改善肌肉功能和日常活动的营养组合物的制作方法

专利名称：改善肌肉功能和日常活动的营养组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种包括包含亮氨酸的蛋白质类(proteinaceous)物质和ω-3多不 饱和脂肪酸的组合物。本发明还涉及适于改善哺乳动物肌肉功能的组合物的用途。本发明还涉及适于改 善哺乳动物日常活动的组合物的用途。
背景技术：
身体成分、肌肉机能和日常活动是临床上高度相关的参数，因为肌肉功能和日常 活动是癌症患者生活质量的重要促成因素。此外，如身体组分和身体表现所反映的患者身 体状态的改善，可有助于它对于抗癌治疗的顺应性。例如，可以按照预定方案提供化疗剂 量，而不需要使之适合于患者的较低体重。恶病质是癌症最使人衰弱的方面之一，并与发病率和死亡率增大、生活质量降低、 对化疗的反应受损、对化疗诱导的毒性的敏感性增大、和手术后并发症的较高发病率关联。 癌症恶病质可以定义为非自主体重减轻，不仅消耗脂肪质量而且消耗瘦体质量(lean body mass)。除了质量减轻之外的症状是乏力、虚弱、水肿、免疫反应受损以及运动和智力功能下 降。已显示恶病质患者的静息能量消耗较高，其无法通过增加营养摄入量来满足，在许多情 况下甚至降低食物摄入量。因此，近45%的癌症患者失去多于10%的诊断前质量。该肿瘤 可以诱导蛋白质代谢的代谢变化，类似于在感染或损伤中发现的。这些变化的特点是净蛋 白质分解和肌肉中用以支持能量供应和合成葡萄糖异生的氨基酸的支链氨基酸(BCAA)的 氧化性增强。宿主蛋白质分解由该宿主产生的炎性介体部分刺激，但也受到该肿瘤的刺激， 通过释放蛋白水解诱导因子(PIF) (4)进行。而且，该肿瘤具有高的内在蛋白合成率并具有 胞内转运和分解代谢BCAA的能力。增强的能量需要和炎性分解代谢状态导致身体脂肪含量降低和肌肉质量更恶化。 因此，假定癌症患者的营养支持更应当针对抵消净体蛋白分解，而不是仅增加本身的热量 摄入。为了确立蛋白质合成和分解之间的新的积极平衡，应当将补充蛋白质与组分改变和 缓和分解代谢信号相结合。已说明高氨基酸供应对增强蛋白质合成是必不可少的。已知 BCAA和尤其是亮氨酸通过刺激蛋白质合成和抑制蛋白质分解而控制骨骼肌蛋白质代谢。在 败血症患者中经由TPN补充BCAA的预期热量和含氮控制实验，确实导致前白蛋白水平提 高，并且简化急性生理评分(LeGall-SAPS)分类高的患者组的总体死亡率减小。已报道，当 与等氮和等热量对照食物相比时，给带有肿瘤的大鼠补充添有3%亮氨酸的食物可降低瘦 体质量、腓肠肌质量和肌凝蛋白含量的减少。在带有肿瘤的妊娠大鼠中亮氨酸增强了蛋白 质合成的观察结果支持了这些数据，这可能是由泛素蛋白酶体体系的变化引起。两个临床 试验研究了在手术除去肿瘤之后口服BCAA补充，并报道住院日较短，在3个月时表现状态 较好，并且在1年时体重增加。也在存在肿瘤的情况下补充BCAA 经受化疗的患者接受口 服BCAA补充长达1年，使得总体发病率较低、营养状态得到改善和生活质量更好。具有抗 恶病质效果的其它营养物为ω-3多不饱和脂肪酸(PUFA)。其中测试《-3PUFA的临床试验中有大部分报道体重(BW)增加或维持；而在两个临床试验中未发现对BW降低的影响。但 是在后者中，补充期仅为2周和/或包括仅少量患者。EPA或鱼油补充对癌症患者的其它效 果为，净瘦组织增加、总静息能量消耗和身体活动水平增大、对TPN的需要降低和生活质量 的提高，以及甚至揭示幸存数提高。WO 2004/026294公开了营养组合物，其包含游离形式和/或盐形式的必需氨基 酸，而不是完整蛋白质，其用于改善蛋白质合成或控制肿瘤诱导的体重减轻，如癌症恶病 质。另外可存在完整蛋白质。然而，未以单一结合物的形式描述这种营养组合物，其包含 至少ISen^的蛋白质类物质，其中至少一部分是乳清蛋白，还包含12wt. %的亮氨酸以及 选自二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸和二十二碳五烯酸的组中的ω-3多 不饱和脂肪酸。示例的营养组合物包含酪蛋白酸盐(caseinate)作为蛋白质源。在WO 2004/026294的实例2中，得出结论对于刺激净肌蛋白合成，摄取游离必需氨基酸比摄取 相当量的完整蛋白质更有效。EP 1 774 973 Al公开了包含蛋白质类物质的组合物，以总蛋白质类物质为基准， 所述蛋白质类物质可提供至少和至少12wt%的亮氨酸，用于治疗胰岛素抗性。未给 出组合物例子。

发明内容
本发明的目的在于提供适于改善肌肉功能，优选导致哺乳动物日常活动得到改善 的组合物。特别地，本发明的目的在于提供用于此目的的营养组合物。现已发现，可以用包含蛋白质类物质的特定组合物治疗肌肉功能降低或有肌肉功 能降低风险的受试者。因此，本发明涉及乳清蛋白、亮氨酸，和至少一种选自二十碳五烯酸、二十二碳六 烯酸、二十碳四烯酸和二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸的结合物(组 合，combination)，其用于改善哺乳动物的肌肉功能。本发明进一步涉及乳清蛋白、亮氨酸，和至少一种选自二十碳五烯酸、二十二碳六 烯酸、二十碳四烯酸和二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸的结合物，其用 途选自改善日常活动、改善身体表现、提供用以延长预期寿命的更好的预后、改善对于抗癌 治疗的顺应性和改善生活质量的组。除此之外，这种用途还可以或独立地改善哺乳动物肌 肉功能。特别地，此种结合物(组合)可以是特定营养组合物的形式。因此，本发明特别地涉及一种营养组合物，其包含(a)至少ISen^的蛋白质类物质，所述蛋白质类物质包含乳清；(b)至少12wt%的亮氨酸，以总蛋白质类物质为基准；和(c)脂质部分(lipid fraction)，其包含选自二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、 二十碳四烯酸和二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸。特别地，此种组合物可以用于改善哺乳动物的肌肉功能。可替换地或另外地，该组合物可以特别地用于这种用途，即，选自改善日常活动、 改善身体表现、提供用以延长预期寿命的更好的预后、改善对于抗癌治疗的顺应性和改善 生活质量的组。
当提及包含乳清蛋白(或简称乳清)、亮氨酸，和至少一种所述ω-3多不饱和脂肪 酸的组合物用于特定目的时-如用于改善哺乳动物的肌肉功能-特别意指这些所述组分旨 在以组合形式用于此目的。因此，认为所述组分中的每一个都对完成此目的发挥着作用。化合物的能量值(en^ )是基于由化合物可消化部分(特别是在人体中)提供的 能量。特别地，该能量值是基于蛋白质类物质、脂质和可消化碳水化合物的贡献，利用下面 的计算系数可消化碳水化合物和蛋白质类物质为4kcal/g，脂质为9kcal/g。优选地，该组合物的感官特性是这样的，以便该服用(consumption) —般被赞赏 为愉快的。优选地，该组合物容易通过胃。优选地，在摄取该产品之后该组合物可消化组分变得容易获得。根据本发明的组合物可以特别用来改善哺乳动物骨骼肌功能。应理解，改善哺乳 动物骨骼肌功能可以包含改善肌肉质量依赖性的和肌肉质量非依赖性的肌肉功能丧失之 一或二者。对于肌肉质量依赖性的肌肉功能丧失，它可以包含骨骼肌最大力、最大收缩速度 或最大松弛速度中的校正。对于肌肉质量非依赖性的肌肉功能丧失，它可以包含经肌肉质 量校正的最大力、经肌肉质量校正的最大收缩速度或经肌肉质量校正的最大松弛速度中的 校正。此外，可以提高收缩或松弛所需的时间。在实施例中，本发明组合物可以用来预防或治疗由老化、疾病、障碍、药物或创伤， 优选药物、疾病或障碍引起或产生的肌肉功能降低。肌肉功能降低本身可特别表现为由诸如癌症、HIV感染、C0PD、肾功能衰竭、心力衰 竭的疾病或障碍，和以促炎性细胞因子的高血浆和/或血清水平为特点的疾病状态引起的 症状。因此，本发明组合物可特别用于治疗罹患选自癌症、HIV感染、C0PD、肾功能衰竭、心 力衰竭，和以促炎性细胞因子的高血浆和/或血清水平为特点的疾病状态的组中的疾病或 障碍的哺乳动物。优选地，该疾病或障碍是癌症。在本上下文中，肌肉功能降低可以是肌肉质量依赖 性的功能丧失或肌肉质量非依赖性的功能丧失。而且，用诸如化疗的药物治疗可能导致肌肉功能降低。所以，本发明也涉及根据本 发明的营养组合物，其中该药物在化疗体系(framework)中施用。基于如下面实例中示出的向带有肿瘤的小鼠供给根据本发明的组合物的实验，本 发明人考虑到，本发明组合物在改善哺乳动物肌肉功能中是有效的。该实验显示，与肌肉功 能降低关联的数个生理参数中至少一个被积极影响。进一步考虑到，本发明组合物可用来提供用以延长预期寿命的更好预后和/或更 好的生活质量。特别地，改善生活质量的因子为疲劳减少、日常活动改善、耐力更多、白天和 夜间活动(夜间睡眠)的对比提高、一般状况较好和心情压抑期较短。蛋白质类物质蛋白质类物质由从氨基酸形成的部分形成。如本文使用的术语氨基酸包括氨基酸 残基(例如，在肽中)。特别地，术语“蛋白质类物质”包括游离氨基酸、氨基酸盐、氨基酸 酯、结合到缀合(结合)分子和肽上的氨基酸残基，包括蛋白质。同样地，当提及具体氨基 酸，例如亮氨酸时，这是指包括作为盐存在的、结合形式的具体氨基酸(残基)，以及游离氨基酸。
肽是指两个或多个氨基酸经由一个或多个肽键连接(connected)的结合物。当并 入在肽中时，氨基酸称为氨基酸残基。肽包括寡肽和多肽，其包括蛋白质。多肽是指包含14个或更多氨基酸残基的肽链。寡肽是指包含2 13个氨基酸残 基的肽链。存在于本发明组合物中的手性氨基酸可以为L-型或D-型。通常，存在于本发明 组合物中的手性氨基酸为L-型。在实施例中，根据本发明的液体组合物包含至少7g/100ml蛋白质类物质，优选至 少8g/100ml，更优选至少9g/100ml，最优选至少10g/100ml。本发明组合物中的蛋白质类物质可提供至少18en%，优选至少20en%，更优选 至少22en%的总组合物。本发明组合物中的蛋白质类物质通常提供60en%或更少，优选 40en %或更少，或更优选32en %或更少的总组合物。该蛋白质类物质包含乳清蛋白。乳清蛋白尤其有利，因为与例如酪蛋白相比，它可 以使氨基酸餐后快速释放到血液中。因而，本发明人认识到打开肌蛋白合成的合成代谢信 号所需氨基酸的阈值浓度可以更容易达到(例如，在较低剂量的蛋白质类物质下，或摄取 后不久)。该蛋白类物质可以进一步包含来自一种或多种其它蛋白质来源的蛋白质类物质， 特别是选自酪蛋白、酪蛋白酸盐、大豆和小麦的组，优选酪蛋白的一种或多种蛋白质类物质 来源。所述蛋白质来源或其部分可以已被修饰，特别是通过(部分)水解修饰。乳清是指可从乳清中分离出的球蛋白的来源。特别地，球状乳清蛋白可以选自 乳球蛋白、α-乳白蛋白和血清白蛋白，包括其混合物。含有乳清蛋白的混合物实例为
乳清分离物和乳清浓缩物。两个来源都主要含有完整乳清蛋白，其优选在本申请的内容中。在实施例中，以总蛋白质类物质为基准，该蛋白质类物质包含至少10wt%，优选至 少15wt%，更优选至少20wt%，最优选至少25wt%的乳清。通常，以总蛋白质类物质为基 准，乳清部分为50wt. %或更少，特别地以总蛋白质类物质为基准，乳清部分为40wt%或更 少，但是-需要时-通过乳清可以提供多于50wt. %至100 %的蛋白质类物质。特别地，在液体组合物的情况下，以总蛋白质类物质为基准，变性乳清的浓度优选 不超过35wt%。这对于避免在储存期间胶凝化的风险是有利的。而且，相比游离氨基酸而 优选乳清，因为游离氨基酸具有不好的味道。乳清的存在可以提供许多优点。在释放氨基酸的速率和尤其同时使氨基酸可被身 体吸收方面，该乳清都显示出有利的释放行为。该有利的氨基酸释放行为可通过使该乳清蛋白的至少一部分(轻微)水解而进一 步增强，通常使多达20%的蛋白质水解成游离氨基酸，优选使多达10%的蛋白质水解成游
离氨基酸。为了所述增强效果，通常使50wt%或更少的乳清蛋白(轻微)水解，特别是10 50wt%。需要时，可从该水解产物中除去游离氨基酸或其部分。已知合适的技术有，例如过 滤、色谱或吸收。作为乳清蛋白(或多种乳清蛋白)的来源，优选挑选的乳清部分包含少于20wt% 的酪蛋白糖巨肽(GMP)，更优选少于10wt%。
β -乳球蛋白含量优选大于40wt%，更优选为46 80wt% .当用作完整蛋白质时，该酪蛋白优选包含高浓度的β-酪蛋白，特别是大于 36g/100g的酪蛋白，更特别是38 70g/100g的酪蛋白。在实施例中，该蛋白质类物质的至少一部分以游离氨基酸、其盐形式或作为带有 不同于蛋白质或肽的缀合(结合)分子的缀合(结合)物存在，该缀合物在十二指肠和/ 或回肠中的胆汁成分和/或胰腺分泌物的影响下，能够分裂成游离氨基酸(或其盐)和该 缀合化合物。在实施例中，以总蛋白质类物质为基准，此种形式，特别是盐形式或游离形式 的氨基酸的量多达15wt%，优选0. 5-Hwt%。以总蛋白质类物质为基准，肽含量(寡肽、多肽、蛋白质)通常为至少50wt%，至 少60wt %或至少75wt %。以总蛋白质类物质为基准，肽的wt %通常多达99wt %，优选多达 Mwt %，更优选 89wt%0肽含量高(彡50wt% )的组合物的优点是，服用(口服)时味道，或该组合物的另 外的感官特性通常被赞赏为较好。进一步地，身体更为渐进地吸收氨基酸。在特别的实施例中，该组合物包含亮氨酸，其为游离酸形式、盐形式、二肽形式，或 带有不同于氨基酸、蛋白质或肽的缀合化合物的缀合物形式，该缀合物能够分裂成游离氨 基酸(或其盐)，优选在肠或胃中或吸收在肠细胞(enterocytes)或肝脏中之后分裂。以总蛋白质类亮氨酸为基准，亮氨酸优选至少35wt%，更优选为至少40wt%，以 肽(寡肽、多肽、蛋白质)形式，优选以多肽和/或(完整)蛋白质形式存在。以总蛋白质类亮氨酸为基准，亮氨酸为多达100wt%，优选多达80wt%，以肽(寡 肽、多肽、蛋白质)形式，更优选以一种或多种多肽和/或一种或多种(完整)蛋白质形式 存在。以总蛋白质类物质为基准，本发明组合物中亮氨酸含量为至少12wt%，至少 13wt%，至少16wt%或至少19wt%。通常，该亮氨酸含量为50衬％或更小。特别地，以总蛋 白质类物质为基准，它可以是30wt %或更小，25wt %或更小，或者23wt %或更小。在实施例 中，以总蛋白质类物质为基准，该亮氨酸含量为12 23wt%。有利地，该组合物可以包含谷氨酰胺和/或谷氨酸。如果存在，则以总蛋白质类物质为基准，该谷氨酰胺含量(确定为总谷氨酰胺& 谷氨酸)为至少15wt%。在实施例中，以总蛋白质类物质为基准，该谷氨酰胺含量为16 28wt %，优选为 17 ^wt %。有利地，该组合物可以包含胱氨酸、半胱氨酸、和半胱氨酸等价物如N-乙酰基半 胱氨酸的组中的一种或多种。其量优选为至少0.8wt%，以总蛋白质类物质为基准。通常， 该胱氨酸、半胱氨酸、和半胱氨酸等价物的含量为或更小。特别地，其为8wt%或更 小，以总蛋白质类物质为基准。在实施例中，该胱氨酸、半胱氨酸、和半胱氨酸等价物的含量 为0. 8 8wt%，以总蛋白质类物质为基准。谷胱甘肽体内平衡在维持整个身体对氧化应激的抗性中发挥着作用。肌肉中严重 的氧化应激可以导致肌肉功能降低。在带有肿瘤的小鼠实验中，本发明人发现肝脏中谷胱 甘肽的水平显著降低。肝脏是谷胱甘肽的主要分配者(分布器)，所以肝脏谷胱甘肽可以 良好地反映整个身体的谷胱甘肽。出人意外地，本发明人的进一步实验揭示，在本发明组合 物中的谷氨酰胺和/或半胱氨酸的影响下，肝细胞中谷胱甘肽水平至少部分正常化。当该组合物中存在两种氨基酸时都获得特别好的结果。基于这些实验，本发明人考虑到，包含谷 氨酰胺或半胱氨酸，优选为如上所示浓度的本发明组合物对改善哺乳动物肌肉功能特别有 效。进一步考虑到，谷氨酰胺或半胱氨酸都存在于本发明组合物中对改善哺乳动物肌肉功 能甚至更有效。在实施例中，用包含乳清蛋白和酪蛋白的本发明组合物，获得谷氨酰胺和/或半 胱氨酸对哺乳动物肌肉功能的有利影响。在根据本发明的组合物中，亮氨酸/(缬氨酸+异亮氨酸)的重量比一般为1.0或 更大，优选为1.05或更大。在总产品中，必需的氨基酸的含量通常为由必需的氨基酸形成的总蛋白质类物质 的至少49wt %，优选49 80wt %，更优选52 70wt %。赖氨酸含量通常为7 15g/100g蛋白质类物质，优选7. 5 14g/100g蛋白质类 物质。用本发明组合物减少肌蛋白分解也有助于降低分解代谢肌肉失去肉碱 (carnitine)和/或赖氨酸，并有助于维持肌肉肉碱和赖氨酸水平。以这种方式，包含肉碱 的本发明组合物可以有助于骨骼肌功能。L-肉碱(β -乙酰氧基-Y-N，N, N-三甲基氨基 丁酸盐(酯))由主要在肝和肾中的必需氨基酸赖氨酸和蛋氨酸合成。肉碱是介质/长链 脂肪酸穿过线粒体膜所需要的，其然后可以进入β-氧化作用。另外，它使得容易从线粒体 中除去短链有机酸，由此使线粒体内辅酶-A自由参与β-氧化作用和克雷伯氏循环(三羧 酸循环，Krebscyscle)。由于这些关键功能，所以肉碱富集在使用脂肪酸作为主要饮食营养 料的组织中，如骨骼肌和心肌。肉碱缺乏已报道在几种癌症中，并与疲劳增加关联。三个开放性研究确实揭示用 肉碱的处理降低了疲劳，该疲劳是用疲劳评分测量的。尤其是一种肉碱衍生物，酸溶性酰基 肉碱，其在癌症患者中相比健康对照中似乎减少。对于总肉碱，已报道在三个月治疗之后显 著减少，并似乎揭示化疗诱导了肉碱缺乏。肉碱缺乏发病的另一种解释可能是，肉碱水平的 降低与恶病质的存在关联。总之，化疗和疾病(恶病质)的进展似乎都诱导了肉碱缺乏。 这些研究结果揭示，最好在诊断之后立即开始补充包含肉碱的本发明组合物以便预防(肉 碱)缺乏。如果存在，则本发明组合物中肉碱的含量通常为至少5mg/100kCal，优选至少 10mg/100kcal，至少25mg/100kcal，或至少100mg/100kcal。通常，该肉碱的含量为2. 5g或 更少/lOOkcal，特别是1. 25g或更少/lOOkcal。在液体产品的情况下，该肉碱的含量优选 为至少10mg/100ml，至少50mg/100ml，或至少200mg/100ml。通常，该肉碱的含量为5g或更 少/100ml，特别是2. 5g或更少/100ml。心肌和骨骼肌中最丰富的游离氨基酸是牛磺酸(Taurine)，它随着肌肉质量的减 少而从该肌肉中分泌出。牛磺酸被认为在肌肉的离子运动和钙处理中发挥着重要作用，所 以可以影响肌肉表现。牛磺酸耗竭导致心肌细胞萎缩、线粒体和肌纤维损伤和心功能不全、 与牛磺酸作用相关的可能影响。利用本发明组合物减少肌蛋白分解也有助于降低分解代谢 肌肉失去牛磺酸，有助于维持肌肉牛磺酸水平并以这种方式维持肌肉功能。如果存在，则本发明组合物中牛磺酸的含量通常为至少5mg/100kCal，优选至少 10mg/100kcal，至少25mg/100kcal，或至少100mg/100kcal。通常，该牛磺酸的含量为2. 5g或更少/lOOkcal，特别是1. 25g或更少/lOOkcal。在液体产品的情况下，该牛磺酸的含量 优选为至少10mg/100ml，至少50mg/100ml，或至少200mg/100ml。通常，该牛磺酸的含量为 5g或更少/100ml，特别是2. 5g或更少/100ml。脂质部分在本发明组合物中，该脂质部分通常提供至少lOen^，优选至少20en%，或更优 选至少25en%的总组合物。本发明组合物中的脂质部分通常提供50en%或更少，优选 40en %或更少，或更优选35en %或更少的总组合物。术语“脂质部分”是指包含一种或多种脂质的部分，包括脂肪酸、脂肪酸衍生物 (包括三甘油酯、二甘油酯和单甘油酯以及磷脂)和含有固醇的代谢物，如胆固醇。如上所指出的，本发明组合物包含至少一种ω-3多不饱和脂肪酸，其选自二十碳 五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳四烯酸(ETA)和二十二碳五烯酸(DPA)的组。本发明组合物可以进一步包含ω-3多不饱和脂肪酸和/或ω-6多不饱和脂肪 酸，特别是含有18 沈个碳原子的那些，例如，亚麻酸(LA)、α -亚麻酸(ALA)、γ -亚麻酸 (GLA)、双同型-Y -亚麻酸(DGLA)和花生四烯酸(AA)。为了获得对肌肉功能有利的影响，该ω-3不饱和脂肪酸含量通常为至少10wt%， 优选至少15wt%，以总脂质含量为基准。在进一步的实施例中，本发明组合物包含十八碳四烯酸(SDA)。含SDA的营养油被 报道为ω -3脂肪酸的食物来源，其对增加组织EPA和DPA浓度比目前含ALA的油更有效。 优选地，该组合物中的脂质部分包含多于0. 5wt%的SDA，更优选多于0. 6wt%的SDA，还更 优选多于1. 的SDA，以总脂质为基准。该最大量或多或少由所用的特定来源(海产油 (marine)类型)限制，但是含SDA量为2wt% 约5wt % (以后者油中的总脂质为基准)的 海产油可商购获得。优选地，该脂质部分中SDA量的范围在0. 5和5wt%之间，以总脂质为 基准。优选SDA量与二十二碳六烯酸(DHA)和/或亚油酸(LA)相比相对较高。这允许包 含低量氧化产物的美味产品的高效能和制造。在根据本发明的产品的有效实施例中，因此 SDA与DHA的重量比至少为0. 22，优选至少为0. 25，更优选至少为0. 30。特别地，本发明组合物可以是这种组合物，其中至少55wt%的脂质部分，优选甘油 三酯油，包含至少^t %的二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸中的一种或多种。在本发明组合物中，该脂质部分包含少于30wt%，优选少于22wt%的饱和脂肪 酸，以总脂质含量为基准。ω-3至ω-6多不饱和脂肪酸的比率可以在宽范围内选择，例如0. 2 10，或 0.4 3.0。特别地，ω-3至ω-6多不饱和脂肪酸的比率小于1.0，优选0.97或更小，更优 选0.95或更小。该比率优选较大为0.5或更大，更优选0.6或更大。特别地，优选该比率 为0. 5 0. 97，更优选0. 6 0. 95。碳水化合物部分在实施例中，本发明组合物包含可消化的碳水化合物部分，其提供至少20en%，优 选至少30en%或更优选至少38en%的总组合物。通常，本发明组合物中的可消化碳水化合物部分提供70en%或更少，优选60en% 或更少，更优选48en %的总组合物。术语“可消化的碳水化合物”部分是指包含一种或多种可消化碳水化合物的部分。
可消化的碳水化合物包括麦芽右旋糖(maltodextrose)、麦芽糖和葡萄糖。特别 地，根据Enquist方法，在多于90%的碳水化合物在20分钟内快速消化的情况下，则认为该 碳水化合物是可消化的。尤其，挑选该碳水化合物的组成，从而获得有利的碳水化合物吸收，以及因此在吸 收之后获得期望的胰岛素释放。因此，特别地，满足关于碳水化合物含量的下列标准中的一 个或多个的组合物被认为是有利的。在实施例中，少于75wt%的碳水化合物由蔗糖和麦芽糊精(maltodextrin)含量 之和构成。在实施例中，以碳水化合物的总重量为基准，至少40wt%的碳水化合物由可缓慢 消化的碳水化合物，即，特别是比麦芽右旋糖、麦芽糖和葡萄糖消化慢的碳水化合物构成。在实施例中，以碳水化合物的总重量为基准，根据本发明的组合物包含少于 60wt%，优选20 50wt%的可快速消化的碳水化合物，特别是麦芽右旋糖、麦芽糖、葡萄糖 和至少同样快消化的其它碳水化合物。在实施例中，以碳水化合物的总重量为基准，多于20wt%由至少一种二糖构成，优 选22 60wt %。特别地，在此种实施例中，该二糖优先选自由蔗糖、海藻糖、帕拉金糖、乳糖 和其它低升胰岛素(血糖上升)的二糖组成，更优选来自海藻糖和帕拉金糖。在实施例中，存在不同于葡萄糖的至少一种单糖。优选地，所述单糖选自由半乳 糖、甘露糖和核糖组成的组。优选地，所述单糖(多种单糖)的总量为0.5 30wt%，更优 选为5 25wt%，以碳水化合物的总重量为基准。特别地，核糖的存在是有利的，优选与(内源性)叶酸结合，从而增加蛋白质的合 成。考虑了这两种化合物的结合物使得哺乳动物中鸟苷三磷酸的生产增加，导致蛋白质合 成经由刺激真核起始因子2B而增加，尤其是在营养不良的患者中。该叶酸可以下列形式中 的一种或多种提供游离叶酸、亚叶酸、甲酰化叶酸、甲基化叶酸，优选为还原形式或作为单 或聚谷氨酸缀合的衍生物。当存在时，该叶酸含量通常至少为95 μ g/100kcal碳水化合物， 优选110 400 μ g/100kcal碳水化合物，更优选125 300 μ g/100kcal碳水化合物。考虑了该组合物具有相对低的升胰岛素(血糖)指数对于改善哺乳动物肌肉功 能、改善日常活动、改善身体表现、提供用以延长预期寿命的更好预后、改善对抗癌治疗的 顺应性或对于改善生活质量是有利的。没有受理论束缚，考虑了具有低升胰岛素(血糖) 指数的根据本发明的结合物或组合物对于肌蛋白合成，和/或肌肉力是有利的，因为它有 助于肌肉的高胰岛素敏感性。高胰岛素敏感性被认为是有益的，因为它可以改善胰岛素对 肌肉合成的刺激作用(胰岛素刺激是打开肌肉合成信号的引发器)。因此，在特定实施例中，该组合物是具有低升胰岛素(血糖)指数的营养组合物。 特别地，认为该组合物的升胰岛素指数低于55，优选低于45是有利的。实际上，该血糖指数 在0以上，通常至少为1，特别是至少为5。关于怎样确定组合物升胰岛素(血糖)指数的 详细信息在本文下面的实例中给出。基于本文公开的信息和常见的一般知识，技术人员可以调配具有相对低升胰岛素 (血糖)的营养组合物。特别地，通过增加消化比葡萄糖慢的碳水化合物百分比或通过增加 相比葡萄糖可提供按重量计较少葡萄糖部分的碳水化合物，可降低组合物的升胰岛素(血 糖)指数(在其他方式的相同条件下)。消化比葡萄糖慢的碳水化合物的优选实例为异麦芽酮糖、果糖、半乳糖、乳糖、海藻糖。在那之后，加入脂肪和纤维可以减缓胃排空。而且， 纤维可以在肠中形成物理屏障，降低吸收速率。来自蛋白质的氨基酸可以增加胰岛素释放 (尤其是亮氨酸)，并从而增加细胞吸收的葡萄糖。所有这些机制都可以促成升胰岛素(血 糖)指数的降低。不可消化的碳水化合物部分在实施例中，本发明组合物包含不可消化的碳水化合物部分。在优选的实施例中，该不可消化的碳水化合物选自半乳寡糖和果寡糖的组。特别地，该半乳寡糖选自短链半乳寡糖、长链半乳寡糖，或其任何结合物的组。特别地，该果寡糖选自短链果寡糖、长链果寡糖含量，或其任何结合物的组。优选的组合物包含半乳寡糖和果寡糖。优选地，半乳寡糖与果寡糖的摩尔比范围为1 1 20 1，优选为5 1 12 1，最优选等于约9 1。寡糖是指包含2 25个糖残基的链。长链寡糖是指包含10 25个糖残基的寡糖链。短链寡糖是指包含2 9个糖残 基的寡糖链，例如2 5个残基或6 9个残基。不可消化的碳水化合物是在人体肠道中实质上仍未消化的碳水化合物。特别 地，如果在使用标准消化酶的分析环境中在20和120分钟内释放该糖少于10%，如通过 Enquist方法可确定的，则认为该碳水化合物是不可消化的。在特别的实施例中，该不可消化的碳水化合物选自聚合度(DP)在2和50之间的 半乳甘露聚糖、DP为2 60的木聚醣、具有多于30wt%半乳糖醛酸或葡萄糖醛酸部分的分 子量为520 2200道尔顿的寡聚体，及其任何结合物的组。在实施例中，该不可消化的碳水化合物含量至少为Iwt %，至少为2wt%或至少为 3wt%，以总干物质为基准。在实施例中，该不可消化的碳水化合物含量为1 15wt%，优选 2 12wt%，更优选3 IOwt %，以总干物质为基准。在本发明的特定实施例中，根据本发明的组合物可以包含如W02005/039597(N. V. Nutricia)中公开的中性和酸性寡糖的混合物，该专利申请以引用的形式整体地合并在 此。更特别地，该酸性寡糖的聚合度(DP)在2和5000之间，优选在2和1000之间，更优选 在2和250之间，甚至更优选在2和50之间，最优选在2和10之间。如果使用聚合度不同 的酸性寡糖混合物，则该酸性寡糖混合物的平均DP优选在2和1000之间，更优选在3和 250之间，甚至更优选在3和50之间。该酸性寡糖可以是均质碳水化合物或异质碳水化合 物。该酸性寡糖可以由果胶、果胶酸盐(pectate)、藻蛋白酸盐、软骨素、透明质酸、肝素、乙 酰肝素(h印arane)、细菌碳水化合物、唾液酸聚糖(sialoglycans)、岩藻聚糖、岩藻寡糖或 角叉菜胶制备，并优选由果胶或藻蛋白酸盐制备。该酸性寡糖可以通过W001/60378中描述 的方法制备，该申请以引用的方式合并在此。该酸性寡糖优选由高度甲氧基化果胶制备，该 高度甲氧基化果胶的特点是甲氧基化度超过50%。如本文使用的，“甲氧基化度”(也称为 DE或“酯化度”)指的是该聚半乳糖醛酸链中包含的游离羧酸基团已被酯化(例如，通过甲 基化)的程度。该酸性寡糖的特点优选为，甲氧基化度超过20%，优选超过50%，甚至更优 选超过70 %。优选地，该酸性寡糖的甲基化度超过20 %，优选超过50 %，甚至更优选超过 70 %。优选施用该酸性寡糖，每天施用的量在IOmg和IOOg之间，优选在IOOmg和50g之间，甚至更优选在0.5和20g之间。如用在本发明中的术语中性寡糖指的是这种糖类，其单糖单元聚合度超过2，更优 选超过3，甚至更优选超过4，最优选超过10，其通过人体上消化道(小肠和胃)中存在的酸 或消化酶的作用在肠道中不被消化或仅部分被消化，但是通过人肠道菌群而发酵并优选不 含酸性基团。该中性寡糖在结构上(化学上)不同于该酸性寡糖。如用在本发明中的术语 中性寡糖指的是这种糖，其寡糖聚合度低于60个单糖单元，优选低于40个，甚至更优选低 于20个，最优选低于10个。术语单糖单元指的是具有闭合环结构的单元，优选己糖，例如吡 喃糖或呋喃糖形式。该中性寡糖优选包含至少90%，更优选至少95 %单糖单元，其选自甘 露糖、阿拉伯糖(arabinose)、果糖、岩藻糖(fucose)、鼠李糖(rhamnose)、半乳糖、β -D-吡 喃半乳糖、核糖、葡萄糖、木糖及其衍生物组成的组，以其中包含的单糖单元总数计算。合 适的中性寡糖优选通过肠道菌群发酵。优选地，该寡糖选自由以下物质组成的组，即，纤维 二糖(4-0- β -D-吡喃葡萄糖-D-葡萄糖)、纤维糊精((4-0- β -D-吡喃葡萄糖)n-D-葡萄 糖)、B_环糊精(α -1-4-键接D-葡萄糖环状分子；α -环糊精-六聚体、β -环糊精-七聚 体和Y-环糊精-八聚体)、不可消化的糊精、龙胆寡糖(β-1-6键接葡萄糖残基、一些1-4 键接物的混合物)、葡糖寡糖(α -D-葡萄糖的混合物)、异麦芽寡糖(线性α -1-6键接葡 萄糖残基，具有一些1-4键接物)、异麦芽糖(6-0- α -D-吡喃葡萄糖-D-葡萄糖)；异麦芽 三糖(6-0- α -D-吡喃葡萄糖-(1-6) - α -D-吡喃葡萄糖-D-葡萄糖)、潘糖(6_0_ α -D-吡 喃葡萄糖-(1-6) - α -D-吡喃葡萄糖基-(1-4) -D-葡萄糖)、明串珠菌二糖(5_0_ α -D-吡 喃葡萄糖基-D-吡喃果糖苷)、帕拉金糖或异麦芽酮糖(isomaltulose) (6-0- α -D-吡 喃葡萄糖基-D-果糖)、theanderose (0-α -D-吡喃葡萄糖基-(1-6) _0_ α -D-吡喃葡萄 糖-(l-2)-B-D-呋喃果糖苷)、D-塔格糖、D-来苏-己糖酮、乳蔗糖(0-β -D-吡喃半乳糖 基-(1-4)-0-α -D-吡喃葡糖基-(1-2)-β -D-呋喃果糖苷)、包括棉子糖、木苏糖和其它 大豆寡糖的α-半乳寡糖(0-α-D-吡喃半乳糖基-(1-6)-a-D-吡喃葡萄糖-β-D-呋喃 果糖苷)、β -半乳寡糖或反式半乳寡糖(β-D-吡喃半乳糖基-(1-6)-D-吡喃葡萄糖 基]η-(1-4) α -D葡萄糖)、乳果糖(4_0_β -D-吡喃半乳糖基-D-果糖)、4’ -半乳糖基乳 糖(0-D-吡喃半乳糖基-(1-4)-0-β -D-吡喃葡萄糖基_(l-4)-D-吡喃葡萄糖)、合成的 半乳寡糖(新半乳二糖、异半乳二糖、galsucrose、异乳糖I、II和III)、左聚糖型果聚糖 (β -D-(2-6)-呋喃果糖基)ηα -D-吡喃葡萄苷、菊粉型果聚糖(β -D-(O — 1)-呋喃果 糖基)η α -D-吡喃葡萄苷)、If- β -呋喃果糖基霉菌赤蘚醛糖(β -D- (O — 1)-呋喃果糖 基)n B-D-呋喃果糖苷)、木寡糖(B-D-((l —4)-木糖)n、lafin0Se、乳蔗糖和阿拉伯寡糖。根据进一步优选的实施例，该中性寡糖选自由果聚糖、果寡糖、不可消化糊精、半 乳寡糖(包括反式半乳寡糖)、木寡糖(xylooligosaccharide)、阿拉伯树胶寡糖、葡萄寡 糖、甘露寡糖、果寡糖及其混合物组成的组。更优选地，该中性寡糖选自由果寡糖、半乳寡糖 和反式半乳寡糖组成的组。合适的寡糖及其生产方法进一步描述在Laere K. J. M. (Laere, K. J. M.， Degradation of structurally different non-digestible oligosaccharides by intestinal bacteria :glycosylhydrolases of Bi.adolescentis. PhD-thesis(2000), Wageningen Agricultural University, Wageningen, The Netherlands)中，该文献的 完整内容以引用的方式合并在此。反式半乳寡糖(TOS)例如以VivinalTM(B0rcUl0 DomoIngredients,Netherlands)为商标出售。可通过热解玉米淀粉生产的不可消化糊精包含如 天然淀粉中存在的α (1 — 4)和α (1 — 6)糖苷键，并包含1 — 2和1 — 3键接物和左旋葡 聚糖。由于这些结构特点，不可消化糊精包含形成良好的并通过人消化酶而部分水解的支 颗粒(branched particle)。许多其它不可消化寡糖的商业来源容易获得，并为技术人员所 知。例如，反式半乳寡糖可从日本东京^kult Honsha公司获得。大豆寡糖可从Ajinomoto U. S. A. Inc.，Teaneck, N. J 分销的 Calpis 公司获得。在进一步优选的实施例中，根据本发明的组合物包含由果胶、藻蛋白酸盐及其混 合物制备的、DP在2和250之间的酸性寡糖，和中性寡糖，该中性寡糖选自由果聚糖、果寡 糖、不可消化糊精、包括反式半乳寡糖的半乳寡糖、木寡糖、阿拉伯树胶寡糖、葡萄寡糖、甘 露寡糖、果寡糖及其混合物组成的组。在进一步优选的实施例中，根据本发明的组合物包含两种化学上不同的中性寡 糖。发现，酸性寡糖与两种化学上不同的中性寡糖的联合施用可提供最佳的协同免疫刺激 作用。优选根据本发明的组合物包含如上定义的酸性寡糖；半乳糖类中性寡糖(其中多于50%的单糖单元是半乳糖单元)，优先选自由半乳 寡糖和反式半乳寡糖组成的组；和果糖和/或葡萄糖类中性寡糖(多于50%的单糖单元是果糖和/或葡萄糖，优选 果糖单元)，优选菊粉、果聚糖和/或果寡糖，更优选长链果寡糖(平均DP为10 60)。优选施用酸性和中性寡糖的混合物，每天施用的量在IOmg和IOOg之间，优选在 IOOmg和25g之间，甚至更优选在0. 5和20g之间。营养组合物营养组合物是指包含天然存在的组分，优选在食品供应中发现的组分的组合物， 其可作为补充剂、功能性食品或食品成分在柜台出售，即，无需医师或兽医开写处方。营养 组合物也可以是医疗食品，用于在医生或兽医的监管下通过饮食控制哺乳动物的疾病或病 况。根据本发明的组合物可以为液体形式，例如，饮料，半液体形式，例如酸奶或奶油 冻，凝胶形式，例如，果冻蛋糕，或固体形式，例如块糖或冰淇淋。在实施例中，液体组合物由浓缩物制备，例如由液体(例如，粘度小于约SOmPa. s)、半液体(例如，粘度大于约80mPa. s且小于约400mPa. s)、凝胶或固体制备。对于此种制 备方法，可用水稀释该浓缩物。特别地，在即将施用该组合物之前实施此种制备方法，例如， 即溶方式。本发明的一个具体实施例是中性组合物，其包含蛋白质类物质、脂质和可消化碳 水化合物，其中a)蛋白质类物质含量提供总组合物的18 60en%，特别是18 50en%，优选 20 40θη%，更优选22 32θη%，所述蛋白质类物质包含乳清；b)脂质含量提供总组合物的10 50en%，优选20 40en%，更优选25 35en% ；c)可消化碳水化合物含量提供总组合物的20 70en%，优选30 60en%，更优
15选 38 48en%。根据本发明的液体组合物的总能量值可在宽范围内选择，例如0. 2 4kcal/ml。 通常，它至少为0. 3kcal/ml，特别是至少为0. 8kcal/ml，更特别是至少为1. 2kcal/ml。通 常，它为3. Okcal/ml或更少，特别是2. 6kcal/ml或更少，更特别是2. 4kcal/ml或更少。在 具体实施例中，根据本发明的液体组合物的能量值范围为0. 3 3. Okcal/ml，优选0. 8
2.6kcal/ml，更优选 1. 2 2. 4kcal/ml。在另一个具体实施例中，根据本发明的液体组合物的能量值范围为0.2 1. Okcal/ml，优选 0. 4 0. 9kcal/ml。在确定期望的能量值中发挥着作用的因素包括一方面缓和获得较高en^的蛋白 质类物质，和另一方面缓和胃的快速排空(增大合成代谢反应)。根据本发明的半液体、凝胶或固体组合物的总能量值可在宽范围内选择，例如， 1 15kcal/g。通常，它至少为2.0kcal/g，优选至少为2. ^ical/g，甚至更优选至少为
3.2kcal/go通常，它为12kcal/g或更少，优选lOkcal/g或更少，甚至更优选8.0kcal/g或 更少。在具体实施例中，根据本发明的半液体、凝胶或固体组合物的能量值范围为3. 2 8.Okcal/g。另外的组分在实施例中，该组合物可以包含一种或多种其它另外的组分，如至少一种选自由 以下物质组成的组中的组分，即，矿物质、微量元素和维生素，优选选自由钠、钾、氯、氟、碘、 钙、磷、镁、维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K、维生素Bi、维生素B2、维生素B3、维生 素B5、维生素B6、叶酸、维生素B12、生物素、维生素C、硫辛酸(lipoic acid)、锌、铁、铜、锰、 钼、硒和铬组成的组。此种组分存在的浓度多达每日服用的每日建议剂量。锌优选存在的浓度至少为2. 8mg/100kcal碳水化合物，更优选5. 6 20mg/100kcal碳水化合物，甚至更优选6_15mg/100kcal碳水化合物。缓释制剂在优选的实施例中，根据本发明的组合物进一步包含在十二指肠和/或回肠中有 效释放氨基酸的缓释制剂，所述制剂包含至少一种选自由游离酸形式的氨基酸、盐形式的 氨基酸，和带有不同于蛋白质的缀合化合物的缀合物形式的氨基酸组成的组的组分，其中 该缀合物能够在十二指肠和/或回肠中的胆汁成分和/或胰腺分泌物影响下分裂成游离氨 基酸(或其盐)和该缀合化合物。缓释形式的氨基酸优选悬浮在液体、半液体或固体产品中。该缓释制剂可基于传统技术制备。该氨基酸(多种氨基酸)可以用PH敏感物质进 行包衣，该PH敏感物质在十二指肠/回肠中存在的pH(约pH 7)下溶解但在胃(强酸性) 中不溶解。此种包衣在本领域中一般是已知的。缀合分子的实例是与该氨基酸形成特定肽 的分子，其不被胃蛋白酶分裂或至少在生理条件下不被有效分裂。实例为胆碱、甜菜碱、二 甲基甘氨酸和肌氨酸。其它适合的缀合分子包括磷脂、溶血磷脂和甘油。优选存在于缓释制剂中的氨基酸优选选自亮氨酸和其它必需氨基酸，特别是蛋氨 酸、精氨酸、色氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸，其中亮氨酸是尤其优选的。在有利的实施例中，在给药方案中施用根据本发明的组合物。特别地，该组合物可以用作药物辅助剂，如选自由抗癌药物、抗逆转录病毒药物、抗高血压药物、抗血栓药物、抗 抑郁药物和抗糖尿病药物组成的组的药物。特别地，使用含有二甲双胍(metformin)或另 外的抗糖尿病药物的产品是有利的。特别地，这些药物被认为在根据本发明的组合物中是 稳定的并且非常有效。所述药物可以存在于根据本发明的组合物中或单独施用。本发明进一步涉及改善哺乳动物肌肉功能的方法，包含施用包含至少ISen^的蛋 白质类物质和脂质部分的营养组合物，其中在该蛋白质类物质中以总蛋白质类物质为基准 亮氨酸含量至少为9. 5wt %，该脂质部分包含至少一种选自二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳 六烯酸(DHA)、二十碳四烯酸(ETA)和二十二碳五烯酸(DPA)的组中的ω-3多不饱和脂肪 酸。本发明组合物可在医疗技术师的监管下施用，或可以自我监管。该组合物可以肠内或口服施用。该哺乳动物优选为人。本发明现以下列实例为基础进行说明。


图1 在不同的干预之后Α)胫前肌(muscle tibialis anterior)量和B)附睾脂 肪量的差异Con =接受对照食物A(AIN9!3)的小鼠，TB-con =接受对照食物A(AIN9!3)的带肿 瘤小鼠，hpr =高蛋白，leu =亮氨酸，fo =鱼油。数据为平均值士 SEM 与TB-con的显著 差异(ρ < 0. 02) (k = 5, α = 10%)(关于统计学的更多详细信息，参见材料和方法)。图2 骨骼肌功能力频率曲线(离体)。CON =接受对照食物B的小鼠，TB-CON =接受对照食物B的带肿瘤小鼠，TB-SNC = 接受特定营养结合物的带肿瘤小鼠。数据为平均值士 SEM;当p<0.05(k = 2，α = 10%) 时，数据与TB-CON有显著差异。A 最大收缩力(完整曲线彼此之间有显著差异，P < 0. 01)。B 最大收缩速度(完整曲线彼此之间有显著差异，P < 0. 01)。C.最大松弛速度(完整曲线彼此之间有显著差异，P < 0. 01)。D.CT90 从10 90%的最大力收缩所需的时间(对于83_176Hz范围，CON与 TB-CON有显著差异；对于83-lOOHz范围，TB-SNC与TB-CON有显著差异)。图3运动期间的骨骼肌功能(离体)。CON =接受对照食物B的小鼠，TB-CON =接受对照食物B的带肿瘤小鼠，TB-SNC =接受特定营养结合物的带肿瘤组。数据为平均值+/-SEM，当p<0.05，k = 2，α = 10% 时，数据与TB-CON有显著差异)A 最大收缩力(两个曲线都与TB-CON有显著差异直至重复70)。B 经肌肉质量校正的最大收缩力(在重复30-50时，CON与TB-CON有显著差异； TB-SNC与TB-CON没有显著差异)。C:最大收缩速度(两个曲线都与TB-CON有显著差异直至重复70)。D 经肌肉质量校正的最大收缩速度(对于前30次重复，CON与TB-CON有显著差 异(除了重复5 (p = 0. 06))；对于前10次重复，TB-SNC与TB-CON有显著差异)。
图4.总日常活动A 总日常活动为％所有组第2天的日常活动。观察到时间χ组显著的交互作用(P < 0. 01)。B 在黑暗中的总活动为％所有组第2天的日常活动。C:在光亮中的总活动为％所有组第2天的日常活动。A-C :*P < 0. 05vs. TB-COND 活动度图，单独地表示所有组于1-19天(垂直)在7_19h光亮期间(白色阴影 区)和在19- 黑暗期间(灰色阴影区)的日常活动的百分数。图5.结肠直肠癌患者中的肌蛋白合成。合成表示为接受特定营养结合物(SNC)或对照营养补充的IV阶段结肠直肠癌患 者的部分合成率。分数合成率在基线(基部)处和在补充之后测量。图6.接受特定营养结合物(SNC)或对照产品的患者的血浆葡萄糖水平。
具体实施例方式实施例实施例1材料和方法动物.在气温控制的场所(12:12黑暗-光亮周期，其中恒定室温为21 士 1°C ) 中，单独圈养 6-7 周龄的雄性 CD2F1 小鼠(BALB/c χ DBA/2, Harlan /Charles River the Netherlands) 0在适应环境一周之后，将小鼠分成重量匹配组(1)接受对照食物的对照 组，( 接受对照食物的带肿瘤组，和C3)接受实验食物的带肿瘤组。所给数据来源于几 个实验性试验的结合，该试验具有相同的动物特征和实验程序(除非另有说明)，并仅在使 用的实验食物方面不同。所有实验程序均被Animal Ethical Committee (DEC consult, Bilthoven, The Netherlands)批准并遵守良好的实验室动物护理原则。实验食物(类别A和B实验)。实验分成(A)设计用于测试加入到基础食物 (background diet) (AIN93-M)中并作为球粒供应的营养组分(加入高蛋白(hpr)、亮氨 酸(leu)、鱼油(fo))的单一物质或结合物的效果；(B)实验设计用于测试因产品技术原因 而作为生面团供应的复杂营养结合物的效果，该复杂营养结合物类似于表3中的组合物， 并包含在(A)中测试的所有单独组分，并在大量营养素(macronutrient)组分上不同于 AIN-93从而获得更人性化西方式食物。类别A实验中的AIN93-M对照食物每千克饲料含有126g蛋白质(100%酪蛋白)、 727g碳水化合物和 40g脂肪(100%豆油)(Research Diet Services, Wi jk bij Duurstede, the Netherlands) 0通过用蛋白质和亮氨酸(151g酪蛋白/kg和16g亮氨酸/kg饲料； TB+hpr+leu)、高蛋白和鱼油(151g酪蛋白/kg和22g鱼油/kg饲料；TB+hpr+fo)，或高蛋白 和亮氨酸及鱼油(151g酪蛋白/kg、15g亮氨酸/kg和22g鱼油/kg食物；TB吒pr+leu+fo) 部分代替碳水化合物和/或豆油，将这个类别的实验食物调节成对照食物。该22g鱼油含 有6. 9g EPA和3. Ig DHA，导致2. 2 1的比率。在类别B实验中，该对照食物与实验类别A中的对照食物等热量、等氮，并且每千 克饲料含有126g蛋白质(酪蛋白)、53g脂肪(玉米油)，和699g碳水化合物。该等热量实
18验食物(进一步称作特定营养组合物；SNC)每千克饲料含有210g蛋白质(其中68%酪蛋 白和32%乳清的189g完整蛋白，和21g游离亮氨酸)、53g脂肪(20. Ig玉米油、10. 2g菜籽 油，和22. 2g鱼油)、561g碳水化合物、18g半乳寡糖和2g果寡糖。肿瘤模型.用添加有5%胎牛血清和青霉素-链霉素的RPMI 1640体外培养鼠 科动物C46腺癌细胞。将肿瘤细胞在次融合状态下胰蛋白酶化，并在清洗之后，以2. 5X IO6 细胞.mL—1的浓度将其悬浮在Hanks’平衡盐溶液(HBSQ中。在全身麻醉(异氟烷/N20/02) 下，将肿瘤细胞(0.2mL中5 χ IO5细胞)皮下接种到小鼠右腹股沟侧翼中。对照(C)动物 接受含0. 2mL HBSS的假注射液。实验方案.在肿瘤细胞或HBSS接种之后，每周测量三次体重、食物摄入量和肿瘤 尺寸(长度和宽度)。仅在类别B实验中监测在家笼(home cage)中的日常活动。在所有 实验中，麻醉动物并在肿瘤接种之后的20天增重(weighted)。剖割骨骼肌(例如，胫前肌 (mTA)、月非肠肌(m. gastrocnemius) (mG)、伸耻长肌(m. Extensor Digitorum Longus) (mEDL) 和比目鱼肌(M. Soleus) (111 、该肿瘤、脾、肾、肝、附睾脂肪、胸腺、肺和心脏并称重。通过从 体重中减去肿瘤质量，计算出胴体质量。另外，在类别B实验中离体测试了肌肉功能。日常活动的评估.在20-天的研究期间，从第2天开始，利用活动传感器(双鉴 ^llJDUO 240, Visonic ；adapted by R. Visser, NIN, Amsterdam, The Netherlands) 3 续( 小时)监测身体活动，该活动传感器将红外模式中由动物移动引起的个体变化转化 成任意活动计数。传感器安装在家笼的上面，并经由输入口和界面连接到装配有数据收集 用MED-PC IV软件(MED associates, St. Albans, VT)的计算机。以每小时的计数表示活动 (都用于共M小时的周期，黑暗周期(活跃周期)和光亮周期(不活跃周期)。单独为每 只小鼠计算活动，并相对于其自身在第2天的总活动表示该活动，从而校正个体对传感器 敏感度的差异。取随后两天的活动平均值，从而抑制日至日的变化。为了确定整个实验中 活动模式的变化，将每小时和黑暗-光亮活动表示为总日常活动的百分数并转化成活动度 图。肌肉机能评估·如先前描述的(Gorselink，Μ.，Vaessen，S.F.，van der Flier, L. G. , Leenders, I. , Kegler, D. , Caldenhoven, Ε. , van der Beek, Ε. , and van Helvoort, A. Mass-dependent decline of skeletal muscle function in cancer cachexia. Muscle Nerve, 33 :691-693, 2006)，离体评估右侧EDL肌肉的收缩特性。简言之，让肌肉稳定在器 官浴(organ bath)中30分钟，在此之后确定最佳刺激电流和强度。然后确定力-频率特 性(10 167Hz，250ms)，并在补充器官缓冲液和5分钟的静止期之后，使肌肉经受运动方案 (83Hz，每1000ms 250ms)。这个方案表示可与正常日常活动获得相当的中等负荷。在所使 用的频率下，肌肉达到完全强直收缩。分析力-频率曲线的等张肌力(Isometric force) 信号，以确定最大和总力以及最大收缩和松弛速度。统计学.所有数据都表示为平均值士 SEM。采用SPSS 15.0 (SPSS Benelux, Gorinchem, the Netherlands)进行统计学分析。在实验A中，使用不同批次的动物，所以 对于所有参数，规定，如果组和实验之间没有交互作用(interaction)，则允许结合数据。利 用方差分析(ANOVA)和post-hoc LSD，在组之间比较在第20天的身体组分数据、肿瘤和器 官质量。在P值低于α/k时差异被认为是显著的；其中α = 10%并且k=比较量。对于 实验Α，ρ值必须低于0. 02 ；对于实验B，ρ值必须低于0. 05。通过重复测量AN0VA，分析关于在接种之后20天期间监测的食物摄入量、体重、日常活动，和肌肉功能数据。为了进一步 区分组之间的差异，计算了在该范围内与第一测量值的差或△。利用ANOVA和在组之间成 对比较用的post-hoc LSD，在组之间比较这些数据。对于骨骼肌功能，第20天的第一测量 数据在组之间是相似的，所以在每点分析ANOVA中进行进一步区分。在两个尾部ρ < 0. 05 时，差异被认为是显著的。结果单一或结合的营养组分对恶病质参数的影响。与对照小鼠(Con)相比，带肿瘤对 照小鼠(TB-con)在肿瘤接种后20天胴体和体重显著更低(表1A)。对于所测量的所有参 数，都没有组*实验交互作用。TB-con小鼠的体重减轻源于脂肪(例如，附睾脂肪)质量和 肌肉质量都减轻(图IA和B)。对于完整曲线，组之间不存在食物摄入量差异。当每天单 独分析时，在第20天，Con与TB-con有着显著差异。带肿瘤组当中彼此之间没有显著差异 (表1B)。相比TB-con，加入额外蛋白质和亮氨酸(TB^pr+leu)或鱼油(TB+fo)没有改变 体重(表1)。然而，相比TB-con，在额外蛋白质中加入鱼油(TB^pr+fo)或在额外蛋白质 和亮氨酸中加入鱼油(TB^pr+leu+fo)导致脂肪质量显著更高(图1B)。在该饮食中补充 所有-与高蛋白、亮氨酸和鱼油的结合物(TB^pr+leu+fo)导致体重和胴体重(表1A)，以 及肌肉(mTA)和脂肪(附睾)质量相比TB-con小鼠显著增加(图1)。发现，在鱼油的存在 下，对于mTA的肌肉质量，亮氨酸和高蛋白结合物具有加性效应。每个组分的添加逐步增加 肌肉质量(图1A)。表1 单个或结合的营养组分对体重成分和食物摄入量的影响。
权利要求
1.一种乳清蛋白、亮氨酸，和至少一种选自二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳四 烯酸和二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸的结合物，其用于改善哺乳动 物肌肉功能。
2.包含根据权利要求1所述的结合物的营养组合物，其用于改善哺乳动物肌肉功能， 所述结合物包含(a)至少ISen^的蛋白质类物质，所述蛋白质类物质包含乳清；(b)至少12wt%的亮氨酸，以总蛋白质类物质为基准；和(c)脂质部分，其包含至少一种选自二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸和 二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸。
3.根据权利要求1所述的结合物或根据权利要求2所述的营养组合物，其中所述肌肉 功能是骨骼肌功能。
4.根据权利要求3所述的结合物或营养组合物，其中改善骨骼肌功能包含改善肌肉质 量依赖性的肌肉功能丧失，特别是包含这样的校正的肌肉质量依赖性的肌肉功能丧失，所 述校正是骨骼肌的最大力、最大收缩速度或最大松弛速度中的校正。
5.根据权利要求3所述的结合物或营养组合物，其中改善骨骼肌功能包含改善肌肉 质量非依赖性的肌肉功能丧失，特别是包含这样的校正的肌肉质量非依赖性的肌肉功能丧 失，所述校正是经肌肉质量校正的最大力、经肌肉质量校正的最大收缩速度或经肌肉质量 校正的最大松弛速度中的校正。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的结合物或营养组合物，其中改善所述肌肉功能 涉及预防或治疗由老化、疾病、障碍、药物或创伤，优选药物、疾病或障碍引起或产生的肌肉 功能降低。
7.根据权利要求6所述的结合物或营养组合物，其中所述疾病或障碍选自癌症、HIV感 染、C0PD、肾功能衰竭、心力衰竭，和以促炎性细胞因子的高血浆和/或血清水平为特点的 疾病状态的组。
8.根据权利要求7所述的结合物或营养组合物，其中所述疾病或障碍是癌症。
9.根据权利要求6至8中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述药物在化疗体 系中施用。
10.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述结合物或营 养组合物是液体，其包含至少7g/100ml蛋白质类物质，优选至少8g/100ml，更优选至少 9g/100ml，最优选至少 10g/100ml。
11.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述蛋白质类物质 进一步包含至少一种蛋白质，其来自选自酪蛋白、酪蛋白酸盐，大豆和小麦的组中，优选酪 蛋白，的蛋白质来源。
12.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述蛋白质类物质 包含至少15wt%，优选至少25wt%的乳清，以总蛋白质类物质为基准。
13.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含亮氨酸，其为游离 酸、盐、二肽，或带有不同于氨基酸、蛋白质或肽的缀合化合物的缀合物形式，所述缀合物能 够分裂成游离氨基酸(或其盐)，优选在肠或胃中或吸收在肠细胞或肝脏中之后分裂。
14.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含12 23wt%的亮氨酸，以总蛋白质类物质为基准。
15.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含16 的谷氨 酰胺，优选为17 ^wt%，以总蛋白质类物质为基准。
16.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含至少0.7wt%的胱 氨酸、半胱氨酸、和半胱氨酸等价物的组中的一种或多种，优选0. 8 8wt%，以总蛋白质类 物质为基准。
17.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含肉碱。
18.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含牛磺酸。
19.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含至少15wt%的ω-3 多不饱和脂肪酸，以总脂质含量为基准。
20.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中至少55wt%的脂质 部分，优选制造所述组合物使用的甘油三酯油，包含至少^t %的二十碳五烯酸和二十二碳 六烯酸中的一种或多种。
21.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述脂质部分包含 少于30wt%，优选少于22wt%的饱和脂肪酸，以总脂质含量为基准。
22.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述脂质部分进一 步包含至少一种ω-6多不饱和脂肪酸，并且其中ω-3多不饱和脂肪酸与ω-6多不饱和脂 肪酸的摩尔比率小于1. 0，优选为0. 5 0. 97，更优选为0. 6 0. 95。
23.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，进一步包含不可消化的 碳水化合物部分，其选自半乳寡糖和果寡糖的组。
24.根据前述权利要求23所述的结合物或营养组合物，其中所述半乳寡糖与果寡糖的 摩尔比范围为1 1至20 1，优选为5 1至12 1，最优选等于约9 1。
25.根据前述权利要求23所述的结合物或营养组合物，其中所述不可消化的碳水化合 物选自聚合度(DP)在2和50之间的半乳甘露聚糖、DP为2 60的木聚醣、具有多于30wt% 的半乳糖醛酸或葡萄糖醛酸部分的分子量为520 2200道尔顿的寡聚体，及其任何结合的 组。
26.根据前述权利要求23至25中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述不可消 化的碳水化合物含量为1 15wt%，优选2 12wt%，更优选3 10wt%，以总干物质为基准。
27.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，包含蛋白质类物质、脂质 和可消化碳水化合物，其中a)所述蛋白质类物质含量提供总组合物的18 60en%，优选20 40en%，更优选 22 32en%，所述蛋白质类物质包含乳清；b)所述脂质含量提供总组合物的10 50θη%，优选20 40θη%，更优选25 35en% ；c)所述可消化碳水化合物含量提供总组合物的20 70en%，优选30 60en%，更优 选 38 48en%。
28.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物液体营养组合物，其能量 值范围为 0. 3 3. Okcal/ml，优选 0. 8 2. 6kcal/ml，更优选 1. 2 2. 4kcal/ml。
29.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述结合物或营养 组合物是液体，其能量值范围为0. 2 1. Okcal/ml，优选0. 4 0. 9kcal/mL·
30.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其中所述结合物或营养 组合物是半液体、凝胶或固体，其能量值范围为3. 2 8. Okcal/g
31.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，进一步包含至少一种选 自由以下物质组成的组中的组分，矿物质、微量元素和维生素，优先选自由钠、钾、氯、氟、 碘、钙、磷、镁、维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K、维生素Bi、维生素B2、维生素B3、维 生素B5、维生素B6、叶酸、维生素B12、生物素、维生素C、硫辛酸、锌、铁、铜、锰、钼、硒和铬组 成的组。
32.根据前述权利要求中任一项所述的结合物或营养组合物，其具有另外的用途，所述 用途选自改善日常活动、改善身体表现、提供用以延长预期寿命的更好的预后、改善对于抗 癌治疗的顺应性和改善生活质量的组。
全文摘要
本发明涉及营养组合物，其包含(a)至少18en％的蛋白质类物质，所述蛋白质类物质包含乳清；(b)至少12wt％的亮氨酸，以总蛋白质类物质为基准；和(c)脂质部分，其包含至少一种选自二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳四烯酸和二十二碳五烯酸的组中的至少ω-3多不饱和脂肪酸，用于改善哺乳动物肌肉功能、改善日常活动、改善身体表现、提供用以延长预期寿命的更好的预后、改善对于抗癌治疗的顺应性和改善生活质量。
文档编号A23L1/305GK102143693SQ200980134296
公开日2011年8月3日 申请日期2009年7月2日 优先权日2008年7月2日
发明者克拉斯克·范诺伦, 罗伯特·约翰·约瑟夫·哈格曼, 赫尔福尔特 阿德里安乌斯·拉姆贝图斯·贝特霍尔德斯·范, 阿简·保罗·福斯, 霍伊塞·法贝尔 申请人:N.V.努特里西阿公司