上，芽诱导期间结合红光光照处理可有效缩短不定芽诱导所需时间；由质量浓度为1%的二水合磷酸氢二钠溶液与质量浓度为2%的氯化锌溶液按3:1混合得到的生根诱导液作为营养源诱导不定根生成效果较好，不定根诱导率在99.2%以上，诱导期间，将小分子团水与氧气混合缓慢通入氨基葡萄糖盐酸盐水溶液中可加快不定根生成，并提高不定根生成数量，最终诱导不定根数量多，生长快，粗壮。具体实施方式以下结合实例，对本发明作进一步的说明。但本发明的保护范围不应局限于此。实施例1、一种杉木茎尖组织培养繁殖方法，包括以下步骤：（1）选择杉木茎尖作为外植体，将茎尖浸渍于质量浓度为2%的碘化银水溶液中，在功率为130W的超声波下处理10秒；（2）将灭菌后的茎尖置于消毒后的湿度为85%的沙床上诱导形成愈伤组织，向沙床中均匀喷洒3%质量浓度的硫酸小檗碱溶液调节沙床湿度；（3）将形成愈伤组织的茎尖置于温度为25℃、并在光照强度为800Lx的红光下诱导生芽，诱导生芽期间，每隔2小时，在茎尖表面雾喷一次3%质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子溶液；（4）将已生成从芽的茎尖基部浸渍于质量浓度为1%的二水合磷酸氢二钠溶液与质量浓度为2%的氯化锌溶液按3:1混合得到的生根诱导液中诱导生根，诱导生根期间将小分子团水与氧气混合缓慢通入生根诱导液中，保持生根诱导液以5cm/s的速率流动。实施例2、一种杉木茎尖组织培养繁殖方法，包括以下步骤：（1）选择杉木茎尖作为外植体，将茎尖浸渍于质量浓度为2.8%的碘化银水溶液中，在功率为140W的超声波下处理12秒；（2）将灭菌后的茎尖置于消毒后的湿度为90%的沙床上诱导形成愈伤组织，向沙床中均匀喷洒4%质量浓度的硫酸小檗碱溶液调节沙床湿度；（3）将形成愈伤组织的茎尖置于温度为28℃、并在光照强度为1000Lx的红光下诱导生芽，诱导生芽期间，每隔2小时，在茎尖表面雾喷一次4%质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子溶液；（4）将已生成从芽的茎尖基部浸渍于质量浓度为1%的二水合磷酸氢二钠溶液与质量浓度为2%的氯化锌溶液按3:1混合得到的生根诱导液中诱导生根，诱导生根期间将小分子团水与氧气混合缓慢通入生根诱导液中，保持生根诱导液以7cm/s的速率流动。以下结合具体诱导试验对本发明进一步说明，诱导试验分为实验组、对照组1、对照组2、对照组3四组，其中实验组按照实施例1方式进行繁殖；对照组1在实施例1的基础上将4%质量浓度的硫酸小檗碱溶液替换成水；对照组2在实施例1的基础上将4%质量浓度的碱性成纤维细胞生长因子溶液替换成水；对照组3在实施例1的基础上取消芽组织诱导期间将小分子团水与氧气混合缓慢通入氨基葡萄糖盐酸盐水溶液中，保持水池内的水慢慢流动；四组所用外植体均取自同一种植场内4年生杉木根茎尖，茎尖外观与健康状况差异极微，每组30个，各组诱导环境相同；其中，试验期间，除实验组按实施例1规定时间进行诱导外，对照组3组根据外植体实际生长情况进行诱导；试验期间，对各组诱导期间污染率、愈伤组织诱导率、愈伤组织诱导所需时间、从芽诱导发芽率，从芽诱导所需时间、不定根诱导率，不定根诱导所需时间进行统计，结果见下表1：组别污染率（%）愈伤组织诱导率（%）从芽诱导发芽率（%）不定根诱导率（%）不定根诱导所需时间实验组099.99699.8399.3523小时对照组1028.4328.3828.1238对照组2099.98322.1521.9637小时对照组3099.98599.899.3355小时由表1可知，外植体经实施例1方式灭菌后再进行诱导，可显著降低诱导污染率，用硫酸小檗碱溶液调节沙床湿度可显著提高愈伤组织诱导率，在茎尖表面雾喷碱性成纤维细胞生长因子溶液可显著提高从芽诱导发芽率，二水合磷酸氢二钠溶液与氯化锌溶液诱导不定根生成率较高，根组织诱导期间，将小分子团水与氧气混合缓慢通入氨基葡萄糖盐酸盐水溶液中，保持水池内的水慢慢流动，能分别缩短愈伤组织诱导所需时间、从芽诱导所需时间。当前第1页1 2 3