一种低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法与流程

本发明属于植物育种
技术领域：
，具体涉及一种低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法。
背景技术：
：大葱（alliumfistulosuml.var.giganteummakino)为葱科葱属二年生或多年生草本植物，起源于中国华北，现在中国、日本、朝鲜和韩国普遍栽培。由于大葱富含营养物质，尤其含有特殊的硫化物，可生食或熟食，是我国重要的调味品。大葱还具有刺激发汗，刺激消化，杀灭多种病菌等医疗作用，深受人民的喜爱。大葱的辣味因不同品种而异。市场上甜味较大的大葱适合于生食，而辣味较浓的大葱较适合于熟食。一般而言，中国大葱地方品种较甜，但假茎较软，不利于储藏，而日本大葱品种辣味较浓，而且假茎较紧实，利于储存和抗风。市场上缺乏假茎紧实而且甜味较大，辣味较轻的大葱种质材料。技术实现要素：本发明的发明目的是提供了一种低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法。利用本发明的技术方案，可以选育出低辣味且假茎紧实的大葱种质，具有良好的市场应用前景。为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：本发明提供了一种低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法，它包括以下步骤：1）亲本选择：选用可溶性固形物质量分数为8%-9%和丙酮酸含量为0.07-0.08mg/gfw的大葱品种为父本，选用可溶性固形物质量分数为11%-12%和丙酮酸含量为0.01-0.03mg/gfw的大葱品种为母本；2）人工杂交：所述母本和所述父本杂交，获得f1代杂种；3)f1代自交：春天播种收获的f1代杂种种子，秋季收获成株，重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹开花后人工自交，获得f2代种子；4)f2代精确选择：大量播种f2代种子，栽培，秋季收获时单株测定可溶性固形物和丙酮酸含量；选择可溶性固形物含量高、丙酮酸含量低而且假茎紧实、葱白长的单株移栽于大棚中，等春天抽薹开花时混合授粉；5)f3至f5代连续自交鉴定：f3代重复f2工作，选择出可溶性固形物含量高、丙酮酸含量低而且假茎紧实，葱白长的单株移栽于大棚，混合授粉，直至f5代结束选择，获得所述低辣味且假茎紧实的大葱种质。进一步的：所述步骤（1）中选用山东大葱掖选一号大葱为母本，以日本引进大葱东京夏黑为父本。进一步的：所述掖选一号大葱的可溶性固形物是11.4%，丙酮酸含量是0.016mg/gfw；所述日本引进大葱东京夏黑的可溶性固形物含量是8.3%，丙酮酸含量是0.07mg/gfw。进一步的：所述步骤（3）中将f1代杂种种子播种在由泥炭-珍珠岩-蛭石组成的培养基质中，定植于大田中。进一步的：按行距80cm,株距5cm定植于大田中。进一步的：所述步骤（4）中可溶性固形物含量用手持糖量计测定，丙酮酸含量测定采用蒜氨酶法进行。与现有技术相比，本发明的优点和技术效果是：本发明提供的低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法是在进行大葱广泛引种和种质资源鉴定基础上，建立的一套包括品种选择、人工杂交、f1代自交、f2代精确选择、f3至f5代连续自交鉴定的杂交育种方法。本发明提出的技术方案，通过选用中国地方品种莱州大葱与日本进口大葱东京夏黑杂交，然后连续多代自交和选择，创制出假茎紧实而且辣味较轻的大葱新种质。本发明的育种方法育成的种质材料，集中了双亲的优点，丰富了大葱育种材料，具有较简便有效的特点。具有良好的市场应用前景。附图说明图1为选出的f5代中选单株；图2为f5代中选单株，其中按由左至右顺序依次为中选单株、莱州掖选一号、日本东京夏黑。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步详细的说明。实施例1一、本实施例提供的低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法具体包括以下步骤：1）亲本选择：在广泛引种试验中，对引进的大葱品种测定可溶性固形物含量和丙酮酸含量作为育种指标，用以分别代表其甜味和辣味的程度。山东地方大葱“掖选一号大葱”的可溶性固形物的质量分数是11.4%，丙酮酸含量是0.016mg/gfw；日本引进大葱“东京夏黑”的可溶性固形物含量的质量分数是8.3%，丙酮酸含量是0.07mg/gfw。2）人工杂交：以所述掖选一号（市售品种）大葱做母本，以所述东京夏黑（市售品种）做父本杂交，获得掖选一号大葱×东京夏黑f1代杂种。3)f1代自交：春天3-4月份将收获的掖选一号大葱×东京夏黑f1代杂种种子播种于72孔塑料穴盘中，穴盘中装填泥炭-珍珠岩-蛭石（质量比为6:2:2）培养基质，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季收获成株，按行距80cm，株距5cm重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹开花后人工自交，获得f2代种子。4)f2代精确选择：春季3-4月大量播种f2代种子，于72孔塑料穴盘中，穴盘中装填泥炭-珍珠岩-蛭石培养基质，7月上旬按行距80cm，株距5cm定植于大田中。秋季11月初收获时单株测定可溶性固形物和丙酮酸含量。可溶性固形物含量用手持糖量计测定，丙酮酸含量测定采用蒜氨酶法进行。选择可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假茎紧实，葱白长的单株移栽于大棚中，等春天抽薹开花时混合授粉。5)f3至f5代连续自交鉴定：f3代重复f2工作，选择出可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假茎紧实，葱白长的单株移栽于大棚，混合授粉。直至f5代结束选择，获得所述低辣味且假茎紧实的大葱种质。如图1和2所示。二、指标的测定方法1、可溶性固形物含量的测定采用手持糖量计测定大葱叶鞘（葱白）中可溶性固形物含量（质量分数）。测定时，将大葱外叶去掉，用刀取大葱白中间部位，用夹蒜器挤压出汁液，滴到手持糖量计中读数，用蒸馏水做对照。表1掖选一号大葱×东京夏黑f2单株可溶性固形物含量株号可溶性固形物含量丙酮酸含量（um）假茎紧实度18.400.056紧实27.600.075较紧实39.000.032较紧实48.900.077较紧实57.000.068较紧实68.180.052较紧实78.500.053较紧实85.600.07较紧实98.300.023较紧实106.200.032较紧实118.500.036紧实127.420.021较紧实138.500.017较紧实149.000.035较紧实1510.200.018较紧实167.500.055较紧实178.900.053较紧实188.820.141软1910.500.019较紧实206.900.124较紧实219.700.16较紧实228.000.063较紧实237.600.023较紧实248.540.041较紧实2511.000.034较紧实2611.30.017紧实2711.60.016紧实2810.30.021较紧实2911.30.035较紧实2、大葱辣味的测定--丙酮酸含量的测定2.1准确称取丙酮酸钠，配制成0至0.9um的溶液，在420nm波长下测定其吸光度值。表2丙酮酸浓度标准曲线丙酮酸钠浓度（um)吸光度（abs)丙酮酸钠浓度（um)吸光度（abs)000.30.3210.010.050.40.3920.031250.0470.50.4860.06250.1410.60.5350.1250.1560.70.5910.20.2160.80.6580.250.3130.90.679根据标准曲线，计算出回归方程：y=1.17911abs-0.05425。2.2用夹蒜器榨取大葱汁液，准确用移液器取0.1ml汁液加入10ml试管中，加入4.0ml蒸馏水，混匀后，取0.5ml溶液加入新试管中，加入0.5mldnph,（0.1%2,4-二硝基苯腈）再加入0.5ml蒸馏水，混匀后，加入2.5mlnaoh（1.5m），10分钟后，在分光光度计上于420nm测定吸光度。将测得的吸光度值代入回归方程，即可计算出丙酮酸含量。3、假茎紧实度的测定：采用人工用大拇指与食指捏大葱出叶孔的假茎，依据用力的大小，判断假茎的紧实度。分为三级，即紧实，较紧实，和软三级。3.采用本发明方法，可改良中国大葱地方品种的假茎紧实度，提高耐贮藏和抗倒伏能力，也可改良引进的日本大葱的辣味，使之增加甜味，降低辣味，更适于鲜食。实施例2本实施例提供的低辣味且假茎紧实的大葱种质的育种方法具体包括以下步骤：1、亲本选择：山东地方大葱“章丘大葱”的可溶性固形物是13.9%，丙酮酸含量是0.009mg/gfw；日本引进大葱“十国一本太”的可溶性固形物含量是8.8%，丙酮酸含量是0.078mg/gfw。可溶性固形物含量、丙酮酸含量及假茎紧实度的测定同实施例1。2、人工杂交：以所述章丘大葱（市售品种）大葱做母本，以所述十国一本太（市售品种）做父本杂交，获得章丘大葱×十国一本太f1代杂种。3、f1代自交：春天3-4月份将收获的章丘大葱×十国一本太f1代杂种种子播种于72孔塑料穴盘中，穴盘中装填泥炭-珍珠岩-蛭石（6:2:2）培养基质，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季收获成株，按行距80cm,株距5cm重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹开花后人工自交，获得f2代种子。4、f2代精确选择：春季3-4月大量播种f2代种子，于72孔塑料穴盘中，穴盘中装填泥炭-珍珠岩-蛭石培养基质，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季11月初收获时单株测定可溶性固形物和丙酮酸含量。可溶性固形物含量用手持糖量计测定，丙酮酸含量测定采用蒜氨酶法进行。选择可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假茎紧实，葱白长的单株移栽于大棚中，等春天抽薹开花时混合授粉。5、f3至f5代连续自交鉴定：f3代重复f2工作，选择出可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假茎紧实，葱白长的单株移栽于大棚，混合授粉。直至f5代结束选择。以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。当前第1页12