技术特征：
1.一种用于将生物分子转移至细胞中的方法，所述方法包括：a)将包含至少一种受体细胞的受体植物细胞培养物与包含至少一种生物分子的培养基混合，以获得包含所述受体细胞的经混合的细胞培养物；以及b)使所述经混合的细胞培养物的所述受体细胞受伤，以产生至少一种产物细胞，在所述混合和/或受伤之后，所述生物分子转移至所述产物细胞中已经发生。2.如权利要求1所述的方法，其还包括c)根据可选择的或可筛选的标记，筛选或选择所述至少一种产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。3.如权利要求1所述的方法，其中：(a)所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物还包含渗压剂；或者(b)所述受体植物细胞培养物的一个或多个受体细胞包含基因型、遗传背景、转基因、天然等位基因、所关注的编辑或突变；或者(c)所述至少一种产物细胞或其子代细胞包含来自所述受体植物细胞的基因型、遗传背景、转基因、天然等位基因、所关注的编辑或突变；或者(d)所述受体植物细胞培养物是愈伤组织培养物或细胞悬浮培养物。4.如权利要求1所述的方法，其还包括c)在步骤a)或步骤b)之前、期间或之后，将渗压剂添加至所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物中。5.如权利要求3或4所述的方法，其中所述渗压剂包括：(a)聚乙二醇(peg)；或者(b)糖或糖醇。6.如权利要求1所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物包含具有质体基因组编码的标记基因和/或核基因组编码的标记基因的细胞。7.如权利要求6所述的方法，其还包括c)在步骤(b)期间和/或之后，根据所述核基因组编码的标记基因和/或质体基因组编码的标记基因的存在，筛选或选择所述经混合的细胞培养物的所述至少一种产物细胞、或者其至少一种子代细胞、或者从所述至少一种产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。8.如权利要求6所述的方法，其中所述核基因组编码的标记基因或质体基因组编码的标记基因是可选择的标记基因或可筛选的标记基因。9.如权利要求8所述的方法，其中：(a)所述可选择的标记基因选自由以下组成的组：aada、rrns、rrnl、nptii、apha
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6、psba、bar、hppd、asa2和ahas；或者(b)所述可筛选的标记基因是gfp或gus。10.如权利要求6所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物的所述细胞或其子代细胞对于所述质体编码的标记基因是同质性的。11.如权利要求1所述的方法，其中所述至少一种生物分子包括位点特异性核酸酶、向导rna、或者一种或多种包含编码位点特异性核酸酶的序列和/或编码向导rna的序列的重组dna分子。12.如权利要求11所述的方法，其中所述位点特异性核酸酶是锌指核酸酶(zfn)、大范
围核酸酶、rna指导的核酸内切酶、tale核酸内切酶(talen)、重组酶或转座酶。13.如权利要求1所述的方法，其还包括：c)筛选或选择具有编辑或突变的至少一种经编辑或突变的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。14.如权利要求13所述的方法，其中根据通过所述编辑或突变产生的以及存在于所述发育或再生的植物或其子代植物、植物部分或种子中的性状或表型来筛选或选择从所述至少一种经编辑或突变的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。15.如权利要求13所述的方法，其中根据分子测定法来筛选或选择所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。16.如权利要求1所述的方法，其还包括c)从所述经混合的细胞培养物和/或所述至少一种产物细胞或其至少一种子代细胞再生植物。17.如权利要求2所述的方法，其还包括d)从所述经混合的细胞培养物和/或所述至少一种产物细胞或其至少一种子代细胞再生植物。18.如权利要求1所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物的细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。19.如权利要求18所述的方法，其中(a)所述双子叶植物细胞选自由以下组成的组：烟草、番茄、大豆、芸苔和棉花细胞；或者(b)所述单子叶植物细胞选自由以下组成的组：玉米、水稻、小麦、大麦和高粱细胞。20.一种产物细胞，其通过权利要求1所述的方法产生。21.如权利要求20所述的产物细胞，其中所述产物细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。22.如权利要求21所述的产物细胞，其中：(a)所述双子叶植物细胞选自由以下组成的组：烟草、番茄、大豆、芸苔和棉花植物细胞；或者(b)所述单子叶植物细胞选自由以下组成的组：玉米、水稻、小麦和高粱植物细胞。23.一种植物，其从通过权利要求1所述的方法产生的产物细胞或其子代细胞再生。24.如权利要求23所述的再生的植物，其中所述植物是双子叶植物或单子叶植物。25.一种如权利要求24所述的植物的种子、子代植物或子代种子。26.如权利要求24所述的再生的植物，其中：(a)所述双子叶植物选自由以下组成的组：烟草、番茄、大豆、芸苔和棉花植物；或者(b)所述单子叶植物选自由以下组成的组：玉米、水稻、小麦、大麦和高粱植物。27.一种受伤的经混合的细胞培养物，其通过权利要求1所述的方法产生。28.一种用于将生物分子转移至细胞中的方法，所述方法包括：a)使受体植物细胞培养物的受体细胞受伤；以及b)将所述受体细胞培养物与包含至少一种生物分子的培养基混合，以获得包含所述受
体细胞的经混合的细胞培养物，以及产生至少一种产物细胞，在所述受伤和/或混合之后，所述生物分子转移至所述产物细胞中已经发生。29.如权利要求28所述的方法，其还包括：c)根据可选择的或可筛选的标记，筛选或选择所述至少一种产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。30.如权利要求28所述的方法，其中：(a)所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物还包含渗压剂；或者(b)所述受体植物细胞培养物的一个或多个受体细胞包含基因型、遗传背景、转基因、天然等位基因、所关注的编辑或突变；或者(c)所述至少一种产物细胞或其子代细胞包含来自所述受体植物细胞的基因型、遗传背景、转基因、天然等位基因、所关注的编辑或突变；或者(d)所述受体植物细胞培养物是愈伤组织培养物或细胞悬浮培养物。31.如权利要求28所述的方法，其还包括：c)在步骤a)或步骤b)之前、期间或之后，将渗压剂添加至所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物中。32.如权利要求30或31所述的方法，其中所述渗压剂包括：(a)聚乙二醇(peg)；或者(b)糖或糖醇。33.如权利要求28所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物包含具有质体基因组编码的标记基因和/或核基因组编码的标记基因的细胞。34.如权利要求33所述的方法，其还包括c)在步骤(b)期间和/或之后，根据所述核基因组编码的标记基因和/或所述质体基因组编码的标记基因的存在，筛选或选择所述经混合的细胞培养物的所述至少一种产物细胞、或者其至少一种子代细胞、或者从所述至少一种产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。35.如权利要求28所述的方法，其中所述至少一种生物分子包括位点特异性核酸酶、向导rna、或者一种或多种包含编码位点特异性核酸酶的序列和/或编码向导rna的序列的重组dna分子。36.如权利要求35所述的方法，其中所述位点特异性核酸酶是锌指核酸酶(zfn)、大范围核酸酶、rna指导的核酸内切酶、tale核酸内切酶(talen)、重组酶或转座酶。37.如权利要求29所述的方法，其还包括d)从所述经混合的细胞培养物和/或所述至少一种产物细胞或其至少一种子代细胞再生植物。38.如权利要求28所述的方法，其还包括：c)筛选或选择具有编辑或突变的至少一种经编辑或突变的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。39.如权利要求38所述的方法，其中根据通过所述编辑或突变产生的以及存在于所述发育或再生的植物或其子代植物、植物部分或种子中的性状或表型来筛选或选择从所述至少一种经编辑或突变的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。
40.如权利要求38所述的方法，其中根据分子测定法来筛选或选择所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。41.如权利要求28所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物的细胞是双子叶植物细胞。42.如权利要求28所述的方法，其中所述第一植物细胞培养物和/或所述第二植物细胞培养物的细胞是单子叶植物细胞。43.一种产物细胞，其通过权利要求28所述的方法产生。44.如权利要求43所述的产物细胞，其中所述产物细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。45.如权利要求44所述的产物细胞，其中：(a)所述产物细胞选自由以下组成的组：烟草、番茄、大豆、芸苔和棉花植物细胞；或者(b)所述产物细胞选自由以下组成的组：玉米、水稻、小麦和高粱植物细胞。46.一种植物，其从通过权利要求28所述的方法产生的产物细胞或其子代细胞再生。47.一种如权利要求46所述的植物的种子、子代植物或子代种子。48.一种受伤的经混合的细胞培养物，其通过权利要求28所述的方法产生。49.一种用于编辑植物细胞的方法，所述方法包括：a)将包含受体细胞的受体植物细胞培养物与包含至少一种生物分子的培养基混合，以获得包含所述受体细胞的经混合的细胞培养物，其中所述生物分子包括位点特异性核酸酶或包含编码可操作地连接至第一启动子的位点特异性核酸酶的序列的重组dna分子；以及b)使所述经混合的细胞培养物的所述受体细胞受伤，以产生至少一种具有通过所述位点特异性核酸酶引入它的基因组中的编辑或突变的经编辑的产物细胞。50.一种用于编辑植物细胞的方法，所述方法包括：a)使受体植物细胞培养物的受体细胞受伤；以及b)将所述受体植物细胞培养物与包含至少一种生物分子的培养基混合，以获得包含所述受体细胞的经混合的细胞培养物，其中所述生物分子包括位点特异性核酸酶或包含编码可操作地连接至第一启动子的位点特异性核酸酶的序列的重组dna分子，以产生至少一种具有通过所述位点特异性核酸酶引入它的基因组中的编辑或突变的经编辑的产物细胞。51.如权利要求49或50所述的方法，其还包括：c)筛选或选择具有编辑或突变的至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的植物。52.如权利要求49或50所述的方法，其中：(a)所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物还包含渗压剂。53.如权利要求49或50所述的方法，其还包括c)在步骤a)或步骤b)之前、期间或之后，将渗压剂添加至所述受体植物细胞培养物、培养基或经混合的细胞培养物中。54.如权利要求52或53所述的方法，其中所述渗压剂包括：(a)聚乙二醇(peg)；或者(b)糖或糖醇。
55.如权利要求51所述的方法，其中根据通过所述编辑或突变产生的以及存在于所述发育或再生的植物或其子代植物、植物部分或种子中的性状或表型来筛选或选择从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。56.如权利要求51所述的方法，其中根据分子测定法来筛选或选择所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞、或者从所述至少一种经编辑的产物细胞或其子代细胞发育或再生的所述植物。57.如权利要求49或50所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物是愈伤组织培养物或细胞悬浮培养物。58.如权利要求49或50所述的方法，其还包括c)从所述经混合的细胞培养物和/或所述至少一种经编辑的产物细胞或其至少一种子代细胞再生植物。59.如权利要求51所述的方法，其还包括d)从所述经混合的细胞培养物和/或所述至少一种经编辑的产物细胞或其至少一种子代细胞再生植物。60.如权利要求49或50所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物的细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。61.如权利要求60所述的方法，其中：(a)所述双子叶植物细胞选自由以下组成的组：烟草、番茄、大豆、芸苔和棉花细胞；或者(b)所述单子叶植物细胞选自由以下组成的组：玉米、水稻、小麦、大麦和高粱细胞。62.如权利要求49或50所述的方法，其中可操作地连接至编码位点特异性核酸酶的序列的所述第一启动子是组成型启动子、组织特异性或组织优选的启动子、发育阶段启动子或诱导型启动子。63.如权利要求49或50所述的方法，其中所述位点特异性核酸酶是锌指核酸酶(zfn)、大范围核酸酶、rna指导的核酸内切酶、tale核酸内切酶(talen)、重组酶或转座酶。64.如权利要求63所述的方法，其中所述位点特异性核酸酶是rna指导的核酸酶。65.如权利要求49或50所述的方法，其中所述培养基还包含第一重组dna构建体，所述第一重组dna构建体包含编码可操作地连接至启动子的向导rna分子的第一可转录dna序列。66.如权利要求65所述的方法，其中可操作地连接至所述第一可转录dna序列的所述启动子是组成型启动子、组织特异性或组织优选的启动子、发育阶段启动子或诱导型启动子。67.如权利要求49或50所述的方法，其中所述培养基还包含供体模板分子或第二重组dna构建体，所述第二重组dna构建体包含编码可操作地连接至启动子的供体模板分子的第二可转录dna序列。68.如权利要求67所述的方法，其中所述供体模板分子包含转基因，所述转基因包含可操作地连接至植物可表达的启动子的编码序列或可转录dna序列。69.如权利要求67所述的方法，其中可操作地连接至所述第二可转录dna序列的所述启动子是组成型启动子、组织特异性或组织优选的启动子、发育阶段启动子或诱导型启动子。70.如权利要求49或50所述的方法，其中所述第二植物细胞培养物的一种或多种细胞
包含重组dna构建体，所述重组dna构建体包含编码可操作地连接至启动子的向导rna分子的第一可转录dna序列。71.如权利要求49或50所述的方法，其中所述受体植物细胞培养物的所述受体细胞包含供体模板分子或重组dna构建体，所述重组dna构建体包含编码可操作地连接至启动子的供体模板分子的第二可转录dna序列。72.如权利要求71所述的方法，其中所述供体模板分子包含转基因，所述转基因包含可操作地连接至植物可表达的启动子的编码序列或可转录dna序列。73.一种经编辑的产物细胞，其通过权利要求49或50所述的方法产生。74.如权利要求73所述的经编辑的产物细胞，其中所述植物细胞是双子叶植物细胞或单子叶植物细胞。75.一种植物，其从通过权利要求49或50所述的方法产生的经编辑的产物细胞或其子代细胞再生或发育。76.如权利要求98所述的再生的植物，其中所述植物是双子叶植物或单子叶植物。77.一种如权利要求76所述的植物的种子、子代植物或子代种子。78.一种受伤的经混合的细胞培养物，其通过权利要求49或50所述的方法产生。