专利名称：一种用两阶段培养法提高发酵生产透明质酸产量的方法
技术领域：
一种用两阶段培养法提高发酵生产透明质酸产量的方法，涉及培养方式的 组合在发酵过程优化应用方面的技术领域。
背景技术：
透明质酸是一种高分子量的粘多糖，其两种合成前体物质为葡萄糖醛酸和
N-乙酰氨基葡萄糖。透明质酸在医药、美容、保健食品等领域具有广泛的应用。 透明质酸可以从动物组织如鸡冠中提取，也可以通过微生物发酵法生产。由于 发酵法成本低、产品纯度高，微生物发酵法正逐步取代组织提取法。目前对微 生物发酵法生产透明质酸的研究主要集中于发酵条件的优化，如培养基的优化， 反应器的设计优化以及发酵模式的优化。对于透明质酸发酵而言，菌体生长和 透明质酸合成之间存在着对碳源和能量的竞争关系，因此，如何降低菌体生长 对透明质酸的合成的抑制作用，是提高发酵法生产透明质酸产量的关键。利用 两阶段培养方式提高透明质酸的产量，尚未见文献报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种用两阶段培养方式提高发酵生产透明质酸产量的 方法，利用本发明能显著提高透明质酸的产量。
本发明的技术方案 一种用两阶段培养法提高发酵生产透明质酸产量的方 法，在发酵第一阶段0-6h流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在l-2g/L， 在发酵第二阶段6-16 h培养，控制该发酵第二阶段培养的初始蔗糖浓度为30-50 g/L，用此两阶段培养法发酵生产工艺，透明质酸产量得到显著提高。其产量提 高到6-8g/L，而对照的产量为5.0g/L。
本发明的有益效果利用本发明能显著提高透明质酸产量。本发明所提供 的透明质酸发酵工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它多糖 的发酵法生产具有一定的指导和启迪意义。
具体实施例方式
对照实施例本发明所用的菌种为兽疫链球菌S^e; tococcw zoo印WeTO'cw WSH-24 (或记为H-24)(温琦、刘登如、陈坚、堵国成"添加表面活性剂促进 兽疫链球菌高产透明质酸"，《化工进展》2006， 25 (9)， 1089 1094;中国专 利200610098195.3已公开)，先转斜面在37 。C培养箱中培养12小时，然后进行 摇瓶发酵14小时，温度37'C，转速200rpm，最后在7L发酵罐中进行发酵16 小时，发酵条件为pH7.0，搅拌转速200rpm，通气速率l.Ovvm。发酵培养基为(g/L):蔗糖70;酵母粉25; MgS04'7H20: 2.0; Na2HP04: 6.3; K2S04: 7.0。透明质酸的分子量为130万，产量为5.0g/L。
实施例l:发酵罐发酵采用两阶段培养法，其余条件同对照实施例。在发酵 第一阶段(0-6h)流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在1.0g/L，在发酵第二 阶段(6-16h)进行第二阶段培养，控制该发酵第二阶段培养的初始蔗糖浓度为30 g/L。用此两阶段培养法发酵生产透明质酸，其产量提高到6.5 g/L。
实施例2:发酵罐发酵采用两阶段培养法，其余条件同对照实施例。在发酵 第一阶段(0-6h)流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在1.5g/L，在发酵第二 阶段(6-16h)进行第二阶段培养，控制该发酵第二阶段培养的初始庶糖浓度为40 g/L。用此两阶段培养法发酵生产透明质酸，其产量提高到7.2g/1。
实施例3:发酵罐发酵采用两阶段培养法，其余条件同对照实施例。在发酵 第一阶段(0-6h)流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在2.0g/L，在发酵第二 阶段(6-16h)进行第二阶段培养，控制该发酵第二阶段培养的初始蔗糖浓度为50 g/L。用此两阶段培养法发酵生产透明质酸，其产量提高到8.0 g/L。
权利要求
1.一种用两阶段培养法提高发酵生产透明质酸产量的方法，其特征是在发酵第一阶段0-6h流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在1-2g/L，在发酵第二阶段6-16h培养，控制该发酵第二阶段培养的初始蔗糖浓度为30-50g/L，用此两阶段培养法发酵生产工艺，透明质酸产量得到显著提高。
全文摘要
一种用两阶段培养法提高发酵法生产透明质酸产量的方法，属于培养方式的组合在发酵过程优化应用方面的技术领域。在发酵第一阶段(0-6h)流加碳源蔗糖，维持发酵罐中蔗糖的浓度在1-2g/L，在发酵第二阶段(6-16h)进行第二阶段培养，控制该发酵第二阶段培养的初始蔗糖浓度为30-50g/L。用此两阶段培养法发酵生产透明质酸，其产量提高到6-8g/L，而对照实施例的产量为5.0g/L。本发明所提供的透明质酸发酵工艺简单、高效，有着重要的工业应用价值，同时对其它多糖的发酵法生产具有一定的指导和启迪意义。
文档编号C12R1/46GK101294178SQ20081012339
公开日2008年10月29日 申请日期2008年5月26日 优先权日2008年5月26日
发明者龙 刘, 堵国成, 淼 王, 坚 陈 申请人:江南大学