专利名称：一种鉴定奶牛乳房炎抗性相关的分子标记检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明属于检测试剂盒领域，具体涉及一种奶牛早期乳房炎抗性筛选的分子鉴定 试齐U盒。
背景技术：
乳房炎是奶牛最常见的疾病之一，在世界范围内造成了巨大的经济损失。研究 者正试图通过遗传育种和生物技术手段来预防和控制乳房炎。奶牛乳房炎表型性状主要 有临床乳房炎(Clinical Mastitis, 00、体细胞评分(Somatic Cell Score, SCS)和奶 的导电率(Milk Conductivity, MC)等。本研究通过聚合酶链式反应-单链构象多态性 (PCR-SSCP)技术，对TZS基因的突变位点产生的不同基因型与奶牛奶牛群改良计划(DHI) 数据进行分析，筛选出对奶牛乳房炎有抗性的个体。
发明内容
为解决当前奶牛乳房炎抗性早期筛选的难题，本分子检测试剂盒依据分子遗传学 研究结果，针对TZS基因特异性突变位点，设计了特异性引物，采用PCR-SSCP技术对样品进 行检测与基因型鉴定。本发明所说的鉴定奶牛乳房炎抗性相关的分子标记检测试剂盒，包括一对特异性 引物和PCR-SSCP试剂，所说的特异性引物是
F: 5’ - ACTTGTGTGGGTCTGGTGTAG -3，(SEQ ID NO. 1)， R:5，- AAACCAAGGCGCAGTTCAACAGGCACT -3，( SEQ ID NO. 2)。本分子标记试剂盒包含已设计合成的1对特异性引物，以及与PCR-SSCP技术相关 所有试剂。操作时采用PCR-SSCP技术，根据相应的反应条件对采集样品的DNA进行检测， 利用PCR-SSCP的不同带型进行基因型鉴定。根据既定的基因型与SCS的显著相关性来预 测样品牛的乳房炎抗性状况。KK基因型作为本研究的乳房炎抗性基因型。如果考虑选育乳 房炎抗性牛群，应选留KK基因型。本试剂盒可用于奶牛乳房炎抗性的早期筛选，经600余头奶牛的初步试用，奶牛 基因型与SCS水平吻合率高达86%以上。自血样送检起2日内可获得结果，每10份样品检 测成本仅需200元，若大批量检测，成本更低。推广后可以减少因乳房炎引起的经济损失 1500元/头以上，有着巨大的市场推广价值。
图1 IL8基因的扩增片段的SSCP电泳图谱。图2突变位点的测序结果。
具体实施例方式本分子检测试剂盒包含有已设计合成的1对特异性引物(F: 5’ -
权利要求
一种鉴定奶牛乳房炎抗性相关的分子标记检测试剂盒，包括特异性引物和PCR SSCP试剂，其特征在于，所说的特异性引物是F: 5’ ACTTGTGTGGGTCTGGTGTAG 3’, R:5’ AAACCAAGGCGCAGTTCAACAGGCACT 3’。
全文摘要
本发明属于检测试剂盒领域，具体涉及一种奶牛早期乳房炎抗性筛选的分子鉴定试剂盒。该试剂盒包括特异性引物和PCR-SSCP试剂，所说的特异性引物序列如SEQIDNO.1和2所示。本试剂盒可用于奶牛乳房炎抗性的早期筛选，经600余头奶牛的初步试用，奶牛基因型与SCS水平吻合率高达86%以上，检测快，成本低。
文档编号C12N15/11GK101942522SQ20101050684
公开日2011年1月12日 申请日期2010年10月14日 优先权日2010年10月14日
发明者冀德君, 常玲玲, 杨章平, 毛永江, 陈仁金, 陈莹 申请人:扬州大学