一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物及其应用的制作方法
【专利摘要】一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物及其在作为保健食品方面的应用，属于保健食品【技术领域】。是将牛樟芝菌种（ATCC200183)经发酵罐发酵，发酵液离心，弃上清，收集沉淀并以-30?-50°C冻干60?12小时，得到牛樟芝菌粉；再将牛樟芝菌粉水提2?3次，固液质量比1:40?60，温度为70?90°C，合并多次水提液，200?300目过滤得到过滤液，将过滤液减压浓缩至相对密度1.05?1.15(70。。-80。。)，将浓缩液以-30?-50°C冻干60?72小时，即得牛樟芝提取物。经实验证明，牛樟芝水提物具有提高机体抗免疫能力的功能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。
【专利说明】一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于保健食品【技术领域】，具体涉及一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提 取物及其在作为保健食品方面的应用。
【背景技术】
[0002] 现代人群不良的生活方式和习惯：精神紧张、营养不良、缺乏运动或睡眠不足、滥 用酒精和吸烟等，都可抑制免疫系统，降低机体免疫力。其他因素：环境中的有毒物质、某些 药物、放射治疗以及过量的抗生素也都会抑制免疫系统。随着生活水平的提高，服用安全和 有效的保健食品更是人们乐于接受的一种增强免疫力的手段。
[0003] 市场对许多药用真菌产品需求量的提升，传统的药用真菌培养方式已不能满足市 场对药用真菌产品的需求，液体发酵技术在药品行业的应用应运而生。近年来，药用真菌发 酵技术在改进发酵条件、提高产物质量、降低发酵成本等方面得到越来越广泛的应用，是目 前液体发酵的研究重点。本发明考察了经液体发酵后的药用真菌其在增强免疫功能等方面 的作用，结果显示，除免疫器官脏器指数、细胞免疫、体液免疫、自然杀伤细胞等方面，该药 用真菌对白细胞介素、干扰素等细胞因子水平的影响，它们在同种细胞上具有广谱的抗病 毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。为此，利用大型真菌液体深层 发酵技术制备一种具有显著增强人体免疫力功能的保健食品具有重要的意义。
[0004] 樟芝，又名牛樟芝或牛樟菇，属于担子菌纲、非褶菌目、多孔科、多年生担子菌，只 生长在台湾地区的牛樟树腐朽树干的内壁。樟芝子实体味苦，具有强烈的樟树香气，外形为 板状或钟状，无柄。子实体初期新鲜时呈现橘红色、橘褐色，老熟时会渐渐转变为棕褐色，之 后变为黑色。从近年的研究报告发现，牛樟芝含有许多复杂成分，如精油、多糖体，其主要化 学成分为P-D-葡聚糖、三菇类化合物（如樟萜酸A、B、e、K等）、超氧歧化酶、核酸类（腺苷 等物质）、麦角固醇、蛋白质（含免疫蛋白）、维生素、氨基酸、凝聚素及一些微量元素等。这 些有效成分中以三萜类化合物最特别，高达200种以上（单一品系的灵芝约20-50种，不同 品系灵芝总合约200多种），含量为10% -45% (灵芝为1% -3% )，是其他菇菌无法相比 的；多糖体含量为13. 13% (灵芝为2% )。基于多糖具有抗疲劳、抗肿瘤、提高免疫力、降 血糖、保肝、抗氧化等多种生物活性，因此本发明提供牛樟芝水提物作为原料提高机体免疫 调节能力的作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物及其在作为保 健食品方面的应用。
[0006] 本发明所述的具有增强人体免疫力功能的牛樟芝提取物，其由如下方法制备得 至IJ :将牛樟芝菌种（ATCC200183)经发酵罐发酵，发酵液以4000?5000转/分钟离心5? 10分钟，弃上清，收集沉淀并以-30?_50°C冻干60?72小时，得到牛樟芝菌粉；再将牛樟 芝菌粉水提2?3次，固液质量比1:40?60,温度为70?90°C，第一次水提的时间为3?4 小时，第2次水提的时间为1?3小时，第3次水提的时间为1?3小时，合并多次水提液， 200?300目过滤得到过滤液，将过滤液减压浓缩至相对密度1. 05?1. 15 (70°C -80°C )， 将浓缩液以-30?_50°C冻干60?72小时，即得牛樟芝提取物。
[0007] 牛樟芝菌种发酵条件为：培养基组分蛋白胨10?20g/L，蔗糖15?25g/L，硫酸镁 2?4g/L，磷酸二氢钾2?4g/L，发酵条件为：装液量为60?80升，接种量（v/v) 2?5%， 发酵温度25?27摄氏度，发酵罐转速150?300转/分钟，发酵时间3?5天。
[0008] 经动物实验证明（详见实施例），本发明牛樟芝水提物具有提高机体抗免疫能力 的功能，因而可以在作为保健食品方面得到应用。其主要的功效学作用如下：昆明小鼠在服 用本发明的牛樟芝保健食品（即牛樟芝提取物）一个月后，其T淋巴细胞转化率增高，NK 细胞活性增强，迟发型变态反应增强，完全符合《保健食品检验与评价技术规范》（2003版） 中对免疫调节保健食品的评价要求。特别的，昆明小鼠在服用本品一个月后，血清中IL10、 IL12、IL12R、IFN-a等细胞因子的水平显著提高，且IFN-α的上调水平明显优于各单组份 单独作用之和，复方的合理配比可能产生协同作用机制。
[0009] 本发明工艺制得的牛樟芝提取物安全、无副作用，具有显著保健功效，可长期服 用，且各主要原料可通过深层液体发酵生产，降低了工业化成本、有很好的市场开发前景。
[0010] 具体实施例方式
[0011] 下面结合实施例对本发明作进一步描述，但本发明不受具体实施例限制。
[0012] 实施例1
[0013] 将牛樟芝菌种（ATCC200183)经百升发酵罐发酵（培养基组分：蛋白胨15g/L，蔗 糖20g/L，硫酸镁3g/L，磷酸二氢钾3g/L，发酵条件为：装液量为70升，接种量（v/v) 3%，发 酵温度26摄氏度，发酵罐转速250转/分钟，发酵时间4天），发酵终止后得发酵液68升， 以4000转/分钟离心10分钟，弃去上清，收集沉淀并-40°C冻干66小时，得到牛樟芝菌粉 924克，再将菌粉用去离子水提2次，固液质量比为1 :40,温度为90°C，第一次3小时，第2 次1小时，合并两次水提液，用200目过滤布，过滤后得到过滤液，将过滤液减压浓缩至相对 密度为1. 10 (80°C )，将浓缩液以-45°C冻干72小时得牛樟芝提取物108克。
[0014] 为进一步验证本发明的效果，进行如下实验：
[0015] 1、动物分组及饲养
[0016] 本试验例用于说明本发明的牛樟芝保健食品（即牛樟芝提取物）对小鼠免疫力的 影响。准备健康昆明小鼠240只，全雄，体重18?22g，饲养温度22±2°C，相对湿度40? 70%，随机分为4个大组，分别用于淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定、迟发性变态反应 实验和小鼠脾脏指数测定。将每个大组的60只小鼠再随机分成3小组，每小组20只，分别 为空白组、牛樟芝提取物剂量组和金水宝胶囊阳性对照组。其中提取物剂量组和阳性对照 药组按300mg/kg剂量灌胃给药，灌胃体积为0. 2mL，空白对照组给同体积的水；每天上午灌 胃1次，连续30天。
[0017] 2、检测结果
[0018] 2. 1本品对小鼠体重和脾脏指数的影响
[0019] 表1本产品对小鼠体重和脾脏指数的影响
[0020]
【权利要求】
1. 一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物，其特征在于：是由如下方法制备得 至|J，将牛樟芝菌种（ATCC200183)经发酵罐发酵，发酵液以4000?5000转/分钟离心5?10 分钟，弃上清，收集沉淀并以-30?-50°C冻干60?72小时，得到牛樟芝菌粉；再将牛樟芝 菌粉水提2?3次，固液质量比1:40?60,温度为70?90°C，第一次水提的时间为3?4 小时，第2次水提的时间为1?3小时，第3次水提的时间为1?3小时，合并多次水提液， 200?300目过滤得到过滤液，将过滤液减压浓缩至70°C -80°C下相对密度1. 05?1. 15， 将浓缩液以-30?_50°C冻干60?72小时，即得牛樟芝提取物。
2. 如权利要求1所述的一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物，其特征在于：牛 樟芝菌种发酵条件为：培养基组分蛋白胨10?20g/L，鹿糖15?25g/L，硫酸镁2?4g/L， 磷酸二氢钾2?4g/L，发酵条件为：装液量为60?80升，接种量（v/v) 2?5%，发酵温度 25?27摄氏度，发酵罐转速150?300转/分钟，发酵时间3?5天。
3. 权利要求1或2所述的一种具有增强人体免疫功能的牛樟芝提取物在作为保健食品 方面的应用。
【文档编号】A23L1/28GK104208106SQ201410400980
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年8月14日 优先权日:2014年8月14日
【发明者】王迪, 刘燕隔, 滕利荣, 孟庆繁, 宋佳, 逯家辉, 刘艳, 王贞佐, 周毓麟, 刘春刚, 程琪現, 权宇彤 申请人:吉林大学