专利名称：一种用于pma/ema与细菌死细胞dna分子共价交联装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及ー种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置。
背景技术：
实时PCR技术被应用多年，用于检测食品、饲料或环境中的病原微生物。然而，目前的PCR检测方法容易出现假阳性的结果，这造成了巨大的浪费和不必要的召回事件的发生。出现这种结果的原因是PCR技术跟其它的DNA法一祥，均不能将活的跟死的细菌分开，导致了 PCR技术提供了错误的結果。为了克服以上PCR技术的弱点，避免假阳性结果的出现，将单叠氮溴化こ锭染料结合PCR技术对试样进行处理。单叠氮溴化こ锭进入死的细菌体内后与DNA分子进行结合， 单叠氮溴化こ锭染料使得细菌在染色后不能被溶解，相反的是，染料不能穿透活细胞，这使得检测人员可以利用这种改进的PCR技术很容易的区分活的及死的细菌，从而避免假阳性结果的出现。
实用新型内容由鉴于此，本实用新型的目的是提供一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，克服了现有技术的不足，操作方便、光照均匀并可进行紫外杀菌。为了实现上述目的，本实用新型采用以下技术方案一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，包括箱体，其中，所述箱体上设有活动门、卤素灯开关、紫外灯管开关和总电源开关，所述箱体内顶部设有卤素灯，箱体两侧内壁上分別设置有至少ー个紫外灯管。进ー步，所述的紫外灯管为两个。进ー步，所述箱体上还设有可视窗ロ。进ー步，所述卤素灯为500瓦。本实用新型的有益效果为本实用新型可用于永久性修饰细菌死细胞的DNA分子，阻断DNA分子的聚合酶链式反应，从而有效区分样品中细菌的死活状态，降低PCR检测样品中致病菌的假阳性率。本实用新型可提供约200001UX的强光，进而使PMA与菌悬液混合均匀后在本装置内进行光照交联，PMA所帯的光敏性叠氮基团转化为高活性的氮宾自由基，并与结合位点附近的任意碳氢化合物反应形成稳定的共价氮碳基，致使死细胞DNA分子的永久修饰，最后阻断死细胞DNA分子的聚合酶链式反应(PCR)扩增。本实用新型的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本实用新型的实践中得到教导。本实用新型的目标和其他优点可以通过下面的说明书或者附图中所特别指出的结构来实现和获得。
图I为本实用新型的结构示意图。
具体实施方式
如图I所示，本实用新型的箱体I上设有可视窗ロ 3、活动门5、卤素灯开关6、紫外灯管开关7和总电源开关8，活动门5与箱体I铰接，箱体I顶部的内壁上设有500W的卤素灯4，箱体I两侧的内壁上分別安装有两个紫外灯管2，两个平行的紫外灯管2分别左右对称设置于箱体I的内侧面。卤素灯4提供强光，紫外灯管2用于杀菌，为了提高杀菌效果，在箱体I两侧的内壁上分別安装两个紫外灯管2。通过可视窗ロ 3观察内部的光照交联效果O本实用新型可用于永久性修饰细菌死细胞的DNA分子，阻断DNA分子的聚合酶链式反应，从而有效区分样品中细菌的死活状态，降低PCR检测样品中致病菌的假阳性率。本实用新型可提供约200001UX的强光，进而使PMA与菌悬液混合均匀后在本装置内进行光照·交联，PMA所帯的光敏性叠氮基团转化为高活性的氮宾自由基，并与结合位点附近的任意碳氢化合物反应形成稳定的共价氮碳基，致使死细胞DNA分子的永久修饰，最后阻断死细胞DNA分子的聚合酶链式反应(PCR)扩增。使用本实用新型快速检测饲料中沙门氏菌活细胞，采用如下步骤I)将饲料样品用BPW肉汤增菌，吸取500ul菌悬液于I. 5mL离心管中，加入4ul
O.5mg/mL的叠氮溴化已啶溶液，将离心管置于冰盒上，在共价交联装置内曝光3min ；2)提取细菌DNA;3)PCR扩增沙门氏菌invA基因取试剂盒中预混酶及引物混合物，50ul体系吸取40ul，加入提取的细菌DNAlO ul进行PCR扩增，扩增条件为94°C预变性5min，94°C变性30sec，56°C退火 30 sec，72°C延伸 45sec，33 个循环，最后 72°C终延伸 10 min ；4)电泳分析将PCR产物于1%琼脂糖凝胶上进行电泳，电泳结束后，凝胶成像系统进行成像分析。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制，本领域普通技术人员对本实用新型的技术方案所做的其他修改或者等同替换，只要不脱离本实用新型技术方案的精神和范围，均应涵盖在本实用新型的权利要求范围中。
权利要求1.一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，包括箱体，其特征在于所述箱体上设有活动门、卤素灯开关、紫外灯管开关和总电源开关，所述箱体内顶部设有卤素灯，箱体两侧内壁上分别设置有至少一个紫外灯管。
2.根据权利要求I所述的一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，其特征在于所述的紫外灯管为两个。
3.根据权利要求I或2所述的一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，其特征在于所述箱体上还设有可视窗口。
4.根据权利要求3所述的一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，其特征在于所述卤素灯为500瓦。
专利摘要本实用新型公开了一种用于PMA/EMA与细菌死细胞DNA分子共价交联装置，包括箱体，其中，所述箱体上设有活动门、卤素灯开关、紫外灯管开关和总电源开关，所述箱体内顶部设有卤素灯，箱体两侧内壁上分别设置有至少一个紫外灯管。本实用新型克服了现有技术的不足，操作方便、光照均匀并可进行紫外杀菌。
文档编号C12M1/00GK202626164SQ20122022810
公开日2012年12月26日 申请日期2012年5月21日 优先权日2012年5月21日
发明者班付国, 高延玲, 张发旺, 周红霞, 刘宏伟, 赵全成, 梁军, 张影, 曲登峰, 王世山, 朱松波, 高小玲, 雷东风, 彭峰, 陈阳, 黄京燕, 马俊, 焦玉萍, 李金磊, 董鹏, 常守海, 姚德新 申请人:河南省兽药监察所