枯草芽孢杆菌HMB19198在防治黄瓜白粉病上的应用的制作方法

文档序号:11881411阅读:来源:国知局

技术特征:

1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株HMB19198在防治黄瓜白粉病上的应用。

2.含有枯草芽孢杆菌HMB19198的微生物菌剂在防治黄瓜白粉病上的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述的微生物菌剂的活性成分为枯草芽孢杆菌HMB19198菌体。

4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于所述的微生物菌剂为液体制剂。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于所述的微生物菌剂的液体制剂,按照如下方法制备:

(1)将低温保存的HMB19198菌株在LB平板培养基上活化,挑取单菌落在LB斜面培养基上,在30~32℃培养16~24小时,得活化的菌株;

(2)用无菌的接种环刮取一接种环步骤(1)活化的菌株并接种到100mL LB液体培养基中,在28~34℃、摇床转速为170~210rpm条件下培养20~24小时,得种子液;

(3)按照体积比为0.5~3.0%的比例将步骤(2)的种子液接入到蔗糖豆饼粉培养基(pH值为5.8-6.2)中,在温度为28~34℃、摇床转速为170~210rpm条件下发酵培养36~54h,得发酵液;所述的蔗糖豆饼粉培养基的组成成分及其重量百分比为:蔗糖2.0~3.0%,豆饼粉1.6~2.4%,NaCl 0.1~0.2%,CaCO3 0.1~0.3%,KH2PO4 0.01~0.03%和MgSO4·7H2O 0.01~0.03%,其余为水;

(4)检测发酵液中菌体和芽孢数量,待发酵液中成熟芽孢占到芽孢和菌体总数的90%时停止发酵培养;所得即为HMB19198菌株的液体制剂。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于其步骤(2)或(3)中所述的温度为30~32℃;所述的摇床转速为210rpm;所述的培养时间为48h。

7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于所述的微生物菌剂中枯草芽孢杆菌HMB19198的活菌数大于1.0×109cfu/mL。

8.利用含有枯草芽孢杆菌HMB19198的微生物菌剂防治黄瓜白粉病的方法,其特征在于用水将权利要求5所得的微生物菌剂的液体制剂稀释至活菌体数为107cfu/mL,在黄瓜白粉病发病前在黄瓜叶面进行喷雾即可。

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