殖， 建立多个家系，苗种经过开口饵料及养殖环境的控制，养殖至性成熟后采用小鼠生物分析 检测法进行毒性鉴定，然后挑选生长快、抗病强的个体繁殖下一代，如此经过4代以上家系 繁育培育出无毒优良后代。
[0025] -种无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其具体步骤为：
[0026] 基础群体建立：指将控毒的暗纹东方飩通过在淡水条件下养殖，投喂无毒河豚饲 料，有效控制其毒素含量产生，经过人工养殖后形成可繁殖后代的亲本。
[0027] 毒素控制：通过控制养殖水体盐度值、饵料成分从而防止毒素的产生，具体为在养 殖暗纹东方飩的过程中采用淡水养殖，保持盐度为零，采用不含毒素的暗纹东方飩配合饲 料喂养，杜绝外源刺激产生河豚毒素。
[0028] 繁殖：在繁殖季节通过低浓度海水及微水流刺激使其性腺发育良好，由于暗纹东 方飩属江海洄游性鱼类，12月~次年2月属于繁殖季节，可在12月将淡水中养殖的暗纹东 方飩转入浓度为XX的低浓度海水中进行海水养殖，并控制水流速度刺激其性腺发育，达到 可人工繁殖条件。
[0029] 亲鱼选择及繁殖：将性发育成熟的暗纹东方飩通过小鼠生物分析检测法进行毒素 鉴定后选取毒素较低、且生长快、抗逆性强的个体繁殖后代，以选育出无毒、生长速度快、抗 逆性强的可稳定遗传特征，在人工繁殖过程中，经过温控盐度等生理生态学方法处理，促进 性腺发育成熟，每批受精卵都留一部分用于小鼠无毒化鉴定，验证该批受精卵不带毒素。
[0030] 苗种，幼苗及成鱼培育：苗种用纯种淡水臂尾轮虫作为开口饵料，在幼苗和成鱼阶 段均养殖在水源为300~800米的深井水的淡水环境下，投喂不含毒素的河豚饲料，且幼苗 每天投喂3~6次，投喂率为6 %~10 %，成鱼每天投喂2~4次，投饵率为1~4 %，在养 殖过程中加强无毒化鉴别。
[0031] 上述步骤中，不含毒素的河豚饲料，其由以下成分组成：鱼粉：55%~75% ;淀粉： 10%~20% ;螺旋藻：1. 5~3% ;L-蛋氨酸和/或L-赖氨酸：0. 1 %~0. 5%;其余为辅料， 所述辅料是谷元粉、大豆、维生素八、81、82、86、(：、03、大黄、黄岑、板蓝根、金银花中的一种 或几种。
[0032] 上述步骤中，小鼠生物分析检测法是养殖至性成熟后，取雄鱼血液、肝、肌肉、精 巢样品，取雌鱼血液、肝、肌肉、卵巢样品，然后经口灌输给予小鼠做急性毒性试验，观察14 天，观察动物反应状况以确定各组织河豚毒素含量情况。
[0033] -种无毒暗纹东方飩良种培育方法所述挑选生长快、抗病强的个体繁殖下一代， 如此经过4代以上家系繁育培育出无毒优良后代是指在经控毒养殖后繁殖的后代群体中 挑选出无毒、生长速度快、抗病强的个体进行交配繁殖，产生下一代F2代，并检测F2代的河 豚毒素，如此在F2代中挑选出无毒、生长快、抗病强的同一对亲本的后代群体作为亲本，繁 殖下一代F3代，然后繁殖第四代F4及第五代F5,经过4代以上的家系选育后可得到无毒的 暗纹东方飩优良品种，具体毒性参数参照表1，生产速度参照表2。
[0034] 表1各代暗纹东方飩选育后各组织毒性检测
[0035]
【主权项】
1. 一种无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其特点是包括以下步骤： a. 基础群体建立：首先将控毒后的暗纹东方飩群体，在淡水条件下养殖，并投喂不含 毒素的河豚饲料，在繁育前三个月的时间转入低浓度海水中养殖3个月，并给予水流刺激， 以使其生理功能正常发育，达到可繁殖条件； b. 家系繁殖：挑选生长速度快、形态特征优良的暗纹东方飩成鱼作为亲鱼，在低浓度 海水中驯养并人工繁殖，建立多个家系，利用小鼠生物分析法检测家化暗纹东方飩群体体 内河豚毒素含量，挑选毒素含量小的家系作为下一代繁殖的亲本，以此类推进行家系育 种； c. 幼苗及成鱼培育：在幼苗和成鱼阶段均采用淡水养殖环境，投喂不含毒素的河豚饲 料，并在养殖过程中加强无毒化鉴别。
2. 根据权利要求1所述的无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其特征是：所述步骤a及c 中投喂的不含毒素的河豚饲料，其由以下成分组成： 鱼粉：55%~75% 淀粉：10%~20% 螺旋藻：1. 5~3% L-蛋氨酸和/或L-赖氨酸：0. 1%~0. 5% 其余为辅料。
3. 根据权利要求2所述的无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其特征是：所述辅料是谷 元粉、大豆、维生素A、Bl、B2、B6、C、D、E、大黄、黄岑、板蓝根、金银花中的一种或几种。
4. 根据权利要求所述1所述的无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其特征是：所述步骤c 中，幼苗和成鱼均养殖在水源为300~800米的深井水的淡水环境下；投喂不含毒素的河豚 饲料，幼苗每天投喂3~6次，投喂率为6 %~10 %，成鱼每天投喂2~4次，投饵率为1~
5. 根据权利要求1无毒暗纹东方飩良种的培育方法，其特征是：所述步骤b中小鼠生 物分析法的具体内容包括，取繁育的暗纹东方飩的血、肝脏、鱼肉、卵巢样品，分别经口灌输 给予小鼠，观察14天，观察动物反应状况以确定各组织河豚毒素含量情况。
【专利摘要】本发明涉及一种无毒暗纹东方鲀良种的选育方法，基础群体建立：指将控毒的暗纹东方鲀通过在淡水条件下养殖，投喂无毒河豚饲料，经过人工养殖后形成可繁殖后代的亲本；家系繁殖：挑选生长速度快、形态特征优良的暗纹东方鲀作为亲鱼，在低浓度海水中驯养并人工繁殖，利用小鼠生物分析法检测毒素含量，挑选毒素含量小的作为下一代繁殖的亲本，以此类推进行家系育种；幼苗及成鱼培育：在幼苗和成鱼阶段均采用淡水养殖环境，投喂不含毒素的河豚饲料，并在养殖过程中加强无毒化鉴别。本发明采用家系育种的方法，结合小鼠生物分析检测方法，将毒性逐渐降低的趋势延续下去，直至毒性消失，在控制无毒的基础上选育出生长速度快、抗逆性强的暗纹东方鲀良种。
【IPC分类】A23K1-10, A23K1-16, A01K61-00, A23K1-18, A23K1-14
【公开号】CN104719208
【申请号】CN201510128822
【发明人】钱晓明, 朱永祥, 蔡星, 郭正龙, 黄创新, 于杰
【申请人】江苏中洋集团股份有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月23日