专利名称：主要包括一种对映异构体的1,1,1-三氟异丙醇的制备方法
技术领域：
本发明涉及其中特定的对映异构体占主要地位的l,U-三氟异丙醇的 制备方法，其通过1,1,1-三氟丙酮的对映选择性的酶还原来制备。
背景技术：
已知仅有少数方法用于合成主要包括作为目标药物构造单元的特定的 对映异构体的l,U-三氟异丙醇(可选名1，1,1-三氟-2-羟基丙垸)。因此，例
如，根据Yonezawa等人(T. Yonezawa， Y. Sakamoto, K. Nogawa， T. Yamazaki， T. Kitazume, C7zew. Ze". 1996, 855-856)所述，通过在制备之后，分离形成的外 消旋体，可以选择对映异构体。然而，该类外消旋体拆分受限为预先制备 的总产物的最大产率的50%。
无可置疑的是，原则上最有效的合成路线是相应酮"l，l，l-三氟丙酮"直 接不对称地转化成相应醇，在这种情况下直接得到所需的对映异构体。原 则上可以使用手性还原剂或者使用手性催化剂与还原剂。由于效率原因并 且由于显著改善的原子经济性，后一种方法是更优选的。然而，至今仅公 开了关于通过1,1,1-三氟丙酮的对映选择性的还原来制备主要包括一种对 映异构体(下面也称作"对映异构体-富集的")的1,1,1-三氟异丙醇的两项研 究，并将在下面进行说明。鉴于酮类的不对称还原发展出的大量方法，这 是极为令人惊讶的。
因此，Brown等人使用用于l，l,l-三氟丙酮的立体选择性还原的手性还 原剂得到了对映异构体过量89% ee的相应醇(P.V. Ramachandran， A.V. Teodorovic, H.C. Brown, 7^ra/^Aow 1993,邦，1725-1738)。在这种情况下， 除了对映异构体过量低于90。/。ee之外，从工业观点来看，其缺点在于使用 要求化学计量的量的手性还原剂"(-)-B-氯二异松茨烷基硼垸"。此外，要求 化学计量的量的樟脑衍生物作为手性助剂以制备这种有机硼化合物。
对映异构体富集的l，l，l-三氟异丙醇的一种可选合成基于使用醇脱氢酶的l,U-三氟丙酮的直接酶还原。醇脱氢酶属于酶类别EC 1，并催化羰基 化合物的(可逆)反应以形成醇官能团。在这种情况下，Prdog规则适用于选 择性，根据Prelog规则取决于与羰基邻近的基团的各自尺寸发生优先转化 为相应(i )或(5) X寸映异构体(K. Faber，伤Wrara/orma"ora (>gam'c C/7emz.W/j， 4th edition, Springer, Berlin, 2000, Chapter 2.1.1, pp. 166-167)。因 此，具有与羰基邻近的相似尺寸基团的酮类的还原成为问题，例如，在l，l,l-三氟丙酮的情况下也如此。因此，至今尚未公开对于l，l,l-三氟异丙醇的使 用酶的高选择性还原。因此，Bucciarelli等人报告的使用面包酵母菌还原 U,l-三氟丙酮形成OS)-U,l-三氟异丙醇导致对映异构体过量仅有80.3% ee [M. Bucciarelli, A. Forni， I. Moretti, G. Torre， 5^"Aw^ 1983， 897-899]，因此显 著低于工业应用所需的对映异构体过量，8卩>90% ee，特别是>95% ee，极 优选>99%^。例如，药物应用的要求在于，每种情况下光学活性产物的对 映异构体过量为>99% ee (关于"ee"的定义和进一步说明，参见例如K. Faber,
Orgaw/c CTzew/s^y, 4th edition, Springer, Berlin, 2000， Chapter2丄l， pp. 28-52)。与此相比，多个例子是已知的，例如醇脱氢酶-催 化的酮类还原，这种酮具有与羰基邻近的空间上明显不同的取代基，并且 对映选择性为>90% ee,特别是〉95。/。ee，极优选>99% ee [参见尤其是K. Nakamura， T. Matsuda in: Cato/拜》z'w (9厂gam'c 5y涵e^ (编者K.
Drauz, H. Waldmann)， Volume III, Wiley-VCH, 2nd edition, 2002, pp. 991-1047]。
发明内容
本发明的目的是提供主要包括一种对映异构体的l,l，l-三氟异丙醇的 制备方法，所述方法可以制备高对映异构体过量〉卯。/。ee、特别是〉95。/。ee、 极优选>99% ee的这些化合物。
根据权利要求1所述的方法实现上述目的。优选的实施方案由从属权 利要求代表。所述方法利用了 l,U-三氟丙酮的对映选择性的还原。
令人惊讶的是，使用本发明方法获得对映异构体过量高达〉99。/。ee，在 至今的现有技术中是意料之外的。根据至今公开的实验结果，ee值明显 <90% ee，并且基于Prdog规则-作为与羰基邻近的CH3和CF3两种基团的相似性的结果-原则上将预期至较低的选择性。然而，相比而言，本发明方
法获得了优异的对映选择性〉90。/。ee，特别是〉95。/。ee，特别优选>99% ee。 本发明方法中可以使用的醇脱氢酶原则上是本领域技术人员已知的该 类的所有酶，只要它们能够催化本发明方法中使用的转化/反应。这通过常 规实验可以找到。
优选使用的醇脱氢酶是即使与羰基邻近的基团具有相似的空间尺寸也 能催化立体选择性的转化的醇脱氢酶。
特别优选使用选自以下生物体的至少一种醇脱氢酶红串红球菌 (/ /zo<io<:oct^ ^y^zrapoto) (S-ADH)，石蜡节杆菌(^4rf/zra6acfer _para^ wews) (S-ADH)或高加索酸奶乳杆菌(丄actoZ^c/〃附fe/ r) (R-ADH)(允eo^rapofc 的ADH: a) EP 1499716; b) K. Abokitse, W. Hummel， Cloning, sequence analysis, and heterologous expression of the gene encoding a (S)-specific alcohol dehydrogenase from i /zo^fococcws e，/zra/ o//51 DSM 43297， Appl. Microbiol. Biotechnol. 2003， 62， 380-386 ; c) PCT/EP2005/06215). (A 戸4"冊的ADH: WO 2005103239)(丄a加6腦'〃w fe,的ADH: a) EP 456107; b) C.W. Bradshaw, W. Hummel， C,H. Wong, Lc oZ>ad//w Alcohol Dehydrogenase: A UsefUl Catalyst for Synthesis, J. Org. Chem. 1992， 57, 1532-1536; c) PCT/EP2005/06215)。
在更优选的实施方案中，本发明还涉及其中至少一种醇脱氢酶源于选 自以下的生物体的本发明方法高加索酸奶乳杆菌(丄flcto6ac///^ fey 。、胶 红类酉孝母菌(i /zoc^otora/a g/w&"&)、广布肉杆菌(C"A7 o6acfm'画、 野生链球菌(5^eptococcws;ferw"、浮游芽生杆菌OS/astoZ)flc/er "atoto〃'"力、锁 接[5酉孝母菌(5^oW血6o/t^ sa/mom'co/or) 、 /Vc/n'a /^/c;pMa、尸z'c/zz.a / a加ni、 马克思克鲁维酵母(K/M_yveraw_yc&s mawa'a"w力、卡氏毕赤酵母(P/c/z/a carso"")、酉良酒酵母(&cc/zaramjcay cweWw'ae)禾口红串红球菌(朋ocfococcw51
优选使用细菌醇脱氢酶。
原则上在本发明方法中可以以本领域技术人员熟悉的形式(见下)使用 醇脱氢酶。然而，由于作为氧化还原酶的醇脱氢酶是辅因子依赖性酶，所 用酶所需的辅因子必须以足量存在于反应混合物中，以成功地进行还原，从而能够确保酮类的完全转化。由于这些辅因子是相对高成本的分子，因 此出于经济原因，使用最小量的辅因子是关键优势。能够使用低于化学计 量所需量的辅因子的一种可能性是通过存在于混合物中的第二生物催化剂 使其再生。操作这种体系，使得(例如，有机)化合物的酶转化随辅因子的"消 耗"进行，并且这种辅因子通过第二酶体系原位再生。因此，其结果是降低 了高成本辅因子的使用量。
因此，借助于偶联酶体系的反应代表了有利的过程。
例如在DE-A 10233046或DE-A 10233107中提及了这种偶联体系。 使所用的辅因子再生的酶首先取决于使用的辅因子，其次还取决于将 被氧化或被还原的辅底物。使NAD(P)H再生的一些酶记载在Enzyme Catalysis in Organic Synthesis, Ed.: K. Drauz, H. Waldmann， 1995， Vol. I， VCH，页721中。出于商业利益并也可以大规模得到，且目前用于合成氨 基酸，从这些原因来看，有利的是使用所谓的甲酸脱氢酶(FDH)(也参见 DE-A 10233046)和所谓的葡萄糖脱氢酶。因此，它们也优选用于本发明方 法中来再生辅因子。FDH特别优选地源于生物体博伊丁假丝酵母(07^/油 6oW/mY)。还可以使用其进一步发展的突变体，例如记载在DE-A 19753350 中的那些。还可以并优选使用源于枯草杆菌(5"c///^ w^/fc)的葡萄糖脱氢 酶。然而，例如通过使用异丙醇的底物-偶联再生也是可以的(使用异丙醇的 辅因子再生方法的例子a) W. Stampfer, B. Kosjek, C. Moitzi, W. Kroutil， K. Faber,C7zem. 2002， J", 1056-1059; b) M. Wolberg, W. Hummel， C. Wandrey, M. Mmier，爿wg缓Oz置2000， 7", 4476-4478)。
在本发明方法中，立体特异性转化/反应可以在适于这种反应的任何介 质中进行。例如可以在纯的水溶液或在用有机溶剂补充的含水介质中进行 催化。在这一方面可以是单相或多相体系。本发明方法的所选反应介质没 有限制，只要所选酶能够催化其中所需的立体选择性反应，并且产率为所 需程度。
使用高初始底物浓度进行所述方法(从高的单位体积产率的观点来看) 是有利的。这些浓度通常>50 g/1,优选〉100g/1，极优选M50g/1。此外，通 过在催化转化中连续供应新的底物溶液，可以任选地保持底物浓度，特别 是当使用下述全细胞催化剂时。原则上可以在任何适合的温度下进行所述方法。在这一方面本领域技 术人员的目的是优选以最大纯度和最小时间获得所需产物的最大产率。此 外，所用酶在所用温度下应足够稳定，反应具有最大的对映选择性。使用
源于喜温生物体的酶，完全可以例如达到IO(TC的温度。主要目的是所用酶 催化最适宜时的温度。水性体系中肯定可测的下限是-15'C。本发明方法的 优选温度范围为10°C~60°C，特别优选20'C 4(rC，并主要根据上述标准确 定。
反应中的pH同样主要根据所用酶和辅因子的稳定性确定，并可以通过 测定转化速率来确定，而且针对本发明方法相应地设置。用于酶的优选范 围通常为pH5 H，但是，如果所用酶的一种在较低值或较高值下具有最大 催化，那么在例外情况下pH也可以更高或更高。本发明方法中进行反应的 pH范围优选为5.5~10.0，特别是6.0~9.0。
尽管本文所述方法也可以用在适合的反应介质中分离的酶进行，但在 特别优选的实施方案中使用全细胞催化剂进行本发明方法，其中全细胞催 化剂是包括反应用的(至少一个)全细胞的体系，所述细胞优选能够同时表达 所需的醇脱氢酶和再生辅因子的酶(对于使用全细胞催化剂进行对映选择性 的还原的方法设计，参见例如，尤其是PCT/EP2005/06215)。因此，所述 细胞优选表达至少一种具有醇脱氢酶活性的酶(多肽)和至少一种具有使所 用辅因子再生的活性的酶。所用的这些酶和/或细胞优选源于前述提及的生 物体。
对于使用异丙醇的辅因子再生，还可以使用优选表达至少一种具有醇 脱氢酶活性的酶(多肽)和具有使所用辅因子再生的活性的任选一种酶的细 胞。
原则上可以举出的适合的微生物是本领域技术人员已知的用于此目的 的所有生物体，例如，酵母菌，如T/a"se"w/a jw&worp/w、户!'c/n'a s卩、
原核生物，'如co/z'、万a"7/iw ^Z^/fe，或真核细 胞，如哺乳动物细胞、昆虫细胞等。可以并且优选的是使用用于此目的的 五.co/Z菌株。极特别优选的是五.co//XL1 Blue、 NM522、 JM101、 JM109、 JM105、 RR1、 DH5a、 TOP l(T或HB101 。这些菌株是公知的，并且可购得。
优选使用如DE-A 10155928中记载的生物体作为主体生物体。这种生物体的优点在于，同时表达适于本发明方法的两种多肽体系，从而对于本 发明方法仅需要使用一种重组(经基因修饰的)生物体。
为调节与所需催化活性相关的多肽(酶)的表达，相应的编码核酸序列可 以以不同的复制数存在于不同质粒上，和/或不同强度的启动子可以用于核 酸序列的不同强度的表达。使用这种经调节的酶体系，其优点在于不会积 聚中间体化合物，并且相关反应可以在最佳总速率下进行。然而，这是本
领域技术人员公知的(Gellissen， G.; Piontek, M.; Dahlems, U.; Jenzelewski， V.; Gavagan， J.W.; DiCosimo, R.; Anton， D丄.；Janowicz, Z.A. (1996)， Recombinant Hansenula polymorpha as a biocatalyst. Coexpression of the spinach glycolate oxidase (GO) and the S. cerevisiae catalase T (CTT1) gene, Appl. Microbiol. Biotechnol. 46， 46-54; Farwick， M.; London, M.; Dohmen, J.; Dahlems, U.; Gellissen， G.; Strasser, A.W.; DE-A 19920712)。用作"全细胞催化 剂"并在合适时经基因修饰的微生物的制备原则上可以根据本领域技术人 员已知的方法进行(Sambrook， J.; Fritsch， E.R and Maniatis, T. (1989)， Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York; Balbas， P. and Bolivar， F. (1990), Design and construction of expression plasmid vecitors in E. coli, Methods Enzymol. 185， 14-37; Rodriguez, R丄.and Denhardt， D.T. (eds) (1988), Vectors: a survey of molecular cloning vectors and their uses, 205-225, Butterworth, Stoneham)。关 于一般过程(PCR、克隆、表达等)所用的技术，可以参见以下文献及其中引 用的文献Universal Genome Walker Kit User Manual, Clontech, 3/2000和 其中引用的文献；Triglia T.; Peterson, M.G. and Kemp， D丄(1988)， A procedure for in vitro amplification of DNA segments that lie outside the boundaries of known sequences, Nucleic Acids Res. 16, 8186; Sambrook, J.; Fritsch, E.F. and Maniatis， T. (1989), Molecular cloning: a laboratory manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York; Rodriguez, R.L. and Denhardt, D.T. (eds) (1988)， Vectors: a survey of molecular cloning vectors and their uses, Butterworth, Stoneham。
优选使用例如在搅拌容器、级联搅拌容器或膜反应器中的反应体系， 可以间歇操作和连续方式操作。然而，可以进行本发明方法的任何类型的体系均是适合的。
在本发明中，膜反应器是指其中催化剂封装在反应器中，同时低分子 量物质可以被加到反应器中或能够离开反应器的任何反应容器。此外，膜 可以直接集成在反应室中或者加入至单独在外的过滤模块中，其中反应溶 液通过过滤模块连续或间歇地流动，并且渗余物返回到反应器中。适合的
实施方案尤其记载在W098/22415和Wandrey等人的Jahrbuch 1998， Verfahrenstechnik und Chemieingenieurwesen, VDI, pp. 151 et s叫；Wandrey 等人的Applied Homogeneous Catalysis with Organometallic Compounds, Vol. 2， VCH 1996, pp. 832 et seq.; Kragl等人，Angew. Chem. 1996, 6, 684 et seq中。 此外，除了间歇和半连续过程之外，可以在装置中进行的连续过程例 如可以错流过滤模式或终端过滤形式进行。这两种方法的变体原则上记载 于王见有技术中(Engineering Processes for Bioseparations， Ed.: L.R. Weatherley， Heinemann, 1994， 135-165; Wandrey等人，Tetrahedron Asymmetry 1999， 10, 923-928)。
对于应用，用于本发明方法的相关多肽可以作为均匀纯化的化合物的 自由形式或作为重组产生的酶使用。此外，这些多肽还可以用作完整"主体 生物体"(经基因修饰的微生物)的构成成分，或与在需要时被纯化并在适宜 时被破坏的主体生物体细胞联用。
同样，可以使用固定形式的酶(SharmaB.P.; Bailey L.F. and Messing R.A. (1982)， Immobilisierte Biomaterialiern画Techniken und Anwendungen， Angew. Chem. 94, 836-852)。优选通过冻干进行固定(Paradkar， V.M.; Dordick, J.S. (1994), Aqueous-Like Activity of oc-Chymotrypsin Dissolved in Nearly Anhydrous Organic Solvents, J. Am. Chem. Soc. 116， 5009-5010; Mori, T.; Okahata， Y (1997), A variety of lipi-coated glycoside hydrolases as effective glycosyl transfer catalysts in homogeneous organic solvents, Tetrahedron Lett. 38, 1971-1974; Otamiri， M.; Adlercreutz, R; Matthiasson, B. (1992), Complex formation between chymotrypsin and ethyl cellulose as a means to solubilize the enzyme in active form in toluene, Biocatalysis 6， 291-305)。牛寺另U优选的是在表 面活性物质存在下的冻干，例如，Aerosol OT、聚乙烯吡咯垸酮、聚乙二醇 (PEG)或Brij 52 (二甘醇单十六烷基醚)(Kamiya， N.; Okazaki， S.-Y.; Goto, M.(1997), Surfactant-horseradish peroxidase complex catalytically active in anhydrous benzene, Biotechnol. Tech. 11,375-378)，但不限于此。特别优选的 是在Euperg^上的固定，特别是Eupergit C⑧和Eupergit 250L (R6hm) (Eupergit.RTM. C, a carrier for immobilization of enzymes of industrial potential. Katchalski-Katzir, E.; Kraemer, D. M. Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic (2000)， 10(1-3)， 157-176)。同样，优选在与补充有His标签(六组氨酸)的多肽组合的Ni-NTA上的 固定(Purification of proteins using polyhistidine' affinity tags. Bornhorst， Joshua A.; Falke， Joseph J. Methods in Enzymology (2000)， 326, 245-254)。作为CLEC的用途同样是可想到的(St. Clair, N.; Wang, Y,F.; Margolin, A丄.(2000), Cofactor-bound cross-linked enzyme crystals (CLEC) of dehydrogenase, Angew. Chem. Int. Ed. 39, 380-383)。这些措施也适用于产生在水和有机溶剂的混合物、或在完全的有机介 质中表现出催化活性的多肽，由于这些多肽被有机溶剂破坏稳定性。通过本发明方法制备对映异构体富集的l，l，l-三氟异丙醇，包括优选地 首先在优选含水溶剂中溶解相应于所需最终产物(l，l，l-三氟丙酮)的酮类， 任选地向该溶液中加入生物催化剂所需的所有添加剂并使其稳定，在合适 时调节pH，将生物催化剂加到溶液中，从而进行酮类还原，形成所需的(i )-或CS)-对映异构体富集的l,U-三氟异丙醇。在特别优选的实施方案中，l，l，l-三氟丙酮直接溶解在适于生物催化剂 的细胞介质中(表达所需酶)，加入生物催化剂和任选的酶所需的辅因子，并 在生物催化剂稳定并且酶对于所催化的各反应显示高活性的温度下进行获 得所需对映异构体的催化转化。然而，可选择地，各成分的加入顺序也可以根据需要变化。因此，更优选的实施方案包括在加入l,U-三氟丙酮之前加入生物催化剂。"对映异构体富集的"或"富集对映异构体的"或"主要包括一种对映异构体"是指在混合物的相关光学对映体中存在>50%的一种对映异构体。l,U-三氟丙酮、OS)-U，l-三氟异丙醇和(及)-l，l,l-三氟异丙醇的结构如下所示l,l，l-三氟丙酮0 叉 F3C CH3OS)-u，i-三氟异丙醇OH(i )-l,l,l-三氟异丙醇 QH3C CH33C CH3本文所引用的出版物被视为包含于本公开内容中。 实施例实施例1:将由I,l,l-三氟丙酮(IO mM底物浓度)、辅因子(IO mM辅因子浓度； NADPH或NADH，取决于所用酶的优选辅因子)和特定醇脱氢酶的酶溶液 (通过珠磨200 mg湿的生物质(E co//， DSM 14459)从标准细胞破坏制备， 包括在0.8 ml缓冲溶液中以过表达形式的醇脱氢酶)构成的反应溶液(2 ml) 在30'C的反应温度下搅拌24小时。24小时后，检査反应混合物是否形成 所需产物(5>或(/0-1，1，1-三氟异丙醇。结果示于下表。表l: 1,1,1-三氟丙酮的对映选择性还原实验号酶3)反应时间[hj转化[%]ee [%]。)1RE-ADH2494>99(。2AP-ADH244>99 OS)3LK-ADH248090 (A)a) RE-ADH =源于红串红球菌的醇脱氢酶，参见尤其是PC17EP2005/06215; AP-ADH =源于石蜡节杆菌的醇脱氢酶，参见尤其是WO 2005103239: LK-ADH=源 于高加索酸奶乳杆菌的醇脱氢酶，参见尤其是PCT/EP2005/06215; b)在每种情况下， 括号中表示优先形成的对映异构体。实施例2:在lOOmM的底物浓度下，通过全细胞方法将l，l，l-三氟丙酮制备性生物催化还原以形成OS)-l,l,l-三氟异丙醇(对于全细胞催化剂和方法原理，也 参见PCT/EP/2005/06215):在Titrino反应容器中制备反应混合物(总体积 50 ml)，包括磷酸盐缓冲液(调节至pH 6.5)、 ￡.co// DSM14459型的GS)-对映 选择性全细胞催化剂(包括尺eo^ra/ o/z^的(5)-醇脱氢酶和^c"^ ra6"fe 的葡萄糖脱氢酶，按专利申请PCT/EP2005/06215制备；量1.5 g，相当于细胞浓度 30g湿的生物质/1)、 D-葡萄糖(量1.486 g，相当于按所用酮类的 摩尔量计为1.5当量)和三氟丙酮(量560.3 mg， 5 mmol，相当于底物浓度 100 mM)。然后，将反应混合物在室温下搅拌反应时间24小时，通过加入 氢氧化钠溶液(lMNaOH)，使pH保持在 6.5。然后，离心除去生物质，对 得到的滤液进行"F-NMR谱分析，测定转化率。在这种情况下转化率>95%。
权利要求
1. 主要包括一种对映异构体的1，1，1-三氟异丙醇的制备方法，其通过使用醇脱氢酶使1，1，1-三氟丙酮对映选择性地还原而制备，其特征在于，形成对映异构体过量＞90％ee的1，1，1-三氟异丙醇的所需对映异构体。
2、 如权利要求1所述的方法，其特征在于，形成对映异构体过量>95% ee，特别是>99% ee的1,1,1-三氟异丙醇的所需的对映异构体。
3、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，所述方法中使用 的醇脱氢酶源于选自以下的生物体高加索酸奶乳杆菌(kc励^/^ 胶红类酵母菌(i /706foro7w/o: g/w /"&)、广布肉杆菌(Car"o6(7cfe7"'Mm ^Vergera)、 野生f连球菌CSV,'eptococc^/e,-w力、浮游芽生杆菌CS/aWo6""e/' watotorzi")、锁 我P酉孝母菌CS; on.(i/oZ o/1^ sa/mom.co/o/')、尸/c/n'a /2a_p/op/7//a、 /Vc/z/a ; a^07'&、 马克思克鲁维酵母(^/M_yve/'ow_yc& warx/朋^)、卡氏毕赤酵母(尸^/ / ca,^om7)、酉良酒酉孝母(Sacc/7arow7c&y ce厂ev^/ae)禾口红串红球菌(i /20fifococcM1
4、 如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，使用细菌醇脱氢酶。
5、 如权利要求3或4所述的方法，其特征在于，使用源于红串红球菌(A/20doCOCCl e/7^Zrap0fc)的细菌醇脱氢酶。
6、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，使用偶联酶体系使所述酮发生转化。
7、 如权利要求6所述的方法，其中所述偶联酶体系包括醇脱氢酶和使 所述醇脱氢酶的辅因子再生的酶。
8、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，用于使所述酮转化的初始底物浓度〉50g/1，优选M00g/1，特别优选〉150g/1。
9、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，所述转化在-15~100 °C、优选10 6(TC、特别优选20 4(TC的温度下进行。
10、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，所述转化在5~11 、 优选5.5-10、特别优选6~9的pH下进行。
11、 如前述权利要求任一项所述的方法，其特征在于，在所述方法中 使用至少一种微生物，所述微生物能够同时表达醇脱氢酶和使辅因子再生 的酶。
全文摘要
本发明涉及主要包括一种对映异构体的1，1，1-三氟异丙醇的制备方法。具体地说，本发明涉及一种通过1，1，1-三氟丙酮的对映选择性的酶还原来制备其中特定的对映异构体占主要地位的1，1，1-三氟异丙醇的方法。
文档编号C12P7/02GK101305098SQ200680041700
公开日2008年11月12日 申请日期2006年10月10日 优先权日2005年11月11日
发明者H·格勒格尔, K·多德雷尔, O·迈 申请人:赢创德固赛有限责任公司