专利名称：肿瘤细胞深低温长期冷藏系统的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种生物医学实验装置，尤其涉及一种应用于肿瘤细胞深低温长期冷藏的生物医学实验室装置。更具体地说，这是一种由深低温冷藏试管、运输包装盒、摆动性恒温培养箱、培养箱内试管座、细胞清洗浓缩装置、管理系统、液氮容器、深低温冻箱组成的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，专门应用于肿瘤细胞采集、运输、处理、深低温冷藏。
背景技术：
应用树突状细胞免疫治疗肿瘤及肿瘤疫苗治疗肿瘤的临床效果已经被很多基础医学实验和临床医学试验所证实，很多欧美医学中心已经成功地应用树突状细胞和疫苗治疗多种类型的肿瘤，并取得了令人瞩目的成功。
应用树突状细胞和肿瘤疫苗治疗肿瘤的基本前提是在肿瘤切除手术中、在内窥镜活检时、在经皮体外穿刺术时采集病人自身活体肿瘤细胞，进行长时间深低温保存，应用病人自身肿瘤细胞制备各类肿瘤疫苗。
目前尚无报道应用专用设备完成上述任务，目前临床实验室习惯沿用普通生物实验室的常用材料、装置和设备来采集、运输、处理、保存肿瘤细胞，经常发生标本污染、标本号码管理混乱、标本保管不善等各种各样的问题，尤其在临床大批量深低温冷藏多个病人的标本时，问题表现尤为突出。
发明内容
为了弥补现有技术缺陷和不足，本实用新型的目的是提供一种新型专门用于肿瘤细胞采集、运输、处理和深低温冷藏的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，更有效率和更高质量地保藏肿瘤细胞。
为了解决其技术问题，本实用新型采用的技术解决方案，其特征是，这是一种由深低温冷藏试管、运输包装盒、摆动性恒温培养箱、培养箱内试管座、细胞清洗浓缩装置、管理系统、液氮容器、深低温冻箱组成的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，专门应用于肿瘤细胞采集、运输、处理和深低温冷藏。本实用新型的特征是，其装置由下列部份构成●深低温冷藏试管■试管可以用无毒塑料，如聚丙烯等，或采用金属材料，不锈钢，必须能耐深低温一198℃，其上端带外螺丝，与试管盖配合。
■试管盖用来封闭试管，带内螺纹，并与试管内螺丝相配合连接，试管盖上有一个孔，用来固定与外界交通的管道，试管盖孔与管道之间用硅橡胶垫圈封闭和固定，试管盖也可以用金属和塑料制成，须耐深低温。
■与外界交界的管道通过硅橡胶垫圈与试管盖固定，其顶端有外螺纹与帽盖相连，可用金属或无毒塑料制作。
■与外界交通管道的帽盖封闭试管与外界交通，有内螺丝与管道配合。
■硅橡胶垫圈-固定管道与试管，用医用硅胶组成。
■试制时所有材料均可用不锈钢材料制作，作为样品。大批量生产时可以考虑用塑料模具批量加工。
■试管容积应在10ml左右，可以容纳足够的肿瘤组织。
●运输包装盒有37℃恒温装置，电池可充电，有时间记录，温度报警、保温材料。
●摆动式恒温培养箱可应用成熟产品，根据要求加配置，要求37℃恒温、定时、温度显示、报警，可用作孵育(胶原酶)或灭活肿瘤细胞(41℃)二小时。
●培养箱内试管座。
用来固定试管，外形与试管相配合，有定时、测温、报警(声光)功能，可以稳定地固定在培养箱内，用于孵育定时，或无活定时，数字化装置，可以设定温度报警时间定时，并有声光报警。
●细胞清洗浓缩装置。
典型TFF装置，采用0.45μm过滤膜，蠕动泵速度400ml/min，浓缩率1∶10，冷藏试管倒置在试管架上。
TFF容器可以用玻璃作为材料，有侧口、上口、下口，可反复使用，TFF过滤器经清洗、消毒后亦可反复使用，TFF容器采用50ml起始容量。
每套装置只要一个蠕动泵及控制装置，TFF容器及过滤盒则每个病人专用。
●管理系统采用LIMS软件。采用LIMS软件，根据肿瘤细胞冷藏保管特点进行自我客户化定义，网络化管理。
●肿瘤细胞裂解物制备装置。
■超声波肿瘤抗原制备装置。
与冷藏试管配套装置，超声换能器置于试管座底部，超声电源同样置于底部，经过测试后规定的超声能量以及时间可以破碎肿瘤细胞。
■冻融细胞裂解装置特别冷藏试管底座，有时间自动设定装置，设定时间后放入深低温冰箱，规定时间到达后，自动报警，技术人员再将其放入37℃恒温水浴箱，放置前同样设置时间，时间到达后再自动报警，连续3次后细胞裂解。
本实用新型装置可广泛应用于下列用途■建立连锁肿瘤细胞银行■为病人提供肿瘤疫苗制备服务■为病人提供肿瘤抗原制备服务■为病人保存其他各种人体鲜活细胞■建立连锁“人体组织及细胞银行”本实用新型的有益效果是，提出一种自动管理、专门应用于肿瘤细胞深低温保藏的自动化装置，提高肿瘤细胞保存的效率和提高保管质量。
以下结合附图和实施例对本实用新型作进一步说明
图1深低温冷藏试管示意图图2肿瘤细胞深低温冷藏系统示意图图3肿瘤细胞裂解制备装置示意图图中，101硅橡胶垫圈，102试管盖(带内螺纹)，103外接管盖帽，104外接管，105试管，201缓冲液，202冷藏试管，203金属过滤网，204TFF盒，205蠕动泵，206试管，207试管架，208弃液袋，209侧口，210上口，211下口，212过滤出口中，213入口，214出口，301试管，302试管架，303超声波换能器，304超声波电源。
具体实施方式
1.采集病人肿瘤组织■在手术室或内窥镜室，无菌环境下，采集无菌、鲜活的肿瘤组织■配置的试剂盒内有◆带抗菌素的培养液(用于清洗消毒)，肿瘤组织置于内部数分钟清洗消毒后弃去。
◆小剪刀。将肿瘤组织裁剪成1mm3以下的碎块，并仔细挑除纤维、血管。
◆冷藏试管(试管内置于8～10ml培养液)。
■已剪碎成小块的肿瘤组织放入冷藏试管后，放入特别运输容器(经带抗菌素的培养液清洗消毒数分钟后)。
■设置温度，设定采集时间。
■在冷藏试管及运输盒上必须贴标签。
2.运输应在24小时内运至指定的处理地点，如果运输时间较长，则冷藏试管的帽盖采用半透膜(透气不透水)3.分离肿瘤细胞，制成细胞悬浮液a)用吸管吸除上清培养液b)加入胶质酶(已配制)c)冷藏试管放入试管座(定时测定警报)。启动定时、测温、报警装置后放入摇摆式恒温培养箱，半小时孵育后。
d)将冷藏试管连接管道，倒置于试管架，用TFF装置反复清洗浓缩。
e)制成的肿瘤细胞悬浮液置入冷藏试管，放入液氮容器长期保存。
f)每个病人有一个一次性试剂盒，包括冷藏试管、带抗菌素的培养液、TFF专用容器、TFF过滤器、相应管道，每个物品上有同样条形码(病人唯一的ID)。
g)胶原酶及缓冲液在实验室配制。
h)每次操作前均应在LIMS系统下进行操作。
权利要求1.一种肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，其特征在于这是一种由深低温冷藏试管、运输包装盒、摆动性恒温培养箱、培养箱内试管座、细胞清洗浓缩装置、管理系统、液氮容器、深低温冻箱组成的装置。
2.按权利要求1所述的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，其特征是深低温冷藏试管用无毒塑料，或金属材料制备，并能耐深低温-198℃，其上端带外螺丝，与试管盖配合，试管盖用来封闭试管，带内螺纹，并与试管内螺丝相配合连接，试管盖上有一个孔，用来固定与外界交通的管道，试管盖孔与管道之间用硅橡胶垫圈封闭和固定，试管盖用金属和塑料制成，须耐深低温，与外界交界的管道通过硅橡胶垫圈与试管盖固定，其顶端有外螺纹与帽盖相连，可用金属或无毒塑料制作，与外界交通管道的帽盖封闭试管与外界交通，有内螺丝与管道配合。
3.按权利要求1所述的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，其特征是运输包装盒装有37℃恒温显示温度和报警装置，其中培养箱内试管座用来固定试管，外形与试管相配合，可以稳定地固定在培养箱内。
4.按权利要求1所述的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，其特征是细胞清洗浓缩装置采用超滤膜浓缩装置，采用0.4μm过滤膜，冷藏试管倒置在试管架上，超滤膜浓缩容器有侧口、上口、下口，可反复使用。
5.按权利要求1所述的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，其特征是肿瘤细胞裂解制备装置采用超声波肿瘤抗原制备装置与冷藏试管配套装置，超声换能器置于试管座底部，超声电源同样置于底部，或采用冻融细胞裂解装置特别冷藏试管底座。
专利摘要本实用新型涉及一种生物医学实验装置，尤其涉及一种应用于肿瘤细胞深低温长期冷藏的生物医学实验室装置。更具体地说，这是一种由深低温冷藏试管、运输包装盒、摆动性恒温培养箱、培养箱内试管座、细胞清洗浓缩装置、管理系统、液氮容器、深低温冻箱组成的肿瘤细胞深低温长期冷藏系统，专门应用于肿瘤细胞采集、运输、处理、深低温冷藏。
文档编号C12N5/08GK2923719SQ2005200436
公开日2007年7月18日 申请日期2005年7月21日 优先权日2005年7月21日
发明者高春平 申请人:高春平