本发明属于植物繁育栽培领域，具体涉及一种黑枸杞的组培快繁方法。
背景技术：
黑果枸杞，茄科、枸杞属多棘刺灌木，分布于高山沙林、盐化沙地、河湖沿岸、干河床、荒漠河岸林中，为我国西部特有的沙漠药用植物品种。野生的黑果枸杞适应性很强，能忍耐38.5摄氏度高温，耐寒性亦很强，在-25.6摄氏度下无冻害，耐干旱，在荒漠地仍能生长。是喜光树种，全光照下发育健壮，在庇荫下生长细弱，花果极少，对土壤要求不严，耐盐碱，耐干旱。
目前黑枸杞虽然已经可以人工种植，但仍大多采用种子繁殖和扦插繁殖的常规方式种植，仍不能满足市场需求，组织培养是一种高效的无性繁殖方式，繁殖效率高且成本较低，是解决黑枸杞优良无性系快繁的有效手段。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术存在的不足或缺陷，提供一种黑枸杞的组培快繁方法。
为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
一种黑枸杞的组培快繁方法，包括以下步骤：
⑴获取无菌苗
取黑枸杞种子，在30℃水中浸泡6～10h，取出后于超净工作台上75％酒精处理30s，用质量浓度为10％的次氯酸钠溶液浸泡3～8min，用无菌水冲洗3～4次，滤纸吸干表面水分，将种子接入DKW+蔗糖15～25g/L+琼脂4～5g/L培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下培养，生长出无菌芽；
⑵诱导培养
将无菌芽苗接入DKW+0.5～1mg·L-1KT+0.1～0.3mg·L-1IBA+10～15g·L-1蔗糖+3～5g·L-1琼脂培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下诱导培养，生长出丛生芽；
⑶增殖培养
将丛生芽切成单株芽，接入DKW+0.7～1.2mg·L-16-BA+0.2～0.3mg·L-1IBA+10～15g·L-1蔗糖+琼脂3～5g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下增殖培养；
⑷生根培养
待单株芽生长至2～3cm时，转接至：DKW+0.2～0.3mg·L-1IBA+0.02～0.03mg·L-1NAA+10～15g·L-1蔗糖+琼脂4～5g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下生根培养；
⑸营养培护
生根培养1月后，置于培养室自然光下打开培养瓶瓶口练苗5～7天，然后小心取出幼苗，洗净根部培养基，多菌灵浸根，移入腐叶土∶田园土：蛭石：珍珠岩＝1：1：1：1的基质中，缓苗后用1000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，培养50～60天后移入苗圃进行养护管理。
本发明的有益技术效果：采用本发明制备的黑枸杞苗成活率为95％，繁殖周期短，苗木质量好，出苗率高；无需培育砧木与接穗，极大地减少占地面积，降低人力及管理成本。
具体实施方式
下面结合实施例进一步对本发明的技术方案作详细说明，不构成对本发明的任何范围性限制。
实施例1
取黑枸杞种子，在30℃水中浸泡6h，取出后于超净工作台上75％酒精处理30s，用质量浓度为10％的次氯酸钠溶液浸泡3min，用无菌水冲洗3次，滤纸吸干表面水分，将种子接入DKW+蔗糖15g/L+琼脂4g/L培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下培养，生长出无菌芽。将无菌芽苗接入DKW+0.5mg·L-1KT+0.1mg·L-1IBA+10g·L-1蔗糖+3g·L-1琼脂培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下诱导培养，生长出丛生芽。将丛生芽切成单株芽，接入DKW+0.7mg·L-16-BA+0.2mg·L-1IBA+10g·L-1蔗糖+琼脂3g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下增殖培养。待单株芽生长至2cm时，转接至：DKW+0.2mg·L-1IBA+0.02mg·L-1NAA+10～15g·L-1蔗糖+琼脂4g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下生根培养。生根培养1月后，置于培养室自然光下打开培养瓶瓶口练苗5天，然后小心取出幼苗，洗净根部培养基，多菌灵浸根，移入腐叶土∶田园土：蛭石：珍珠岩＝1：1：1：1的基质中，缓苗后用1000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，培养50天后移入苗圃进行养护管理，移栽成活率为98％。
实施例2
取黑枸杞种子，在30℃水中浸泡10h，取出后于超净工作台上75％酒精处理30s，用质量浓度为10％的次氯酸钠溶液浸泡8min，用无菌水冲洗4次，滤纸吸干表面水分，将种子接入DKW+蔗糖25g/L+琼脂5g/L培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下培养，生长出无菌芽。将无菌芽苗接入DKW+1mg·L-1KT+0.3mg·L-1IBA+15g·L-1蔗糖+5g·L-1琼脂培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下诱导培养，生长出丛生芽。将丛生芽切成单株芽，接入DKW+1.2mg·L-16-BA+0.3mg·L-1IBA+15g·L-1蔗糖+琼脂5g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下增殖培养。待单株芽生长至3cm时，转接至：DKW+0.3mg·L-1IBA+0.03mg·L-1NAA+15g·L-1蔗糖+琼脂5g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下生根培养。生根培养1月后，置于培养室自然光下打开培养瓶瓶口练苗7天，然后小心取出幼苗，洗净根部培养基，多菌灵浸根，移入腐叶土∶田园土：蛭石：珍珠岩＝1：1：1：1的基质中，缓苗后用1000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，培养60天后移入苗圃进行养护管理，移栽成活率为95％。
实施例3
取黑枸杞种子，在30℃水中浸泡8h，取出后于超净工作台上75％酒精处理30s，用质量浓度为10％的次氯酸钠溶液浸泡5min，用无菌水冲洗4次，滤纸吸干表面水分，将种子接入DKW+蔗糖20g/L+琼脂4.5g/L培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下培养，生长出无菌芽。将无菌芽苗接入DKW+75mg·L-1KT+0.2mg·L-1IBA+12.5g·L-1蔗糖+4g·L-1琼脂培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下诱导培养，生长出丛生芽。将丛生芽切成单株芽，接入DKW+1mg·L-16-BA+0.25mg·L-1IBA+12.5g·L-1蔗糖+琼脂4g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下增殖培养。待单株芽生长至3cm时，转接至：DKW+0.25mg·L-1IBA+0.025mg·L-1NAA+12.5g·L-1蔗糖+琼脂4.5g·L-1培养基中，在pH5.8、光照2000lx、温度25℃的条件下生根培养。生根培养1月后，置于培养室自然光下打开培养瓶瓶口练苗5～7天，然后小心取出幼苗，洗净根部培养基，多菌灵浸根，移入腐叶土∶田园土：蛭石：珍珠岩＝1：1：1：1的基质中，缓苗后用1000倍磷酸二氢钾叶面喷施，每隔10天喷一次，培养50～60天后移入苗圃进行养护管理，移栽成活率为96％。