专利名称：一种脑蛋白水解物注射液制备方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域背景技术脑蛋白水解物注射液系健康猪脑经酶解制得的灭菌水溶液，每1ml中含游离氨基酸为28.08-42.14mg，含总氮(N)应为5.49-6.71mg，用于颅脑外伤，脑血管病后遗症伴有记忆减退及注意力集中障碍的症状改善。对脑功能不全有辅助改善作用，也用于蛋白质缺乏，神经衰弱病人以用对一般蛋白质消化吸收障碍的病例。
该品种最早由奥地利进口，后来国内陆续生产。其工艺过程文献报道很多，其过程大致为脱脂、水解、超滤、层析、调配氨基酸的过程。但在实践中我们按报道的工艺操作不能生产出合格产品，主要是标准〖检查〗项中其他物质大于15％，颜色尤其在储存过程中也达不到浅黄色澄明液体的要求。另外脱脂步骤需防爆车间，一方面增加了成本，一方面工艺中确实不需要。层析过程在实际中也不现实。
发明内容
本发明的过程是a、化冻清洗取符合质量标准的猪脑于投料前日从冷库中取出，室温化冻、用饮用水洗净血水及污物，除去皮膜，以注射用水洗二次。
b、匀浆将猪脑加入1.5倍新鲜注射用水，以细度3档用胶体磨绞碎，制成匀浆。
c、胃蛋白酶水解将匀浆置入蒸汽夹层锅内加热至85℃保持15分钟，然后降温。当温度为42±2℃，向匀浆中加入盐酸调节pH3.5左右，然后按猪脑重量3％加入胃蛋白酶，在42±2℃条件下水解6小时，分装于不锈钢桶中冷冻，次日冻透后取出室温慢化。
d、胰酶水解c步的上清液用NaOH溶液调pH至8.5左右，将胰酶加注射用水溶解，平均1g胰酶加水2ml，加入氯化钙至0.025N，室温或0-4℃活化1小时左右。将上述胰酶按猪脑重量的2％加入上清液中，于42±2℃水解4小时左右，水解液于100℃煮沸20分钟，冷水冷却即得上清液。
e、超滤及纳滤d步骤的上清液过一万分子量的超滤柱，得超滤液然后将上述超滤液用分子量300--1000道尔顿的纳滤器纳滤，滤出原体积的一半左右，得截留液或称纳滤截留液。再将纳滤截留液过一万分子量的超滤器一次。
f、将e步超滤液进行肽图及氨基酸测定，通过小样制备确定稀释倍数，补充各种氨基酸至标准中限，同时加入终体积千分之二以下的亚硫酸氢钠，加水补足体积，调节pH，检测溶液的折光率及含氮量g、上述溶液再过一万分子量超滤柱，除菌过滤，灌封、灭菌、灯检、检测即得脑蛋白水解物注射液。
本发明的优点是a、在胃蛋白酶水解后进行深冻，有利于制剂最终澄明度合格。
b、用分子量300-1000的纳滤柱纳滤，除去了其他物质，无机盐等，使制剂的折光率合格。
c、在过程中根据实际情况加入2‰以下的亚硫酸氢钠，保证了制剂及在有效期呈浅黄色，防止了有效成份的氧化。
d、做为一个完整的工艺过程，能生产出符合质量标准(国家药品标准WS-XG-025-2000)的合格产品。
具体实施实例一、取新鲜猪脑80kg，去筋膜，洗净后，加入1.5倍的注射用水，用胶体磨匀浆，置于夹层锅中，加热至85℃保持15分钟后冷却至42℃，用盐酸调节pH值3.5左右，加入胃蛋白酶2.4公斤搅匀，分装于不锈钢桶中，于42±2℃的水浴箱中水解6小时左右，取出放置于-20℃冷库中过夜冻透，次日取出室温自然化透，吸取上清。取1.6kg胰酶加水3.2kg溶解，加入7g氯化钙，搅匀于室温放置1小时，于42±2℃水解4小时。将上述水解液置于夹屋锅中加热至沸持续20分钟，迅速冷却，即得上清液。将上述上清液过1万分子量超滤柱超滤一次，得溶液约160kg，再经分子量300---1000的道尔顿的纳滤器纳滤，滤出体积80kg，保留截留液80kg，再经一万分子量超滤器超滤。取样测定各种氨基酸浓度及肽图，经小样实验，确定稀释2.4倍，按终体积每升加入0.85g亚硫酸氢钠，同时按浓度中限补足各种氨基酸，调节终体积为192升即可，过1万分子量超滤柱一次，调pH7.2，除菌过滤，灌封，105℃40分钟灭菌即得脑蛋白水解物注射液。
权利要求
1.一种脑蛋白水解物注射液制备工艺，其过程是a、清洗、匀浆取新鲜健康猪脑，洗净，以注射用水洗二次，加入1.5倍注射用水，用胶体磨匀浆。b、胃蛋白酶水解匀浆加热至85℃保持15分钟，降温至42±2℃用盐酸调节pH3.5左右，按猪脑重量3％加入胃蛋白酶，水解完毕后低温冷冻，冻透后室温慢化，吸取上清。c、上述上清液调pH至碱性，按猪脑重量2％加入用0.025N氯化钙活化60分钟的胰酶，水解，调pH中性，加热至沸，冷却，吸取上清过滤。d、上述清液过1万分子量超滤柱。e、上述超滤液过纳滤器，保留一定比例的截留液。f、检测，确定稀释倍数，并按浓度中线补足各种氨基酸。按终体积的千分之二(W/V)以下加入亚硫酸氢钠，同时调节折光率和氮含量。g、上述溶液过1万分子量超滤柱，灌封、灭菌、灯检、检测即得脑蛋白水解物注射液。其特征是a、胃蛋白酶水解后低温冷冻，冻透后室温化冻，吸上清，有利于最终产品澄明度合格。b、工艺中采用了纳滤技术，即分子量为300---1000道尔顿的过滤柱，除去了原料中的其他物质，及无机盐等，同时使制剂的折光率合格。c、原料中加入了亚硫酸氢钠，防止了生产及储存过程中成份的氧化，使〖性状〗项在有效期内为浅黄色澄明液体。d、主要为上述过程作为一个完整的工艺过程，能生产出完全合乎质量标准的脑蛋白水解物注射液。
全文摘要
脑蛋白水解物注射液系健康猪脑经酶解制成的灭菌制剂，内含约16种游离氨基酸并含少量肽，用于颅脑外伤，脑血管病后遗症伴有记忆减退及注意力集中障碍的症状改善。对脑功能不全有辅助改善作用，也用于蛋白质缺乏，神经衰弱病人以及对蛋白质消化吸收障碍的病例。本发明介绍了一种其制造方法，其过程为清洗、匀浆、热变、胃蛋白酶水解、深冻、化冻、胰酶水解、热变、超滤，300－1000分子量纳滤截留，再超滤，稀释补充氨基酸至中线，加入亚硫酸氢钠抗氧化，除菌过滤，灌封，灭菌。整个过程完整，简便且保证了折光率，性状合格，从而使产品合乎国家标准，尤其在储存过程中性状仍能保持浅黄色。
文档编号C12P21/02GK101019889SQ20071005542
公开日2007年8月22日 申请日期2007年3月16日 优先权日2007年3月16日
发明者石海 申请人:石海