本发明属于农业和生物技术领域，具体涉及胶霉毒素类化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin在制备生物农药和作为农药中有效成分的应用。
背景技术：
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海洋中存在着许多自然条件特殊的环境，尤其是深海海洋环境，使生活于深海的海洋微生物处于独特的物理、化学和生态环境中，在永久黑暗、高水压、贫营养、剧变的温度梯度、高盐度和高浓度的有毒物质包围下，使它们形成了极为特殊的生物结构、代谢机制系统。由于这种极端的环境，使深海海洋真菌能产生结构新颖、活性独特的代谢产物，具有巨大的应用价值，可为生物农药的开发提供优异的种质资源。因此，深海微生物活性物质是研究开发海洋新农用抗生素的重要来源。
植物病害主要是由病原微生物引起，是威胁植物生存的重要因素，每年都给农林业生产带来巨大损失。如炭疽病是世界性的植物病害，对许多作物构成严重威胁，尤其在热带、亚热带地区，有多种炭疽菌可引起作物炭疽病，其中胶孢炭疽菌是炭疽菌属内最大的一个种，其分布广泛，危害寄主种类繁多，是一类重要的植物病原真菌；链格孢能引起包括玉米、小麦、烟草、马铃薯、番茄、苹果、梨等几十种农作物的病害，造成田间和产后损失；目前植物病害仍以有机合成的化学药剂防治为主，但大量化学农药的使用，不但对人类环境造成了严重危害，而且增加了病原真菌的抗药性。因此，生物防治逐渐成为病害防治研究中的主要领域，从微生物资源中寻找新的活性物质代替化学农药和使用天然抗菌化合物保护作物已成为当前研究的重点。
本发明所涉及的胶霉毒素类化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin，结构式如(Ⅰ)所示：
1为化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、2为化合物5a,6-didehydrogliotoxin。
本发明所涉及的化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin公开于文献Ry R.Forseth,Ellen M.Fox,DaWoon Chung,et al.Identification of Cryptic Products of the Gliotoxin Gene Cluster Using NMR-Based Comparative Metabolomics and a Model for Gliotoxin Biosynthesis[J].Journal of the American Chemical Society,2011,(5)25:9678-9681，可以按照该文献公开的方法制备；化合物5a,6-didehydrogliotoxin公开于文献Yi Sun,Kentaro Takada,Yasushi Takemoto,et al.Gliotoxin Analogues from a Marine-Derived Fungus,Penicillium sp.and Their Cytotoxic and Histone Methyltransferase Inhibitory Activities.Journal of Natural Products，2011(12)12:111-114，可以按照该文献公开的方法制备。
但到目前为止，国内外文献尚未有关于这两个化合物抗植物病原真菌的报道。
技术实现要素：
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本发明的第一个目的是提供化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin或5a,6-didehydrogliotoxin在制备生物农药中的应用。
本发明通过抗植物病原真菌胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、链格孢(Alte rnaria alternata)活性测试发现，在每片滤纸片中化合物为10μg时，化合物6-deoxy-5a,6-did ehydrogliotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢的抑制率分别为89.3％、90.6％，化合物5a,6-didehydrog liotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢的抑制率分别为94.6％、92.1％；选择800、400、200、100、50、25、12.5μg/mL 7个浓度下测化合物对胶孢炭疽菌、链格孢的EC50值，确定化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢的EC50值分别为91.4μg/mL、92.3μg/mL，化合物5a,6-didehydrogliotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢的EC50值分别为84.5μg/mL、88.9μg/mL。实验结果表明：这两个化合物对植物病原真菌具有显著的抑制效果。因此，化合物6-deoxy-5a,6-dide hydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin可用于制备生物农药。
所述的生物农药优选为抗植物病原真菌胶孢炭疽菌或链格孢的农药。
本发明的第二个目的是提供一种生物农药，其特征在于，包有化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin或5a,6-didehydrogliotoxin作为有效成分。
所述的生物农药优选为抗植物病原真菌胶孢炭疽菌或链格孢的农药。
本发明发现化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢都具有明显的抑制作用，表明化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin具有明显的抗植物病原真菌效果，可用于制备生物农药，具有重要的开发和应用前景。因此，本发明为研究与开发新的生物农药提供了候选药物，为开发利用海洋真菌来源的天然活性物质提供了科学依据。
具体实施方式：
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
实施例1：
采用滤纸片法测定化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin对胶孢炭疽菌、链格孢的抑制效果。
将化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin用DMSO溶解，并稀释至浓度为2mg/mL。
在含有PDA培养基的平皿中央分别接入直径为4mm供试的植物病原真菌菌饼，在菌饼四周均匀放置4片滤纸片并在滤纸片上滴加5μL提取液作样品组，以DMSO代替化合物提取液作空白对照。置28℃恒温箱培养3～5d，用十字测量法记录菌饼生长直径，按以下公式计算抑制率。
抑制率(％)＝(1-样品组纯生长量/对照组纯生长量)×100％
实验结果如表1所示：
表1：化合物对植物病原真菌的抑制作用
注：每片滤纸片中的化合物含量为10μg/mL
实施例2
采用滤纸片法测定化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin对植物病原真菌胶孢炭疽菌、链格孢的EC50值。
用DMSO将化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin稀释至800、400、200、100、50、25、12.5μg/mL。在含有PDA培养基的平皿中央分别接入直径为4mm供试的植物病原真菌菌饼，在菌饼四周均匀放置4片滤纸片并在滤纸片上滴加5μL提取液，以DMSO代替样品提取液作空白对照。置28℃恒温箱培养3～5d，用十字测量法记录菌饼生长直径，计算抑制率，采用SigmaPlot 10.0软件计算EC50值。实验结果如表2所示：
表2：化合物对植物病原真菌的EC50值
综合所述，化合物6-deoxy-5a,6-didehydrogliotoxin、5a,6-didehydrogliotoxin对植物病原真菌胶孢炭疽菌、链格孢具有明显的抑制效果，可用于制备生物农药。因此，本发明的实现为研究与开发新的生物农药提供了候选药物，为开发利用海洋真菌来源的天然活性物质提供了科学依据。