一种小鼠组织mRNA的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种小鼠组织mRNA的提取方法，其特征在于，步骤如下：首先将小鼠进行初步处理：即引颈处死法处死小鼠，然后解剖出其内脏器官；加入组织研磨成粉末状，摇匀后室温静置10分钟；加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液，然后盖紧盖子；随后摇晃，37摄氏度孵育5分钟；加入体积比为百分之五十的异丙醇，然后高速离心；弃上清；保留ＲＮＡ沉淀；加入无水乙醇；静置半小时后再次高速离心，时间为２分钟；用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可；所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十；弃上清之前需要进行干燥，在温度为８０度的烤箱中烘烤一分钟。本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【专利说明】—种小鼠组织mRNA的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生化实验领域，具体涉及一种小鼠组织mRNA的提取方法。
【背景技术】
[0002]mRNA,即信使核糖核酸，携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。从脱氧核糖核酸(DNA)转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸(RNA)。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如线粒体和叶绿体冲。mRNA的复制，转录和翻译:由一个DNA分子，边解旋，边转录。利用细胞核内部的游离核糖核苷酸和成其需要的碱基，规则遵循碱基互补配对原则。注:因为mRNA没有T (胸腺嘧啶)，所以模版中出现A (腺嘌呤)时，由U(尿嘧啶)代替。以上过程叫做转录，在细胞核中完成。接着，mRNA穿过核孔。和细胞质中的核糖体结合。选择tRNA运输氨基酸，和对应的三个碱基排列好(如何排列请查询:密码子)。再与其它的氨基酸通过肽键连接在一起，形成肽链。以上过程叫做翻译，在细胞质中完成。虽然人们已经破译了决定生命基础的蛋白质的氨基酸合成密码，也知道了是DNA携带着这种密码，但是，根据细胞学所掌握的事实:所有DNA都呆在细胞核内，而蛋白质却存在于细胞质中，像DNA这样的大分子是无法随意进入细胞质的。然而密码总是会被带入细胞质的，这一来，人们不禁要问，是谁把锁在细胞核内的DNA手里的密码带入了细胞质的呢？科学家们从DNA那里拷贝了一份密码文件，并带入了细胞质中。经过试验和观察，发现这个信使就是RNA——核糖核酸。
【发明内容】
[0003]本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术缺陷，提供一种技术方案:
一种小鼠组织mRNA的提取方法，步骤如下:首先将小鼠进行初步处理:即引颈处死法
处死小鼠，然后解剖出其内脏器官；加入组织研磨成粉末状，摇匀后室温静置10分钟；加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液，然后盖紧盖子；随后摇晃，37摄氏度孵育5分钟；加入体积比为百分之五十的异丙醇，然后高速离心；弃上清；保留R N A沉淀；加入无水乙醇；静置半小时后再次高速离心，时间为2分钟；用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可。
[0004]本发明中，所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十。
[0005]本发明中，弃上清之前需要进行干燥，在温度为8 O度的烤箱中烘烤一分钟。
[0006]本发明的有益效果是:操作简单，成本较低，可以准确进行筛选，重复操作性强，筛选精确。
【具体实施方式】
[0007]—种小鼠组织mRNA的提取方法，其特征在于，步骤如下:首先将小鼠进行初步处理:即引颈处死法处死小鼠，然后解剖出其内脏器官；加入组织研磨成粉末状，摇匀后室温静置10分钟；加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液，然后盖紧盖子；随后摇晃，37摄氏度孵育5分钟；加入体积比为百分之五十的异丙醇，然后高速离心；弃上清；保留RN A沉淀；加入无水乙醇；静置半小时后再次高速离心，时间为2分钟；用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可；所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十；弃上清之前需要进行干燥，在温度为8 O度的烤箱中烘烤一分钟。
[0008]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替 换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种小鼠组织mRNA的提取方法，其特征在于，步骤如下:首先将小鼠进行初步处理:即引颈处死法处死小鼠，然后解剖出其内脏器官；加入组织研磨成粉末状，摇匀后室温静置10分钟；加入重量体积为百分之十的氯化钙溶液，然后盖紧盖子；随后摇晃，37摄氏度孵育5分钟；加入体积比为百分之五十的异丙醇，然后高速离心；弃上清；保留RNA沉淀；加入无水乙醇；静置半小时后再次高速离心，时间为2分钟；用琼脂糖凝胶进行电泳检测即可。
2.如权利要求1所述的一种小鼠组织mRNA的提取方法，其特征在于，所述琼脂糖凝胶质量百分比为百分之十。
3.如权利要求1所述的一种小鼠组织mRNA的提取方法，其特征在于，弃上清之前需要进行干燥，在温度为8 O度的烤箱中烘烤一分钟。`
【文档编号】C12N15/10GK103614368SQ201310540660
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年11月5日 优先权日:2013年11月5日
【发明者】辛竹 申请人:辛竹