一种组培苗介质生根方法
【专利摘要】本发明公开了一种组培苗介质生根方法，包括如下步骤：(1)采用组培苗增殖技术，将在固体增殖培养基中增殖出的美国红枫的团芽分割后，在壮苗培养基中培养，获得美国红枫无根组培苗；(2)将jiffy育苗块在液体生根培养基中浸泡，取出jiffy育苗块，静置沥干，置于培养瓶中，密封灭菌；(3)将步骤(1)获得的美国红枫组培苗，切除茎段底部的茎段，然后插入步骤(2)的育苗块中培养，获得生根的无菌组培苗；(4)将无菌组培苗，在温室中驯化培养，获得无菌组培种苗，(5)将无菌种苗转移到穴盘中培养，获得种苗。本发明用JIFFY育苗块对无菌组培苗进行生根诱导，降低人工成本和种苗损耗以及驯化难度，免除种苗移栽步骤，种苗成活率高，生长健壮。
【专利说明】
一种组培苗介质生根方法
技术领域
[0001 ]本发明涉及木本植物组织培养的培育方法。
【背景技术】
[0002]由于木本植物更长的生理年限，更多的染色体数、高度的皮层与木质部分化，以及 科研教育体制等因素，我国众多研究单位进行的大量研究成果脱离于商业生产的经济可行 性，性状稳定性、种苗整齐度等各项指标，无法应用于大规模商业生产。而利用木本植物组 织培养技术进行种苗繁育的商业活动只在最近几年才刚刚开始。
[0003]制约木本植物组培育苗产业发展的主要技术原因体现在:外植体木质部带菌、增 殖愈伤化、以及难生根等。木本植物组培无菌诱导生根经常出现不生根、根系愈伤化、或根 系与植物茎杆结合不牢固等现象造成组培苗移栽成活率低下，生产成本高昂。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种组培苗介质生根方法，以克服现有技术存在的缺陷。
[0005] 本发明的方法，包括如下步骤：
[0006] 本发明立足于木本植物组织培养技术，并在成熟的组培苗增殖技术基础上进行。
[0007] (1)采用组培苗增殖技术，将在固体增殖培养基中增殖出的美国红楓的团芽分割 后，转移到预先配置好的壮苗培养基中，光照2300~2700LUX，优选2500LUX，光周期14~18/ 8h，优选16/8h，20~30 °C培养5~7周，优选6周，单个芽生长高度达到2~4cm，优选3CM，获得 美国红楓无根组培苗；
[0008] 所述的壮苗培养基，以水为溶剂，每升水中含有如下组分：
[0009] ffPM 1 ~2g/L，优选 1.35g/L
[0010] 蔗糖 20 ~30g/L，优选 30g/L
[0011] 琼脂 5.0~7.0g/L，优选 6.5g/L
[0012] PH 值为5.50 ~6.00,优选 5.80;
[0013] WPM来源于美国西格玛公司销售成品通用培养基(Woody Plant Medium的简称）， 1 /2WPM是指用量为WPM培养基的一半。
[0014] (2)将j if fy育苗块在液体生根培养基中浸泡10~50分钟，优选30分钟，沥干水分， 排列于培养瓶中，密封，121~125°C高压蒸汽灭菌10~20分钟；
[0015] 所述的生根培养基，以水为溶剂，每升水中含有如下组分： WPM 2~3g/L，优选 2.7g/L; IB A 0.5 ~1.0mg/L
[0016] AC ()，5~l，0g/L 蔗糖 15~30g/L
[0017] PH 值为5.50 ~6.00,优选 5.80;
[0018] IBA所述的IBA来源于市售进口分装IBA药品，中文名为吲哚丁酸，分析纯；
[0019] AC来源于市售进口分装AC药品，中文名为活性炭，超细粉末，竹炭；
[0020] 优选的，所述的jiffy育苗块的直径为1.5~2.52cm，优选2cm，高2~4cm，优选3cm 的压缩块；
[0021] 然后取出jiffy育苗块，静置10~50分钟，优选30分钟，沥干水分，排列于培养瓶 中，密封，115~125 °C，优选121°C蒸汽灭菌10~20分钟，优选15分钟，冷却备用；
[0022] (3)将步骤（1)获得的美国红楓组培苗，切除茎段底部3~5mm的茎段，然后插入步 骤（2)的育苗块中，茎段插入深度为8~10mm，优选竖直插入，光照2300~2700LUX，优选 2500LUX，光周期14~18/8h，优选16/8h，20~30 °C培养5~6周，优选4周，可见新根露出 jiffy育苗块，每株植株具有有效健壮根2~5条，根长15~25_，获得生根的无菌组培苗； [0023] (4)将步骤(3)的无菌组培苗，在温室中驯化培养，覆盖80~95%，优选85%的遮光 率的遮阳网，覆盖两层，保持1~2周，优选1周，然后遮盖1层80~95%，优选85%遮光率的遮 阳网1周，保持温室内温度为13~35°C，优选18~26°C，获得无菌组培苗；
[0024] (5)取出（4)所述的无菌组培苗，置于128穴圆孔定制托盘中，600目喷头浇透清水， 晴天上午10点喷施一次速效叶面肥，待jiffy育苗介质见干后浇速效肥培养4~6周，获得商 品种苗，苗高可达15-25cm，此高度种苗可直接装箱发售，或移栽于32穴林木穴盘中；
[0025]优选的，步骤(5)中包括如下的全光照培养步骤：
[0026] 叶面肥用20-20-20速效肥，EC值为1.2ms/cm; jiffy育苗块干后，花洒浇肥水20-20-20速效肥，EC值为0 · 8ms/cm，每次浇透。
[0027]其中：所述的速效肥为美国peters品牌20-20-20水溶性均衡肥。
[0028]本发明所述的iffy育苗块，为美国JIFFY公司在我国销售的育苗块成品；另外此育 苗块也可自制，制备方法如下：
[0029] 选用0~25mm纤维长度规格的进口泥炭土，粉碎机粉碎，加水至相对湿度60%，加 入育苗块生产设备中，自动成型、包裹无纺布，并根据需要剪切至需要长度。所述育苗块生 产设备为国内市场销售的现成商品。
[0030] 本发明采用jiffy育苗块生根时，浸泡营养液后沥干，然后再进灭菌锅灭菌。这能 够保障所有生根操作在无菌条件下进行，避免无根种苗感染微生物而死亡。
[0031] 本发明的关键创新点在于，打破组织培养诱导生根的常规思维与方法，利用jiffy 育苗块浸泡生根营养液。这种方式能够避免常规琼脂糖固体培养基生根苗发根不齐，生根 率低的缺点；
[0032]本发明利用jiffy育苗快无菌生根，培养液适应范围宽松，即使诱导出的根愈伤 化、或根系于茎杆结合不牢固也不影响植物生长，并能够在后续生长中重新发出正常新根， 提尚种苗成活率；
[0033]本发明能够省略常规方法定值驯化后的移栽步骤，jiffy育苗块生根苗生根后无 需移栽，只需驯化后带介质转移到穴盘中生长到l〇cm高度，然后再移栽或直接销售。避免幼 小种苗在移栽过程中的死亡损耗，提高种苗成活率的同时，还能大幅度提高种苗健壮度。 [0034]本发明采用JIFFY育苗块对无菌组培苗进行生根诱导，结合了组培苗生根和驯化 移栽的环节，降低期间的人工生产成本和种苗损耗；
[0035]本发明jiffy育苗块生根后组培苗驯化条件宽泛，容易控制，降低了驯化技术难 度；
[0036]本发明采用jiffy育苗块生根后15cm以下组培苗无需移栽，种苗成活率高，且能够 包装销售；
[0037]本发明采用jiffy育苗块生根后的种苗生长健壮，生长势强，大大提高种苗品质。
【具体实施方式】 [0038] 实施例1
[0039]美国红楓"十月辉煌"组培苗JIFFY育苗块无菌生根方法
[0040]本方法采用木本植物美国红楓"十月辉煌"的处于增殖阶段的无根组培苗。
[0041] (1)采用组培苗增殖技术，将在固体增殖培养基中增殖出的美国红楓的团芽分割 后，转移到预先配置好的壮苗培养基中，光照2500LUX，光周期16/8h，25°C培养6周，单个芽 生长高度达到2~4cm，优选3CM，获得美国红楓无根组培苗；
[0042] 壮苗培养基，，以水为溶剂，每升水中含有如下组分：
[0043] ffPM 1.35g/L
[0044] 蔗糖 30g/L
[0045] 琼脂 6.5g/L
[0046] PH 值为 5.80;
[0047] (2)将jiffy育苗块在液体生根培养基中浸泡30分钟，生根培养基，每升水中含有 如下组分： W PM 2.7g/L.
[0048] IB A 1 .Omg/L AC 0.5g/L
[0049] 蔗糖 25g/L
[0050] PH 值为 5.80;
[00511所述的jiffy育苗块的直径为2cm，高3cm的压缩块；
[0052] 然后取出jiffy育苗块，静置130分钟，沥干水分，排列于培养瓶中，密封，121°C蒸 汽灭菌15分钟，冷却备用；
[0053] (3)将步骤（1)获得的美国红楓组培苗，切除茎段底部4mm的茎段，然后插入步骤 (2)的育苗块中，茎段竖直插入深度为9mm，光照2500LUX，光周期16/8h，25 °C培养培养4周， 可见新根露出jiffy育苗块，每株植株具有有效健壮根2~5条，根长15~25mm，获得生根的 无菌组培苗；
[0054] (4)将步骤(3)的无菌组培苗，转移到温室中，覆盖85%的遮光率的遮阳网，覆盖两 层，保持1周，然后遮盖1层85 %遮光率的遮阳网1周，保持温室内温度为22°C。
[0055] (5)取出无菌组培苗，置于128穴圆孔定制托盘中，600目花洒浇透清水，晴天的上 午10点喷施叶面肥;待育苗块干后花洒浇施速效肥培养5周可得商品种苗，苗高可达15cm， 此高度种苗可直接装箱发售，或移栽于32穴林木穴盘中。
[0056] (6)穴盘苗在温室进行全光照培养。
[0057]叶面肥用20-20-20速效肥，EC值为1.2mS/cm，晴天上午10点喷施一次;JIFFY育苗 块干后花洒浇肥水20-20-20速效肥，EC值为0.8ms/cm，每次浇透。
【主权项】
1. 一种组培苗介质生根方法，其特征在于，包括如下步骤： (1) 采用组培苗增殖技术，将在固体增殖培养基中增殖出的美国红枫的团芽分割后，转 移到壮苗培养基中培养，获得美国红枫无根组培苗； (2) 将j if fy育苗块在液体生根培养基中浸泡;然后取出j if fy育苗块，静置，渐干，排列 于培养瓶中，密封，灭菌； (3) 将步骤（1)获得的美国红枫组培苗，切除茎段底部的茎段，然后插入步骤(2)的育苗 块中，培养获得生根的无菌组培苗； (4) 将步骤(3)的无菌组培苗，在溫室中驯化培养，获得无菌组培种苗； (5) 将步骤(4)获得的驯化的无菌组培苗，置于圆孔托盘中培养，获得商品种苗。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1)中，将在固体增殖培养基中增殖出 的美国红枫的团芽分割后，转移到壮苗培养基中，光照2300~2700LUX，光周期14~18/她， 20~30°C培养5~7周。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1)中，所述的壮苗培养基，W水为溶 剂，每升水中，含有如下组分： WPM 1 ~2g/L，，优选 1.35g/L 薦糖 20~30g/L 琼脂 5.0~7.0g/L PH 值为 5.50 ~6.00。4. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的生根培养基，W水为溶 剂，每升水中，含有如下组分： WPM 2~3g/L，犹选 2.7g/L 描A 0.5~l.Omg化 AC 0.5 ~!.Og/L 蕭糖 15~撕g/L PH 值为 5.50 ~6.00。5. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，jiffy育苗块在液体生根培养 基中浸泡10~50分钟，渐干水分，排列于培养瓶中，密封，121~125°C高压蒸汽灭菌10~20 分钟。6. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，将步骤（1)获得的美国红枫组 培苗，切除茎段底部3~5mm的茎段，然后竖直插入步骤(2)的育苗块中，茎段插入深度为8~ 10mm，光照2300~2700LUX，光周期14~18/她，20~30°C培养5~6周，获得生根的无菌组培 苗。7. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，将步骤(3)获得的无菌组培苗， 在溫室中，覆盖80~95%遮光率的遮阳网，覆盖两层，保持1~2周，然后遮盖1层80~95%遮 光率的遮阳网1周，保持溫室内溫度为13~35°C，驯化2-3周。8. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)中，种苗的培养方法:叶面肥用20- 20-20速效肥，EC值为1.2ms/cm，晴天上午10点喷施一次;育苗块干后600目花洒诱20-20-20 速效肥，EC值为0.8ms/cm，每次诱透，培养4-6周可获得株高15-25CM的商品种苗。
【文档编号】A01H4/00GK106069749SQ201610397202
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月7日 公开号201610397202.3, CN 106069749 A, CN 106069749A, CN 201610397202, CN-A-106069749, CN106069749 A, CN106069749A, CN201610397202, CN201610397202.3
【发明人】胡春宏, 常苹, 王婷婷, 季翔
【申请人】江苏东郁园林科技有限公司