本发明属于分子生物学和农业技术领域，具体涉及一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法。
背景技术：
马铃薯属茄科茄属，一年生草本植物，产量大营养成分高。在中国是五大主食之一，在全球为第三大重要粮食作物，因此马铃薯的快速育苗技术至关重要。现有的育苗技术主要有种子育苗和种薯育苗，但两种方式都存在对温度敏感、育苗周期长的问题，无法实现快速高效的培育幼苗。因此发明一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，对马铃薯快速育苗十分重要。
技术实现要素：
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法。
本发明的技术方案概述如下：
一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：
(1)将4.75gms培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1l，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gms培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1l，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；
(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3-4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡30-35s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡8-15min,取出，用无菌水冲洗2-3次，于无菌台内吹干；
(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，23-27℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养17-26天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，平铺于培养基1内，光照，23-27℃培养12-18天，再转入培养基2，光照，23-27℃培养，获得马铃薯幼苗。
本发明的优点：本发明的方法育苗时间短，减少了多次更换培养基的过程，(含有50ml培养基的300ml容积培养瓶能够获得60-80株马铃薯幼苗)能够快速获得大量幼苗。
具体实施方式
次氯酸钠溶液市售，以有效氯计10％。
各实施例的ms培养基是不含蔗糖的。
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：
(1)将4.75gms培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1l，混匀，灭菌，降温至50℃，加入1mg萘乙酸和1mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基1；将4.75gms培养基、30g蔗糖和7g琼脂加蒸馏水至1l，混匀，灭菌，降温至50℃，加入0.5mg萘乙酸和0.25mg6-苄氨基腺嘌呤，得到培养基2；
(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡33s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡10min,取出，用无菌水冲洗3次，于无菌台内吹干；
(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，25℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养20天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，25℃培养15天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，25℃培养(12天)，获得(79株)大量马铃薯幼苗。
实施例2
一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：
(1)同实施例1步骤(1)；
(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗3次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡30s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡8min,取出，用无菌水冲洗2次，于无菌台内吹干；
(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，23℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养26天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，23℃培养18天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，23℃培养(18天)，获得(68株)大量马铃薯幼苗。
实施例3
一种利用马铃薯叶芽愈伤快速育苗的方法，包括如下步骤：
(1)同实施例1步骤(1)；
(2)取马铃薯叶芽，用蒸馏水冲洗4次，在无菌台内用体积浓度为75％乙醇水溶液浸泡35s,取出，再用蒸馏水稀释1倍的次氯酸钠溶液浸泡15min,取出，用无菌水冲洗3次，于无菌台内吹干；
(3)将步骤(2)获得的叶芽均匀摆入装有培养基1的培养瓶内，光照，27℃培养得到不规则形愈伤，更换培养基1培养17天，叶片产生细丝状根，用手术刀切割叶片成1cm×1cm范围内，取4片平铺于培养基1内，光照，27℃培养12天，再转入培养基2(50ml培养基2是装在300ml容积的培养瓶内)，光照，27℃培养(12天)，获得大量(74株)马铃薯幼苗。
以上内容为本发明创造的进一步具体说明，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。