一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法与流程

文档序号:11071031阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)配制培养基;分别配制原球茎培养基和母苗生根苗培养基,灭菌,备用;

(2)原球茎培养:取成熟的铁皮石斛种子,消毒后无菌播种至原球茎培养基中培养,得到原球茎;

(3)原球茎转接:取原球茎粒接种到母苗生根苗培养基中培养,长出母苗;

(4)生根壮苗:取母苗,剔净培养基和长根,得到独立的单株苗,接种到母苗生根苗培养基中培养,待单株苗长到5-8cm、且均匀分布有3-4条根时出瓶,得到可直接食用的铁皮石斛组培苗。

2.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(1)中,每升原球茎培养基包括如下组分:

只含大量元素的½MS培养液 100-150g/L

有机添加物 100-150g/L

琼脂粉 5-9g/L

蔗糖 25-35g/L

活性炭 0.5-1.5g/L;

其中,所述有机添加物是由山药、红薯和芋头以重量比0.8-1.2:0.4-0.6:0.4-0.6制得的提取物。

3.根据权利要求2所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(1)中,原球茎培养基的制备方法为:按配方量称取山药、红薯和芋头清洗干净,去皮切碎煮25-35min后,超声波振动20-30min使营养成分完全溶出,过滤,收集滤液,得到有机添加物;将滤液加入½ MS培养液中,再加入琼脂粉、活性炭和蔗糖,用l.0mol/LNaOH或0.lmol/LHC1调节pH至5.7-5.9,制得原球茎培养基。

4.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(1)中,每升母苗生根苗培养基包括如下组分:

只含大量元素的½MS培养液 100-150g/L

有机添加物 100-150g/L

琼脂粉 5-9g/L

蔗糖 25-35g/L

活性炭 0.5-1.5g/L;

其中,所述有机添加物是由山药、红薯和芋头以重量比0.4-0.6:0.8-1.2:0.8-1.2制得的提取物。

5.根据权利要求4所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(1)中,母苗生根苗培养基的制备方法为:按配方量称取山药、红薯和芋头清洗干净,去皮切碎煮25-35min后,超声波振动20-30min使营养成分完全溶出,过滤,收集滤液,得到有机添加物;将滤液加入½ MS培养液中,再加入琼脂粉、活性炭和蔗糖,用l.0mol/LNaOH或0.lmol/LHC1调节pH至5.7-5.9,制得母苗生根苗培养基。

6.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(1)中,灭菌温度为119-123℃,压力为0.08-0.12Mpa,时间为20-30min。

7.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(2)具体为:将成熟的铁皮石斛种子,采用酒精加次氯酸钠消毒后进行无菌播种,在原球茎培养基的组培瓶中培养2-3个月,种胚由黄绿色转变为绿色,并逐渐形成原球茎。

8.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(3)具体为:在无菌条件下,用小勺轻轻刮取150-200粒原球茎,均匀接种到灭菌过的母苗生根苗培养基中培养4-6个月,原球茎长出1-2cm株高的母苗。

9.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(4)具体为:在无菌条件下,用已经消毒过的镊子把母苗夹出培养瓶,用镊子和刀剔净培养基,长根切去,使其成为独立单株苗,按高度4cm以上、2-4cm和1-2cm分大、中、小三档,将单株苗由小到大的顺序接种至母苗生根苗培养基瓶中培养;当单株苗长到5-8cm,每一棵单株苗上都均匀分布有3-4条根时即可出瓶,得到可直接食用的铁皮石斛组培苗。

10.根据权利要求1所述的一种可直接食用的铁皮石斛组培苗的培养方法,其特征在于:所述步骤(2)-(4)中,培养的光照强度值范围2000-3000LX,每天照射11-13h,培养温度为25±1℃。

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