用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置制造方法
【专利摘要】本实用新型公开了一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，属于生物组织切片孵育【技术领域】。该灌流装置包括孵育盘和孵育槽；还包括输入管、输出管和孵育架；所述输入管和输出管分别连通孵育盘的内部空间，所述孵育架置于孵育盘内，且该孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，所述孵育槽置于孵育架上。采用该灌流装置，能够使活体脑片或脊髓片与不断通入的混合气或ACSF液进行物质交换，随着ACSF液不断的更换，营养物质不断更新，代谢废物不断排出，有效保证了脑片或脊髓片在长期孵育过程中一直处于最佳的环境中，保持其活性。
【专利说明】用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及一种生物组织切片孵育设备，特别是涉及一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置。
【背景技术】
[0002]1966年，Yamamoto和McIlwain首次在脑片上记录了电生理活动(YamamotoC, McIlwain H.Potentials evoked in vitro in preparations from the mammalianbrain.Nature, 1966，210(5040): 1055-1056)，证实了脑组织在体外也能存活，并保持很好的活性状态。此方法的建立，极大推动了神经电生理研究的进程。1989年，Blanton将脑片电生理记录与细胞的膜片钳记录结合起来(Yamamoto C，McIlwain H.Electrical activitiesin thin sections from the mammalian brain maintained in chemically-definedmedia in vitr0.J Neurochem.1966，13 (12): 1333-43),建立了脑片膜片钳记录技术,这成为神经生物学发展的里程碑。为了研究神经网络中神经元之间的相互联系，Yuste R和KatzLC首次在大鼠和猫的脑片中记录到了I丐离子的动态信息(Yuste R, Katz LC.Control ofpostsynaptic Ca2+influx in developing neocortex by excitatory and inhibitoryneurotransmitters.Neuron.199IMar; 6 (3): 333-44),从而创造了 一种能实时记录神经网络内大量神经元动作电位的方法一功能型多神经元I丐成像技术。
[0003]其中，用于电生理记录或功能钙成像的脑片或脊髓片都需要保持很高的活性，这是实验顺利进行的重要条件。活体脑片、脊髓片需要在活体上低温取材，随后置于充有混合气(95%02，5%C02)的人工脑脊液(ACSF)中孵育，30-35°C保温，期间要不断的充入混合气，这有效的保持了脑片的活性。当前用于制作活体脑片的工具多为自制，或用烧杯代替。
[0004]目前常规的技术中，一般是将配好的ACSF液倒入大烧杯内，同时不断的通入混合气，盛有脑片或脊髓片的孵育槽漂浮于ACSF液面上方。有人通过在孵育槽中心设多个孵育孔对混合气流量的控制进行了改进，虽然通过改进保证了气流的均匀，但仍不能使孵育槽充分进入ACSF液保持充分的物质交换；还有人通过设置滤网结构使脑片能充分的与液体接触，以便于更好的保持脑片活性，但其装置各个小室互不连通，通气和灌流都很难进行。
[0005]并且，常规技术都为传统意义上的孵育，不涉及灌流。在活体脑片或脊髓片的孵育过程中，会不断的与外界进行物质交换，吸收外界营养物质，排除代谢产物。普通的通气孵育会随着孵育时间的延长，导致外界营养物质减少，代谢废物逐渐增多，不利于保持脑片的活性。
【发明内容】
[0006]基于此，本实用新型的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，能够实现灌流孵育，随着液体的不断更换，使营养物质不断更新，代谢废物不断排出，利于保持脑片或脊髓片的活性。
[0007]为实现上述目的，本实用新型采取以下技术方案:[0008]一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，包括孵育盘和孵育槽；还包括输入管、输出管和孵育架；所述输入管和输出管分别连通孵育盘的内部空间，所述孵育架置于孵育盘内，且该孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，所述孵育槽置于孵育架上。
[0009]采用上述灌流装置，在孵育活体脑片或脊髓片的过程中，将活体脑片或脊髓片放入孵育槽中，又将孵育槽放入孵育架上，由于孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，因此，当通过输入管不断输入混合气或ACSF液时，混合气或ACSF液能透过该镂空部与孵育槽内的活体脑片或脊髓片进行物质交换，并将产生的代谢产物随着ACSF液由输出管排出，有利于保持脑片或脊髓片的活性。
[0010]在其中一个实施例中，所述孵育架包括连接部和至少两条侧向支架；所述侧向支架为条状，所述连接部位于侧向支架顶部，侧向支架通过连接部连接为一体，所述侧向支架中部还设有横向延伸的支撑托，该侧向支架、连接部和支撑托共同形成具有容纳腔的桶状结构，所述孵育槽置于该容纳腔内。采用上述结构，可以使孵育盘中的ACSF液由孵育槽的底部及四周与其进行充分的物质交换。
[0011 ] 在其中一个实施例中，所述侧向支架至少为两条，所述连接部为圆环状；所述孵育槽为圆桶状，该孵育槽的顶部设有沿孵育槽径向延伸的固定部，且该固定部上设有与连接部卡接的卡接槽。通过将卡接槽卡接于固定部，可以将孵育槽固定，避免产生移动。
[0012]在其中一个实施例中，所述孵育槽的外径与所述容纳腔的内径相匹配。避免孵育槽在容纳腔内随ACSF液的流动而在水平方向产生移动。
[0013]在其中一个实施例中，所述孵育架至少为两个，各孵育架的连接部连为一体。可根据需要，插入一个或多个孵育槽进行孵育。
[0014]在其中一个实施例中，该灌流装置还包括透气管，该透气管上均布有透气孔，所述透气管设于孵育盘内，所述输入管设于孵育盘内的开口连通该透气管。以便使由输入管进入孵育盘的混合气或ACSF液能在孵育盘内均由的排出，不致产生太大冲击力。
[0015]在其中一个实施例中，所述透气管沿孵育盘底部边缘设置。使混合气或ACSF液由孵育盘的四周均匀排出，能够更好的进行物质交换。
[0016]在其中一个实施例中，该灌流装置还包括孵育盖和气体输出管，所述气体输出管连接孵育盖，所述孵育盖的大小和孵育盘大小相匹配。通过孵育盖的使用，可以减少整个孵育过程中受到外界物质的污染。
[0017]在其中一个实施例中，所述孵育盘和孵育盖为避光的孵育盘和孵育盖(如由棕色玻璃或棕色聚苯乙烯材质制造)，便于活体脑片或脊髓片在免疫染色中的避光操作。
[0018]在其中一个实施例中，所述孵育槽由框架和覆盖于框架上的尼龙膜或半透膜构成。允许孵育槽内的活体脑片或脊髓片与混合气体和ACSF液进行物质交换，常规可使用100目的尼龙膜，当有染色需求时，可使用0.4μπι半透膜。
[0019]与现有技术相比，本实用新型具有以下有益效果:
[0020]本实用新型的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，设有灌流系统，能够使活体脑片或脊髓片与不断通入的混合气或ACSF液进行物质交换，随着ACSF液不断的更换，营养物质不断更新，代谢废物不断排出，有效保证了脑片或脊髓片在长期孵育过程中一直处于最佳的环境中，保持其活性。并且本装置集合了通气孵育和灌流孵育两项功能，满足了实验人员不同的需求。
[0021]该灌流装置还通过采用结构独特的孵育架，可以保证脑片或脊髓片与孵育液充分接触，最大限度的保持脑片或脊髓片的活性；并可同时进行多份样本的孵育。
[0022]该灌流装置还通过透气管的使用，使孵育盘内的气流、水流流动均匀，为孵育创造平稳的环境条件。
[0023]该灌流装置还可采用不透光材质制成，从而可进行免疫染色等需要避光的实验。
【专利附图】
【附图说明】
[0024]图1为实施例所述灌流装置整体外观示意图；
[0025]图2为实施例所述灌流装置内部结构示意图；
[0026]图3为孵育盘和孵育架俯视图；
[0027]图4为图3中放入了孵育槽的俯视图；
[0028]图5为单个孵育槽和孵育架结构示意图；
[0029]图6为孵育盖示意图。
[0030]其中:1.孵育盘；2.孵育槽；21.固定部；3.输入管；4.输出管；5.孵育架；51.侧向支架；52.连接部；53.支撑托；6.孵育盖；7.气体输出管；8.透气管。
【具体实施方式】
[0031]以下结合附图和具体实施例来详细说明本发明。
[0032]一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，包括孵育盘1、孵育槽2、输入管3、输出管4、孵育架5、孵育盖6、气体输出管7和透气管8 ;所述输入管3和输出管4分别连通孵育盘I的内部空间，所述孵育架5置于孵育盘I内，所述孵育架5包括连接部52和四条侧向支架51，所述侧向支架51为条状，所述连接部52位于侧向支架顶部，侧向支架通过连接部52连接为一体，所述侧向支架51中部还设有横向延伸的支撑托53，该侧向支架51、连接部52和支撑托53共同形成具有容纳腔的桶状结构，所述孵育槽置于该容纳腔内，该孵育槽2的外径与所述容纳腔的内径相匹配。
[0033]所述连接部52为圆环状；所述孵育槽2为圆桶状，该孵育槽2的顶部设有沿孵育槽径向延伸的固定部21，且该固定部21上设有与连接部52卡接的卡接槽。
[0034]所述孵育架5为五个，平均分布于孵育盘I内，且各孵育架5的连接部52连为一个体，使多个孵育架5形成一个整体。
[0035]所述透气管8上均布有透气孔，该透气管8设于孵育盘I内，沿孵育盘I底部边缘设置，且所述输入管3设于孵育盘内的开口连通该透气管8。
[0036]所述气体输出管7连接孵育盖6，所述孵育盖6的大小和孵育盘I大小相匹配。可固定于孵育盘I上，将孵育盘I盖住。
[0037]所述孵育盘I和孵育盖6为避光的孵育盘和孵育盖(如由棕色玻璃或棕色聚苯乙烯材质制造)，便于活体脑片或脊髓片在免疫染色中的避光操作。
[0038]所述孵育槽2由框架和覆盖于框架上的尼龙膜或半透膜构成。允许孵育槽内的活体脑片或脊髓片与混合气体和ACSF液进行物质交换，常规可使用100目的尼龙膜，当有染色需求时，可使用0.4μηι半透膜。[0039]采用上述灌流装置进行活体脑片或脊髓片的孵育时，将活体脑片或脊髓片放入孵育槽2中，又将孵育槽2放入孵育架5中，由于孵育架5的底部和侧壁均直接连通孵育盘的内部空间，因此，当通过输入管3不断输入混合气或ACSF液时，混合气或ACSF液能与孵育槽2内的活体脑片或脊髓片进行物质交换，并将产生的代谢产物随着ACSF液由输出管4排出，有利于保持脑片或脊髓片的活性。
[0040]以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【权利要求】
1.一种用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，包括孵育盘和孵育槽；其特征在于，还包括输入管、输出管和孵育架；所述输入管和输出管分别连通孵育盘的内部空间，所述孵育架置于孵育盘内，且该孵育架的底部和/或侧壁设有连通孵育盘内部空间的镂空部，所述孵育槽置于孵育架上。
2.根据权利要求1所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述孵育架包括连接部和至少两条侧向支架；所述侧向支架为条状，所述连接部位于侧向支架顶部，侧向支架通过连接部连接为一体，所述侧向支架中部还设有横向延伸的支撑托，该侧向支架、连接部和支撑托共同形成具有容纳腔的桶状结构，所述孵育槽置于该容纳腔内。
3.根据权利要求2所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述侧向支架至少为两条，所述连接部为圆环状；所述孵育槽为圆桶状，该孵育槽的顶部设有沿孵育槽径向延伸的固定部，且该固定部上设有与连接部卡接的卡接槽。
4.根据权利要求2所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述孵育槽的外径与所述容纳腔的内径相匹配。
5.根据权利要求2所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述孵育架至少为两个，各孵育架的连接部连为一体。
6.根据权利要求1所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，还包括透气管，该透气管上均布有透气孔，所述透气管设于孵育盘内，所述输入管设于孵育盘内的开口连通该透气管。
7.根据权利要求6所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述透气管沿孵育盘底部边缘设置。
8.根据权利要求1所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，还包括孵育盖和气体输出管，所述气体输出管连接孵育盖，所述孵育盖的大小和孵育盘大小相匹配。
9.根据权利要求8所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述孵育盘和孵育盖为避光的孵育盘和孵育盖。
10.根据权利要求1所述的用于活体脑片或脊髓片孵育的灌流装置，其特征在于，所述孵育槽由框架和覆盖于框架上的尼龙膜或半透膜构成。
【文档编号】C12M1/00GK203546001SQ201320647470
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年10月18日 优先权日:2013年10月18日
【发明者】冯晓娜, 谢维娇, 秋云海 申请人:深圳先进技术研究院