一种灵芝出菇方法与流程

本发明属于食用菌栽培领域，具体涉及一种灵芝出菇方法。

背景技术：

灵芝是我国传统的药用真菌，因其广泛的营养价值和药用价值而深受青睐。灵芝多糖和三萜是灵芝中主要的药理活性成分，在提高机体免疫功能、抗肿瘤、保肝和降血压等方面效果显著。如何有效提高灵芝产量、多糖和三萜含量成为灵芝研究的一个热点，具有广泛的应用前景。

传统袋料栽培灵芝均采取单孔开袋方式，灵芝子实体较大，市场上对灵芝子实体的应用以灵芝切片和精粉为主，产品品质透明度低，使得消费者对灵芝产品购买信心不足。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种灵芝出菇方法，灵芝朵型较小，未开始弹射孢子，可以整朵子实体出售，无需切片处理，既节约生产成本，又增强产品的透明度，且能有效提高其子实体中多糖、三萜等有效活性成分。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种灵芝出菇方法，操作步骤如下：

（1）菌袋培养：在超净台上将原种转接至37×22聚乙烯塑料袋中，23-28℃培养30-35天至菌丝长满菌袋；所述菌袋含以下重量份原料：茶梗20份，木屑61份，麸皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH为4-6，含水量为60-65%，121℃灭菌180min。

（2）开袋出菇：在菌盖上用皮筋扎一层直径为10-12cm圆形玻璃纸，距菌袋两端2.5-4.0cm，以“V”型等距在四周开6-8个直径为1.5-2.5cm十字孔，用绳子将菌袋吊起出菇，温度26-28℃，空气湿度85-90%。

（3）采收：当灵芝未完全成熟，即芝盖边缘白色或黄色生长圈剩0.3-0.5cm时采收，将新鲜灵芝放入烘箱55-60℃烘干，收集烘干灵芝，密封。

（4）灵芝三萜提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加85%乙醇50mL常温浸提2h，150W超声0.5h，反复提取两次，合并两次提取液后过滤，滤液60℃旋转蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法检测三萜含量。

（5）灵芝多糖提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加40mL蒸馏水90℃水浴4h，过滤。重复一次，收集两次滤液，加蒸馏水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的无水乙醇进行醇沉过夜。5 000r/min离心10min后弃去上清液，所得沉淀用2mL蒸馏水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上层清液用蒸馏水定容至50mL。多糖的检测采用苯酚硫酸法。

本发明的优点及有益之处：这种多孔出菇方式的灵芝子实体朵型较小，可以整朵子实体出售，无需切片处理，增强产品的透明度；在未完全成熟时采收，子实体未开始弹射孢子，既节约生产成本，又能有效提高其子实体中多糖、三萜等有效活性成分。通过这种出菇方式，灵芝多糖含量15.59mg/g，是对照组的1.62倍；三萜含量达9.95mg/g，比对照组提高39.6%。

附图说明

图1灵芝开袋方式简图。

图2 灵芝开袋示意图。

图3灵芝多糖三萜含量示意图，其中单孔表示普通开袋岀菇，多孔表示应用本方法岀菇。灵芝多糖含量15.59mg/g，是对照组的1.62倍；三萜含量达9.95mg/g，比对照组提高39.6%。

具体实施方式

为了充分公开本发明的灵芝出菇的方法，以下结合实例加以说明。

实施例1

一种灵芝出菇的方法。包括以下步骤：

（1）菌袋培养：在超净台上将原种转接至37×22聚乙烯塑料袋中，25℃培养35天至菌丝长满菌袋；所述菌袋配方为：茶梗20份，木屑61份，麸皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH为4，含水量为60%，121℃灭菌180min。

（2）开袋出菇：在菌盖上用皮筋扎一层直径为10cm圆形玻璃纸，距菌袋两端2.5cm，以“V”型等距在四周开6个直径为1.5cm十字孔，用绳子将菌袋吊起出菇，温度26℃，空气湿度85%。

（3）采收：当灵芝未完全成熟，即芝盖边缘白色或黄色生长圈剩0.3cm时采收，将新鲜灵芝放入烘箱55℃烘干，收集烘干灵芝，密封。

（4）灵芝三萜提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加85%乙醇50mL常温浸提2h，150W超声0.5h，反复提取两次，合并两次提取液后过滤，滤液60℃旋转蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法检测三萜含量。

（5）灵芝多糖提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加40mL蒸馏水90℃水浴4h，过滤。重复一次，收集两次滤液，加蒸馏水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的无水乙醇进行醇沉过夜。5 000r/min离心10min后弃去上清液，所得沉淀用2mL蒸馏水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上层清液用蒸馏水定容至50mL。多糖的检测采用苯酚硫酸法。

本方法测得的灵芝多糖含量15.59mg/g，是对照组的1.62倍；三萜含量达9.95mg/g，比对照组提高39.6%。

实施例2

一种灵芝的出菇方法。包括以下步骤：

（1）菌袋培养：在超净台上将原种转接至37×22聚乙烯塑料袋中，28℃培养30天至菌丝长满菌袋；所述菌袋配方为：茶梗20份，木屑61份，麸皮15份，玉米粉3份，石膏1份，pH为6，含水量为65%，121℃灭菌180min。

（2）开袋出菇：在菌盖上用皮筋扎一层直径为12cm圆形玻璃纸，距菌袋两端4.0cm，以“V”型等距在四周开8个直径为2.5cm十字孔，用绳子将菌袋吊起出菇，温度28℃，空气湿度90%。

（3）采收：当灵芝未完全成熟，即芝盖边缘白色或黄色生长圈剩0.5cm时采收，将新鲜灵芝放入烘箱60℃烘干，收集烘干灵芝，密封。

（4）灵芝三萜提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加85%乙醇50mL常温浸提2h，150W超声0.5h，反复提取两次，合并两次提取液后过滤，滤液60℃旋转蒸干，用甲醇溶解定容至50mL，并采用香草醛-冰醋酸法检测三萜含量。

（5）灵芝多糖提取与检测：取步骤（3）烘干的子实体研磨成粉末状。精确称取干燥灵芝子实体粉末2g，加40mL蒸馏水90℃水浴4h，过滤。重复一次，收集两次滤液，加蒸馏水定容至100mL。吸取10mL多糖溶液，加入三倍的无水乙醇进行醇沉过夜。5 000r/min离心10min后弃去上清液，所得沉淀用2mL蒸馏水溶解，最后用sevag法去除蛋白，吸取上层清液用蒸馏水定容至50mL。多糖的检测采用苯酚硫酸法。

本方法测得的灵芝多糖含量17.29mg/g，是对照组的2.1倍；三萜含量达9.97mg/g，比对照组提高40.6%。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。