处理植物病原体的组合物和方法与流程
相关申请的交叉引用
无。
本发明大体上涉及植物处理领域，更具体地说，涉及用于处理植物病原体的组合物和方法。
背景技术：
在不限制本发明范围的情况下，结合对植物进行的处理以对抗病原体来描述本发明的背景技术。
近年来，处理植物病原体的研发工作聚焦于两种主要的方法：化学方法和遗传学方法。这些年来，越来越多的强效化学剂被开发和改进以对植物进行预防和治疗。这些化学剂被设计或分离以影响目标生物体的生长、成熟或分裂中关键的繁殖步骤。然而，往往，所述化学剂对其它植物和动物也有作用。
保护水果的方法的实例可见于授予戛纳逊等人的“水果用液体涂膜剂”的美国专利号4,946,694中。这些发明人教导了一种用于粘性水果的改良涂膜剂以及一种用于制备这种涂膜的水果的方法。更具体地说，该发明的涂膜剂包含植物蜡、植物油、润湿剂以及蛋白质。据记载，所述方法包括以下步骤：(a)用包括润湿剂和含植物蜡的植物油悬浮液的组合物对水果进行涂膜；(b)向所述水果中添加含有蛋白质的组合物；(c)从所述水果中去除过量的混合物；以及(d)将所述水果干燥。然而，蛋白质的添加使得应用成本大大增加并且为附着提供了潜在的基质。
授予卡尔玛的发明名称为“水果和蔬菜用保鲜涂膜剂”的美国专利号4,039,470中教导了另一种化学涂膜剂。发明人用苯并咪唑的酸溶液的细雾化喷雾对水果进行涂膜，这种溶液在即将施用前与蜡或树脂溶液混合之前必须保存在单独的耐腐蚀腔室中。然而，与这一专利的教导不同，本发明不必放在耐腐蚀腔室中。
授予波洛维纳的发明名称为“用于保护植物、蔬菜以及水果免遭干旱的聚合物膜涂膜法”的美国专利号4,783,342中教导了另一种涂膜剂，这一美国专利涉及一种在干旱时期使植物保鲜的方法，这种方法是通过向植物表面施用控制水分流失的固态透水膜来实现的。这种膜还可以用于使蔬菜和水果保鲜。所述透水膜还能有效地使切花保鲜。
最后，授予温斯罗的美国专利号5,922,774教导了一种用于防治植食性昆虫损伤植物的方法。简单地说，这一专利教导了使用化学合成的蒽醌，通过向植物的叶面和/或植物扎根的周围土壤施用多环醌或其前体的水性分散液，从植物表面驱除植食性昆虫并且阻止它们在植物表面上摄食。
尽管在这方面作出了许多努力，但是自然界总会找到一种方式来规避和选择那些不再对化学修饰或遗传修饰具有抗性的病原体。此外，这些方法对于那些季节性或每年更替的作物和植物来说是最有用的。然而，在更替前存活许多年的树木、植物以及作物不能受益于遗传操作。此外，许多树木、植物以及作物仍未能容易地被操作。这些植物仍需要保护和处理以防止病原体而对局部环境、植物以及动物区系不会造成影响。
技术实现要素：
在一个实施例中，本发明包括一种用于处理影响植物的一种或一种以上病原体的方法，所述方法包括：鉴定需要植物处理的植物或种子；获得全叶芦荟提取物并且添加足量芦荟素以使所述植物上的所述一种或一种以上病原体停止生长、减少所述植物上所述一种或多种病原体的传播、或杀灭所述植物上的所述一种或多种病原体，或者因对种子进行的处理而减少受感染的植物的量，其中对所述芦荟叶进行加工以除去固体和保留芦荟凝胶的凝胶；以及至少一个以下步骤：将所述全叶芦荟提取物稀释以及将所述全叶芦荟提取物喷洒在所述植物或种子上；其中所述芦荟凝胶和芦荟素实现以下各项中的至少一项：使所述植物上的所述一种或一种以上病原体停止生长、减少所述植物上所述一种或一种以上病原体的传播、或杀灭所述植物上的所述一种或一种以上病原体，或者因对种子进行的处理而减少受感染的植物的量。在一个方面，将芦荟加工成液体、凝胶、干燥所述芦荟、将所述芦荟研磨、将所述芦荟冷冻干燥、加热干燥、真空干燥、空气干燥、喷雾干燥、或其组合。
在另一个方面，所述植物包括草、谷物、水果或蔬菜。在另一个方面，将所述全叶芦荟提取物在用于所述植物或种子上之前在植物生长培养基或水中稀释到20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、或1％。在另一个方面，所述植物是橙子、葡萄柚、柠檬、酸橙、柑橘、无核小蜜橘(satsuma)、金橘、希蒙得木、苹果、可可、咖啡或其它开花植物。在另一个方面，所述组合物提高了叶绿度(spad)，并且显示出净光合作用(pn)的显著增长。在另一个方面，所述组合物用于处理褐斑病、草坪草病、幼苗的猝倒病、马铃薯、番茄、卷心菜的黑痣病、谷类秃斑病、甜菜根腐病、黄瓜果腐病、以及水稻纹枯病。在另一个方面，所述植物是谷类，并且用所述组合物针对包括立枯丝核菌(rhizoctoniasolani)在内的丝核菌属菌种(rhizoctoniasp.)对所述谷类植物进行处理，所述植物包括小麦、大麦、芥花、青豌豆、以及其种子。在另一个方面，在储存期间、在使用之前、或在播种时用所述组合物处理所述植物的种子。
在另一个方面，所述组合物用于对橙子、葡萄柚、柠檬、酸橙、柑橘、无核小蜜橘、金橘、希蒙得木、苹果、可可、咖啡或其它开花植物的种子进行预处理和涂膜。在另一个方面，所述方法还包括以下步骤：向所述全叶芦荟提取物中添加稳定剂、抗氧化剂、防水剂、uv吸收剂、抗微生物剂、或其组合中的至少一种。在另一个方面，将所述全叶芦荟提取物添加到植物生长培养基中或原位喷洒到所述植物上。在另一个方面，将所述全叶芦荟提取物以每10,000m28升、16升、24升、32升、48升、72升、80升、88升、96升、或120升添加到植物生长培养基中或喷洒到所述植物上。在另一个方面，所述芦荟凝胶的芦荟素含量为至少600ppm、800ppm、1,000ppm、2000ppm、10,000ppm、25,000ppm、50,000ppm、或甚至100,000ppm或更多。在另一个方面，在没有添加农药或杀虫剂的情况下实现植物生长或产量的提高。在另一个方面，所述芦荟凝胶和芦荟素不是杀虫，而是驱除昆虫。在另一个方面，所述植物包括草、谷物、水果或蔬菜。在另一个方面，将所述全叶芦荟提取物在使用之前在植物生长培养基或水中稀释到20％、16％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、或1％。在另一个方面，所述植物生长培养基选自土壤、营养物增强土壤、体外生长培养基、水培生长培养基、或琼脂生长培养基中的至少一种。在另一个方面，所述方法还包括使植物营养物的量减少75％、50％、或25％，而仍观测到植物生长或产量的提高。在另一个方面，所述方法还包括分离芦荟凝胶，所述芦荟凝胶包含2.0％重量/体积至7.5％重量/体积的固体、赤霉酸、以及芦荟木质素。
在一个实施例中，本发明包括一种用于处理影响植物的一种或一种以上病原体的组合物，所述组合物包含：分离的全叶芦荟提取物，其中芦荟叶经过加工以除去固体和保留芦荟凝胶的凝胶并且还可以维持或包括额外的芦荟素；以及至少一个以下步骤：将所述全叶芦荟提取物稀释以及将所述全叶芦荟提取物喷洒在所述植物上；其中所述芦荟凝胶和芦荟素实现以下各项中的至少一项：使所述一种或一种以上病原体停止生长、减少所述一种或一种以上病原体的传播、或杀灭所述一种或一种以上病原体。在另一个方面，所述芦荟凝胶是浓缩的、冻干的、液体、或凝胶。在另一个方面，所述组合物还包含稳定剂、抗氧化剂、防水剂、uv吸收剂、抗微生物剂、或其组合中的至少一种。在另一个方面，所述芦荟凝胶是经过干燥的、经过研磨的、完整的或浓缩的。在另一个方面，所述组合物是在没有添加另外的杀虫剂或农药的情况下驱除昆虫或害虫中的至少一种。
在另一个方面，所述植物是橙子、葡萄柚、苹果、可可、咖啡或其它开花植物。在另一个方面，所述组合物提高了叶绿度(spad)，并且显示出净光合作用(pn)的显著增长。在另一个方面，所述组合物用于处理褐斑病、草坪草病、幼苗的猝倒病、马铃薯、番茄、卷心菜的黑痣病、谷类秃斑病、甜菜根腐病、黄瓜果腐病、以及水稻纹枯病。在另一个方面，所述植物是谷类，并且用所述组合物针对包括立枯丝核菌在内的丝核菌属菌种对所述谷类植物进行处理，所述植物包括小麦、大麦、芥花、青豌豆、以及其种子。在另一个方面，在储存期间、在使用之前、或在播种时用所述组合物处理所述植物的种子。在另一个方面，所述组合物用于对橙子、葡萄柚、柠檬、酸橙、柑橘、无核小蜜橘、金橘、希蒙得木、苹果、可可、咖啡或其它开花植物的种子进行预处理和涂膜。在另一个方面，所述组合物还被限定为包含芦荟凝胶，所述芦荟凝胶包含2.0％重量/体积至7.5％重量/体积的固体、赤霉酸、以及芦荟木质素。
附图说明
为了更完全了解本发明的特征和优势，现在连同附图一起参考具体实施方式，并且其中：
图1示出了coatsagrialoegroaloe浓度对立枯丝核菌的菌株tx-rs1和tx-rs12的菌丝体生长的影响。标记的轮廓是为了便于将菌落可视化。
图2a和2b示出了coatsagrialoegroaloe浓度对立枯丝核菌的菌株tx-rs1(图2a)和tx-rs12(图2b)的菌丝体生长的影响。
图3a和3b示出了coatsagrialoegroaloe浓度对从立枯丝核菌的菌株tx-rs1和tx-rs12的萌发的菌核开始的菌丝体生长的影响。标记的轮廓是为了便于将菌落可视化。
图4a和4b示出了coatsagrialoegroaloe浓度对从立枯丝核菌的菌株tx-rs1(图4a)和tx-rs12(图4b)的萌发的菌核开始的菌丝体生长的影响。
具体实施方式
虽然下文详细地论述了本发明的各种实施例的实施和使用，但是应当了解的是，本发明提供了许多适用的可在多种多样具体情况下实施的发明构思。本文所论述的具体实施例只是说明了实施和使用本发明的具体方式而不限制本发明的范围。
为了有助于理解本发明，下文对许多术语进行了定义。本文所定义的术语具有如本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义。诸如“一(a/an)”和“所述”的术语并不意图仅指单个实体，而是包括了用于说明的具体实例的一般类别。本文的术语用于描述本发明的具体实施例，而不是用于限制本发明，除了如权利要求书中所概述的之外。
芦荟是芦荟属的一种热带或亚热带植物，具有矛状叶片，所述叶片含有粘性但基本透明的凝胶，所述凝胶因布满毛发状结缔组织纤维而具有结构刚性。芦荟的透明凝胶不同于存在于植物叶片基部周围并且邻近叶片的外皮的浓稠、粘液样的黄色浆汁。这种浆汁被称为芦荟素，多年来一直被用作许多通便药和泻药中的成分。芦荟的芦荟素组分一般包括多种蒽醌。与本发明一起使用的蒽醌可以包括来自芦荟、番泻叶、大黄、以及药鼠李(cascarabuckthorn)、真菌、地衣、以及昆虫的蒽醌。
coatsagrialoe应用的优势。在广泛的实验室研究中，芦荟已显示出杀灭所有已测试的细菌、病毒、真菌、酵母以及霉菌。重要的是，在将水果、谷物、草、或蔬菜浸泡在groaloe溶液(groaloe是水溶性的)中之后，groaloe可以从水果、谷物、草、或蔬菜上冲洗掉而没有副作用或毒性。本发明具有多种用途，包括：(1)增加水分和营养物的吸收；(2)驱除昆虫；(3)实验室所测试的杀灭细菌、霉菌、酵母以及真菌的能力；(4)增加光合作用；(5)提高植物产量；(6)在洗涤植物、水果、草或蔬菜后没有已知的毒性；和/或(7)不会危害环境。
已知芦荟叶片的透明凝胶的治疗质量在很大程度上取决于凝胶的新鲜度。举例来说，通过涂敷从刚被切下的叶片取得的透明凝胶，可使水母螫伤的疼痛停止且不复发，但是如果凝胶已经暴露于空气和光约一个半小时，那么这些功效如果没有丧失的话也是大幅减弱的。然而，在一些情况下，已经发现相对不新鲜的不稳定的凝胶具有有效性，并且显然，新鲜凝胶用于不同的医药目的的不同功效反映了以下事实：凝胶是在不同温度下在暴露于空气和光后的自然稳定性因批次而异的物质的复杂混合物。
用于制备冷法稳定化的芦荟凝胶(指的是groaloe)的原料是从完全成熟的芦荟植物的叶片中获得的。举例来说，使用四年生至五年生的植物以确保完全成熟而获得更高质量的含有更大量的凝胶的叶片。将植物种植在受控的条件下以使得叶片的大小和结构更加均一，从而使得能够精确测量和选择待被用于纯化过程的材料的量。
芦荟叶片从植物上切下后尽快进行加工。立即加工芦荟叶片尽可能阻止凝胶材料在切下后即开始的因天然酶促反应所致的降解分解以及因存在氧气所致的凝胶内细菌的生。在切下后，将芦荟叶片在水或水和洗涤剂的混合物中洗涤。然后将叶片用合适的杀细菌剂和杀真菌剂洗涤。举例来说，可以将叶片在水和氯的溶液中浸泡约5分钟至10分钟，用无菌水冲洗，并且干燥以限制叶片上的任何绒毛。
通过首先将叶片切片和研磨，从叶片中分离出芦荟凝胶。从外皮取出凝胶的最常见的方法是手动切片法，尽管也存在半自动化的和自动化的方法。可以使用芦荟领域已知的任何研磨机。然后对透明的芦荟凝胶进行研磨以形成包括芦荟素的凝胶。常常，所述凝胶将包括固相或网脉(reticle)，它被称为叶肉。已经发现芦荟领域已知的任何精加工机都可以用于从叶肉中分离纯的凝胶。
简单地说，将经过研磨的叶片混合物供给到精加工腔体中，所述精加工腔体是由具有特别设计的螺纹的螺旋形物形成的空间并且在内部容纳多个360度圆筒筛，所述圆筒筛具有直径为约四分之一英寸的开口，以去除大的绿色叶肉部分，并且以具有直径为约0.5微米的开口的圆筒筛结束。在螺旋形物旋转时，由于液相向筛外部的区域迁移，因此经过研磨的叶片混合物的更多的液相与固相分离。一旦穿过筛，所述液相就流入例如全封闭的不锈钢盘中。此时，芦荟凝胶提取物在外观上一般是透明黄色的。黄色是因为在芦荟混合物中存在芦荟素。一旦与液相分离，经过研磨的叶片混合物的固相就被舍弃。这种芦荟凝胶在本文被称作groaloe。当将groaloe用芦荟素增强时，它在本文被称作coatsagrialoe。coatsagrialoe被增强以提高蒽醌活性，从而提高对植物的有益作用，包括但不限于驱除昆虫而不是用对环境和人类有害的毒物杀灭它们。coatsagrialoe还通过具有增强的抗细菌和/或杀真菌特性而增强了植物的生理学方面。coatsagrialoe还可以用额外的天然的植物生长激素赤霉酸来增强。芦荟富含赤霉酸，这对获得最佳的植物生长是必需的。芦荟还含有木质素。芦荟木质素是芦荟中存在的另一种化合物。coatsagrialoe方法有助于保持芦荟木质素，所述芦荟木质素具有渗透能力并且充当coatsagrialoe中赤霉酸和蒽醌的载体。芦荟木质素有助于植物从土壤中非常快速并且高效地吸收更多的营养物。最后，已经发现本发明的经过芦荟素增强的芦荟提取物在以1％体积/体积至20％体积/体积(在某些情况下是2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、12％、15％、16％、18％、或20％)、或如果coatsagrialoe已经被干燥的话，以1％重量/体积至20％重量/体积(在某些情况下是2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、12％、15％、16％、18％、或20％)向植物的叶片中喷洒时增强了植物进行光合作用的能力。
此外，经过芦荟素增强的芦荟凝胶可以是有机种植的产品，它能安全用于不能使用化学杀虫剂的领域，它对环境没有毒性，由于消除了由昆虫对植物所造成的损伤而使得植物的产量大幅提高，并且没有报道对可能接触被喷洒了经过芦荟素增强的芦荟凝胶的植物的动物具有毒性。
当使用整个叶片获得芦荟凝胶提取物时，它通常被称为全叶芦荟凝胶或全叶芦荟提取物。当仅获得凝胶(并且弃去叶片)时，则它被称为芦荟凝胶或芦荟薄片。如上文所述而分离的全叶或芦荟凝胶提取物可以不经进一步加工即用于本发明中，这是因为在分离的凝胶或提取物中存在芦荟素。然而，已经发现添加芦荟素(蒽醌)会增强组合物。为了易于运输，有可能将凝胶保持它的原始形式、将它转化成干的、经过研磨、冷冻干燥、加热干燥、真空干燥、空气干燥、喷雾干燥的芦荟凝胶(或其组合)。所述芦荟提取物还可以包括稳定剂、抗氧化剂、防水剂、uv吸收剂、抗微生物剂、或其组合中的一种或一种以上。通常，可以将芦荟凝胶或提取物以每10,000m28升、16升、24升、32升、48升、72升、80升、88升、96升、或120升用于植物生长培养基中或喷洒在植物上。举例来说，使用成熟植物以获得更高质量的含有更大量凝胶的叶片。
必要时，从芦荟叶片中去除细菌、真菌以及其它生物体可以通过使用方法的组合以确保所有细菌都被去除来实现。这可以包括使用诸如葡萄糖氧化酶的化合物、煮沸、紫外光以及使用去除细菌的过滤器。在一些实施例中，芦荟凝胶还可以包括添加剂或防腐剂，例如可以添加足量的苯甲酸钠以使得最终混合物中含0.1％的苯甲酸钠溶液。添加剂的另一个实例可以是0.1％的葡萄糖氧化酶/过氧化氢酶溶液。在添加添加剂之后，可以使用混合器或共混器并入到凝胶中并且将组分充分混合约10分钟。然后将凝胶静置约1小时。需要时，可以将足够的柠檬酸或其它酸添加到凝胶中以调节ph值。
在以这种方式处理后，如果需要的话，可以通过用液氮冻干将芦荟组合物浓缩到预定的浓缩体积。然后可以将它转移到棕色瓶中并且保持在阴凉处以备将来使用。或作为替代方案，可以将它在没有进行这样的浓缩的情况下储存在塑料衬里的桶中。
阐述以下实施例是出于说明本发明的一个实施例的目的，而不应解释成对本发明的限制或以任何限制性方式加以解释。
由真菌立枯丝核菌ag1-ia所引起的纹枯病是美国的水稻的最重要的疾病，并且是其它生产水稻的国家中最重要的疾病之一。所述疾病每年造成谷物产量和质量的显著损失。纹枯病可以导致多达50％的产量损失。可商购获得的水稻栽培品种中没有一种具有可接受的水平的抗纹枯病性。种植水稻的农民严重依赖杀真菌剂来防治这种疾病。杀真菌剂的过度使用已经造成抗杀真菌剂性并且增加了生产成本。农民需要替代性的并且可持续的策略来防治纹枯病。这一研究的目的在于评价coatsagrialoe防治立枯丝核菌的功效以努力开发处理水稻的纹枯病以及提高水稻谷物产量的新型生物防治方法。
在实验室中进行实验以评价coatsagrialoe对立枯丝核菌的菌丝体生长以及对菌核的萌发和从萌发的菌核开始的菌丝体生长的作用。受感染的残余物中的菌核和菌丝体是在疾病周期开始时诱使疾病发生的初级接种体。匍行菌丝(菌丝体)是这种真菌在种植季节期间感染和传播疾病的唯一方式。控制菌丝体生长和菌核萌发是有效处理纹枯病的关键。
已发现coatsagrialoe的叶面喷洒能显著防治叶窄褐斑病。coatsagrialoe对病原体孢子萌发的抑制是压制coatsagrialoe诱导疾病的机理之一。将来需要更多的研究来验证这一研究的结果。非常令人感兴趣的是，进行田间实验和实验室实验以确定coatsagrialoe是否还可以防治由真菌立枯丝核菌所引起的纹枯病，这是美国和全世界最重要的疾病。经证实的coatsagrialoe防治纹枯病的功效将显著增加这一产品的国内和国际市场。
coatsagrialoe对立枯丝核菌的菌丝体生长的作用。
实验中使用立枯丝核菌的两种菌株，tx-rs1和tx-rs12。这两种病原体菌株都是从德克萨斯州的商业稻田中表现出纹枯病症状的水稻植物采集的。每一种菌株在使用前都在室温下在马铃薯右旋糖琼脂(pda)平板上培养2天。简单地说，pda可以来自于马铃薯浸液(将200克的经过切片的(经过洗涤，但是未剥皮的)马铃薯在约1升蒸馏水中煮沸30分钟，然后将液体培养基经由干酪包布滗析或滤过)。添加蒸馏水以使悬浮液的总体积达到1升，添加20克(0.71盎司)的右旋糖和20克(0.71盎司)的琼脂粉末，通过高压消毒将培养基灭菌，并且在无菌处理条件下制备平板。将呈粉末形式的coatsagrialoe在无菌蒸馏水中稀释，并且添加到融化的pda培养基中以达到4％(v/v)、8％(v/v)以及16％(v/v)的浓度。使用未经coatsagrialoe改良的pda作为对照(0％，v/v)。用软木钻孔机从pda上活跃生长的真菌菌落的边缘上切下菌丝体栓(直径0.65cm)，并且将这些栓中的一个放置在每一个pda平板(直径10cm)的中央。将平板在室温下孵育。在孵育24小时之后，测量每一个栓的菌丝体生长的直径。每一种处理进行三次重复实验(三个重复平板)。每一个测试进行两次。
以4％、8％以及16％的浓度施用的coatsagrialoe显著抑制了所评价的立枯丝核菌的这两种分离株的菌丝体的生长(图1和表1)。菌丝体生长抑制程度随coatsagrialoe浓度的增加而呈线性增加(图2a和2a)。当浓度增加到16％时，菌丝体生长抑制功效超过55％。
表1：不同浓度的coatsagrialoe对立枯丝核菌的两种菌株的菌丝体生长的作用。
*平均值是三个重复平板的平均值。一列内带有相同字母的平均值根据f测验保护最小显著差数法(fisher'sprotectedlsdtest)没有显著差异(p＝0.05)。
coatsagrialoe对立枯丝核菌的菌核的萌发和从立枯丝核菌的萌发的菌核开始的菌丝体生长的作用。
在此研究中也使用立枯丝核菌的两种菌株，tx-rs1和tx-rs12。每一种菌株在室温下在暗处在马铃薯右旋糖琼脂(pda)平板上培养四周以产生菌核。选择大小和颜色均一的菌核用于实验。将呈粉末配方形式的coatsagrialoe在无菌蒸馏水中稀释并且添加到融化的pda培养基中以达到4％(v/v)、8％(v/v)以及16％(v/v)的浓度。使用未经coatsagrialoe改良的pda作为对照(0％，v/v)。将五个菌核相距均匀地放在每一个pda平板(直径为10cm)上(图3a和3b)。在室温下孵育24小时之后，计数每一个平板上萌发的菌核的数目并且换算成菌核的萌发百分比。还测量了每一个菌落的从萌发的菌核开始的菌丝体生长的直径。每一种处理进行七次重复实验(七个重复平板)。此研究重复两次。
以所述浓度(4％、8％以及16％)中的任一个施用的coatsagrialoe在减少所评价的立枯丝核菌的任何一种分离株的菌核的萌发百分比方面是无效的(表2)。然而，所测试的所有浓度的coatsagrialoe均显著减少从萌发的菌核开始的菌丝体生长(图3a和3b、以及表3)。菌丝体生长抑制程度随coatsagrialoe浓度的增加而呈线性增加(图4a和4b)。当浓度增加到16％时，菌丝体生长抑制功效超过50％。
表2：不同浓度的coatsagrialoe对立枯丝核菌的两种菌株的菌核的萌发的作用。
*平均值是三个重复平板的平均值。一列内带有相同字母的平均值根据f测验保护最小显著差数法没有显著差异(p＝0.05)。
表3：不同浓度的coatsagrialoe对从立枯丝核菌的两种菌株的萌发的菌核开始的菌丝体生长的作用。
*平均值是三个重复平板的平均值。一列内带有相同字母的平均值根据f测验保护最小显著差数法没有显著差异(p＝0.05)。
这些研究的结果证实了coatsagrialoe组合物抑制纹枯病病原体的菌丝体生长的能力。coatsagrialoe组合物还显示出减少从萌发的菌核开始的菌丝体生长的能力。体外结果表明了coatsagrialoe在实际的田间条件下在原发和传播感染阶段防治纹枯病病原体的有效性。
处理可可和咖啡的枯萎病获得了相似的结果。简单地说，鉴定和分离感染了维管条纹梢枯病(vascular-streakdieback，vsd)的可可植物。这种疾病是由被称为可可瘤肿担子菌(oncobasidiumtheobroma)的真菌所引起的，造成成熟的种植园中树木的重大损失。所述疾病已经在整个东南亚蔓延，从而导致印度尼西亚、马来西亚以及巴布亚新几内亚的大型商业种植园的重大损失。然后对受感染的可可植物用经过芦荟素增强的芦荟凝胶(coatsagrialoe)的不同稀释液进行单次处理。已发现低至6％的浓度的coatsagrialoe显示显著减少植物枯萎病，在使用10％的coatsagrialoe溶液的情况下在18天之后植物病原体完全消除。
简单地说，鉴定和分离感染了咖啡叶锈病(clr)的咖啡植物。咖啡叶锈病(clr)是由真菌咖啡驼孢锈菌(hemileiavastatrix)所引起的，影响了全世界。然后对受感染的咖啡植物用经过芦荟素增强的芦荟凝胶(coatsagrialoe)的不同稀释液进行单次处理。发现低至6％的浓度的coatsagrialoe显示显著减少植物枯萎病，在使用10％的coatsagrialoe溶液18天后，植物病原体完全消除。
甜橙疮痂病(sos)是一种由真菌澳洲痂囊腔菌(
来自经过10％或12％的agrialoe处理2分钟或3分钟的葡萄柚水果的澳洲痂囊腔菌的康复率。由于这些实验没有重复，因此所获得的数据应当被认为是初步的。然而，agrialoe似乎具有一些对抗澳洲痂囊腔菌的抗真菌特性。将来用agrialoe进行的研究应当包括由柑橘有机包装厂所使用的其它产品以用于实现比较的目的。
表4：来自经过10％或12％的agrialoe处理2分钟或3分钟的葡萄柚水果的澳洲痂囊腔菌的康复率。
z带有相同字母的值在p＝0.05时没有显著差异。
coatsagrialoe被证实能渗入树中并且在树的层面上杀灭真菌，并且也可以在例如加工设施或包装设施处在水果到达时使用。迄今为止，本发明的经过芦荟素增强的芦荟凝胶能够防治或破坏它已经被测试所针对的每一种真菌、细菌以及病毒病原体。
进一步发现本发明对植物无有害作用，对植物病原体具有显著作用，并且还显示出净光合作用显著提高。施用的时间的适合性，即在低日照条件(阴天、傍晚以及夜间)施用的适合性显示出coatsagrialoe具有其它益处，如驱除昆虫的能力，而这些可以在不损害植物的生理状态的情况下实现。coatsagrialoe组合物和处理方法对与光合能力相关的生理参数具有积极益处，即叶绿度(spad)明显提高，这与净光合作用(pn)的显著增长有关。coatsagrialoe的叶面施用有效减少叶窄褐斑病，叶窄褐斑病是影响德克萨斯州的水稻产量的主要疾病之一。
综上所述，coatsagrialoe处理对水稻植物生理状态无有害作用，这表明了施用的时间的适合性，并且进一步表明了如果coatsagrialoe具有其它益处，如驱虫能力，那么这些可以在不损害植物的生理状态的情况下实现。此外，数据显示对与光合能力相关的生理参数有积极益处，即叶绿度的提高，这潜在地尽可能将益处延续到多个其它光合参数。
将种子预浸泡。已发现通过将种子在agri-aloe的稀释过的溶液中预浸泡特定的时间，他们不仅能够给予种子保护屏障，而且还能够观察到产量增加10％。他们还在感染了叶窄褐斑病(nlbs)的水稻稻谷上测试agri-aloe组合物。nlbs是在全世界可见的一种毁灭性作物疾病，但是在美国更显著。agri-aloe组合物被证实有效防治这种疾病。
agri-aloe组合物显示出打击nlbs的显著结果，被用于使用agri-aloe作为纹枯病的处理来进行测试。纹枯病是全球头号疾病，它影响了全世界水稻产量的多达50％。纹枯病(立枯丝核菌)是一种真菌。进行了三个测试，首先是基本田间测试，随后是深入的体外测试，继而是更广泛的田间测试。已发现agri-aloe组合物有效抑制这种真菌的孢子萌发。如先前所述，在全世界水稻产量的多达50％因这种真菌而损失，目前尚无对这种疾病的有效防治。
此外，已经发现根据日照量、湿度、以及位置，在使用以下方法和混合比时，所述组合物更有效。
对于公斤装的coatsagrialoe：将1公斤与82.560加仑的水混合以得到10％的溶液。这是足以将1公顷喷洒0.891次的成品。将1公斤的coatsagrialoe与165.125加仑的水混合以得到8％的溶液。这是足以将1公顷喷洒1.782次的成品。将1公斤与240.750加仑的水混合以得到6％的溶液。这是足以将1公顷喷洒2.599次的成品。将1公斤与330.250加仑的水混合以得到4％的溶液。这是足以将1公顷喷洒3.565次的成品。一公顷相当于2.471英亩。
对于100克装的coatsagrialoe：将100克装与8.25加仑的水混合以得到10％的成品溶液。将100克装与16.50加仑的水混合以得到8％的成品溶液。将100克装与24.75加仑的水混合以得到6％的成品溶液。将100克装与33.25加仑的水混合以得到4％的成品溶液。
一般来说，coatsagrialoe应当以不高于8％稀释液施用以获得最好的一般结果。不要向嫩的幼苗施用coatsagrialoe。如果叶子太幼嫩，那么可能造成严重的作物损伤。不要在阳光直射下施用coatsagrialoe；它只应当在黄昏时或在日落之后被施用。始终在使用前将coatsagrialoe充分振荡。将coatsagrialoe储存在40℉至90℉(4.5℃至32.2℃)干燥通风处。在混合groaloe粉末时，始终戴有防护橡胶手套和防护面罩。不建议在热带气候下施用超过8％百分比的groaloe。
这些实例表明了本发明具有多种用途，包括：(1)增加水分和营养物的吸收；(2)驱除昆虫；(3)实验室测试的杀灭细菌、霉菌、酵母以及真菌的能力；(4)增加光合作用；(5)提高植物产量；(6)在洗涤植物、水果、草或蔬菜后没有已知的毒性；和/或(7)不会危害环境。
设想的是，本说明书中所论述的任何实施例可以关于本发明的任何方法、试剂盒、试剂、或组合物来实施，反之亦然。此外，本发明的组合物可以用于实现本发明的方法。
应当了解的是，本文所描述的具体实施例是以说明的方式展示的并且不作为本发明的限制。本发明的主要特征可以用于各种实施例中而不脱离本发明的范围。本领域技术人员将认识到或能够仅使用常规的实验来确定本文所述的具体程序的许多等同方案。这些等同方案被认为落入本发明的范围内并且由权利要求书所涵盖。
本说明书中所提及的所有出版物和专利申请指示了本发明所属领域的技术人员的技术水平。所有出版物和专利申请均以引用的方式并入本文，其引用程度就如同具体地并且单独地表明每一篇单独的出版物或专利申请以引用的方式并入本文一般。
在权利要求书和/或说明书中结合术语“包含”使用时，词语“一(a/an)”的使用可以意指“一个(种)”，但是它还与“一个(种)或多个(种)”、“至少一个(种)”以及“一个(种)或多于一个(种)”的含义相一致。除非明确地表示仅指替代方案或替代方案相互排斥，否则在权利要求书中术语“或”的使用是用于意指“和/或”，尽管本公开支持仅指替代方案的定义以及“和/或”。在整个本申请中，术语“约”用于表示值包括被用于测定所述值的装置、方法固有的误差变异或研究受试者间存在的变异。
如本说明书和一项或多项权利要求中所用，词语“包含(comprising)”(以及包含的任何形式，如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”)、“具有(having)”(以及具有的任何形式，如“具有(have)”和“具有(has)”)、“包括(including)”(以及包括的任何形式，如“包括(includes)”和“包括(include)”)或“含有”(以及含有的任何形式，如“含有(contains)”和“含有(contain)”)是包括性的或开放性的，并且不排除另外的未陈述的要素或方法步骤。在本文所提供的组合物和方法中的任一种的实施例中，“包含”可以被替换成“基本上由……组成”或“由……组成”。如本文所用的短语“基本上由……组成”要求了指定的一个或一个以上完整事物或步骤以及对要求保护的发明的特征或功能没有实质影响的那些。如本文所用的术语“由……组成”仅用于表明所叙述的完整事物(例如特点、要素、特征、特性、方法/方法步骤或限制)或完整事物的组(例如一个或一个以上特点、一个或一个以上要素、一个或一个以上特征、一种或一种以上特性、方法/方法步骤或一个或一个以上限制)的存在。
如本文所用的术语“或其组合”指的是在所述术语前所列的项目的所有排列和组合。举例来说，“a、b、c、或其组合”意图包括以下各项中的至少一项：a、b、c、ab、ac、bc、或abc，并且如果顺序在特定背景下是重要的，那么还有ba、ca、cb、cba、bca、acb、bac、或cab。继续这个实例，明确地包括了含有一个或一个以上项目或条目的重复排列的组合，如bb、aaa、ab、bbc、aaabcccc、cbbaaa、cababb等。本领域技术人员将了解的是，通常，除非另外根据上下文是显而易见的，否则对任何组合中项目或条目的数目没有限制。
如本文所用的近似的词语，诸如但不限于“约”、“大致”或“基本上”指的是如下的条件，所述条件在被这样修饰时被理解成不一定是绝对的或理想的，但是将被认为是足够接近的以使得本领域的普通技术人员有理由将所述条件指定为存在的。说明可能变化的程度将取决于可以被制定而仍使得本领域的普通技术人员认为所修饰的特征仍具有未修饰的特征的所要求的特性和能力的变化有多大。一般来说，但是受制于前面的论述，本文中由诸如“约”的近似的词语修饰的数值可以与指定值相差至少±1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、10％、12％或15％。
此外，提供本文的部分标题以与37cfr1.77下的建议保持一致或另外提供组织线索。这些标题不应当限制或表征可能由本公开公布的任何权利要求中所阐述的一项或多项发明。确切地说并且举例来说，尽管标题指的是“技术领域”，但是这些权利要求不应当受该标题下描述所谓的技术领域的语言限制。此外，在“背景技术”部分中对技术的说明不应当被视为承认技术是本公开中任何一项或多项发明的现有技术。“发明内容”也不被认为是对所公布的权利要求书中所阐述的一项或多项发明的表征。此外，在本公开中以单数形式对“发明”的任何提及不应当被用于说明在本公开中仅存在具有新颖性的单个发明点。多项发明可以根据由本公开所公布的多个权利要求的限制来阐述，并且这些权利要求相应地限定了由此受到保护的一项或多项发明以及它们的等同方案。在所有情况下，这些权利要求的范围应当根据本公开基于它们自身的优点来考虑，但是不应当受本文所阐述的标题约束。
本文所公开和要求保护的所有组合物和/或方法可以根据本公开作出和执行而无需过多的实验。虽然已经关于优选的实施例对本发明的组合物和方法进行了描述，但对于本领域技术人员来说将显而易见的是，变化方案可以被应用到本文所述的组合物和/或方法以及本文所述的方法的步骤或步骤的顺序中而不脱离本发明的构思、精神以及范围。所有这些对于本领域技术人员来说显而易见的类似的替代方案和改动方案均被认为落入如由所附权利要求书所限定的本发明的精神、范围以及构思内。
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