专利名称：一种提高葡萄籽原花青素水溶性的方法
技术领域：
本发明涉及一种提高葡萄籽原花青素水溶性的方法，采用去离子水回流提取、提取液纯化、超滤膜分离的方法制备水溶性葡萄籽原花青素，属于生物技术天然活性物质提取领域。
背景技术：
原花青素，英文名是Oligomeric Proantho Cyanidins (OPC)，是一种有着特殊分子结构的生物类黄酮，是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。一般为红棕色粉末，气微、味涩，溶于水和大多有机溶剂。一般为葡萄籽提取物或法国海岸松树皮提取物。原花青素(葡萄籽提取物)是一种新型高效抗氧化剂。是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，OPC的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并吸收迅速完全，口服20分钟即可达到最高血液浓度， 代谢半衰期达7小时之久。在结构上，原花青素是由不同数量的儿茶素(catechin)或表儿茶素(epicatechin)结合而成。最简单的原花青素是儿茶素、或表儿茶素、或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，此外还有三聚体、四聚体等直至十聚体。按聚合度的大小，通常将二 五聚体称为低聚体(简称0PC)，将五聚体以上的称为高聚体(简称PPC)。目前，国内外市场销售和应用的原花青素产品主要是应用溶剂浸提和柱层析结合的分离纯化的方法制备，其水溶性差、低聚体含量低，该方法存在着提取工艺复杂、提取率低、分离柱寿命短、生产成本高等缺陷。
发明内容
针对市场上葡萄籽提取物规格和现有技术的不足，本发明所要解决的技术问题是产品的水溶性差、低聚体含量低、工艺复杂、生产成本高的缺陷。提供一种用酶解、壳聚糖絮凝、醇沉、膜超滤的方法来分离纯化葡萄籽原花青素的方法。为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是，一种提高葡萄籽原花青素水溶性的方法，其包括下列内容首先将葡萄籽用85-95°C的去离子水回流提取，过滤得到粗提物溶液；其次向粗提物溶液中加入果胶酶或淀粉酶或壳聚糖或高纯度的乙醇等稍作搅拌，有絮状沉淀出现: 再次将上层清液超滤；最后浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。具体提取分离方法如下1、将葡萄籽中加入4-5倍体积的去离子水后加热至85_95°C，回流提取，2_4h，过滤，收集提取液；2、将上述提取液中加入体积比2% -5%果胶酶或体积比2% -5%淀粉酶或体积质量比0. 5% -2%壳聚糖或体积比1/2 95%乙醇等，50°C水浴，搅拌10-20分钟，静置lh，有絮状沉淀出现；3、将上述液体用孔径为0. 1-1. 0 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；
4、将上述的精液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。
图1 左侧为市面上葡萄籽提取物；右侧为利用本方法制备的到的葡萄籽提取物。图2 左侧为市面上葡萄籽提取物；右侧为利用本方法制备的到的葡萄籽提取物。
具体实施方案本发明可以按照下列实施例进行具体说明其制备过程和效果。实施例1 1、取IOOg葡萄籽中加入4倍体积的去离子水后加热至95°C，回流提取4h，过滤， 收集提取液；2、将上述提取液中加入体积比2%果胶酶，50°C水浴，搅拌10分钟，有絮状沉淀出现；3、将上述液体用孔径为0.8μπι的超滤膜，过滤除去沉淀物；4、将上述的精液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品约为19. Sg。实施例2:1、取IOOg葡萄籽中加入5倍体积的去离子水后加热至85°C，回流提3h，过滤，收集提取液；2、将上述提取液中加入体积质量比0. 5%壳聚糖，50°C水浴，搅拌15分钟，有絮状沉淀出现；3、将上述液体用孔径为0. 6 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；4、将上述的清液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品约为16. Sg。实施例3 1、取IOOg葡萄籽中加入4倍体积的去离子水后加热至95°C，回流提取4h，过滤， 收集提取液；2、将上述提取液中加入体积比2%淀粉酶，50°C水浴，搅拌10分钟，有絮状沉淀出现；3、将上述液体用孔径为0. 4 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；4、将上述的精液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品约为18. 9g。实施例4 1、取IOOg葡萄籽中加入5倍体积的去离子水后加热至85°C，回流提取3h，过滤， 收集提取液；2、将上述提取液中加入体积比1/295%乙醇，50°C水浴，搅拌13分钟，有絮状沉淀出现；3、将上述液体用孔径为0. 2 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；4、将上述的清液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品约为16. 2g。
权利要求
1.一种提高葡萄籽原花青素水溶性的方法，包括下列内容(1)首先将葡萄籽过筛去除大量的尘土；(2)再将葡萄籽用85-95°C的去离子水回流提取，过滤得到粗提物溶液；(3)其次向粗提物溶液中加入果胶酶或淀粉酶或壳聚糖或高纯度的乙醇等稍作搅拌， 有絮状沉淀出现，静置；(4)再次将上层清液超滤；(5)最后浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。
2.根据权利要求1所述的水溶性葡萄籽原花青素的制备方法，包括下列内容(1)将葡萄籽中加入4-5倍体积的去离子水后加热至85-95°C，回流提取，2~4h,过滤， 收集提取液；(2)将上述提取液中加入体积比2%-5%树胶酶或体积比2% -5%淀粉酶或体积质量比0. 5% 2%壳聚糖或体积比1/2 95%乙醇等，50°C水浴，搅拌10-20分钟，静置lh，有絮状沉淀出现；(3)将上述液体用孔径为0.1-1. 0 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；(4)将上述的清液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。
3.根据权利要求2所述的水溶性葡萄籽原花青素的制备方法，包括下列内容(1)将葡萄籽中加入4倍体积的去离子水后加热至95°C，回流提取，3h，过滤，收集提取液；(2)将上述提取液中加入体积比2%果胶酶或体积比2 %淀粉酶或体积质量比0. 5 %壳聚糖或体积比1/2 95%乙醇等，50°C水浴，搅拌10-20分钟，静置lh，有絮状沉淀出现；(3)将上述液体用孔径为0.1-1. 0 μ m的超滤膜，过滤除去沉淀物；(4)将上述的清液浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。
全文摘要
本发明公开了一种提高葡萄籽原花青素水溶性的方法，其包括下列内容首先将葡萄籽用85-95℃的去离子水回流提取，过滤得到粗提物溶液；其次向粗提物溶液中加入果胶酶或淀粉酶或壳聚糖或高纯度的乙醇等稍作搅拌，有絮状沉淀出现，静置；再次将上层清液超滤；最后浓缩、干燥得到水溶性的葡萄籽原花青素产品。
文档编号C12P17/06GK102168120SQ20101055753
公开日2011年8月31日 申请日期2010年11月23日 优先权日2010年11月23日
发明者刘丹, 田婷 申请人:天津市尖峰天然产物研究开发有限公司