本发明属于保健食品
技术领域：
，具体涉及一种桑椹酵素的制备方法。
背景技术：
：桑椹俗名桑树枣、桑果，为桑科落叶桑树(Morusalbal)的成熟果实。成熟桑椹果肉多汁，味微酸而甜，风味独特，具有较高的营养价值和药用价值。据测定，桑椹由果肉71.4％，果皮23.5％，种子2.9％，果柄2.2％组成。桑椹含有人体所必需的各种营养成分，其中氨基酸有19种，包括7种必需氨基酸和12种其它氨基酸，桑椹总氨基酸含量比核果类高4～6.5倍；桑椹含丰富的矿物质如钙、磷、铁、铜、锌等，其中钙含量是橙、草莓的1.5～3倍，是葡萄、杏的4～5倍；桑椹鲜果中含大量水分、粗蛋白、糖分、有机酸，还含有大量维生素B1、维生素B2、维生素C、胡萝卜素；此外，桑椹还含有丰富的黄酮类化合物，如花色素类矢车菊素、矢车菊普，地氢黄酮醇类桑色素和黄酮醇类芦丁、棚皮素等。随着微生物研究的不断深入，酵素对人体健康的有益作用已越来越被大众所了解，酵素又称“酶”，是由氨基酸组成的，具有生物催化功能的高分子物质，存在于所有动、植物和微生物体内，是维持机体正常功能，消化食物，修复组织等生命活动的一种必需物质。目前，我国由于膳食不平衡或营养过剩造成的“文明病”—肥胖症、高血压、高血脂、冠心病、糖尿病、结肠癌等，在我国呈现明显增加的趋势，甚至已开始在青少年中出现。桑椹中含有多种维生素和氨基酸，桑椹酵素的研发具有很大的市场潜力，不仅可以更好的开发利用水果资源，开辟水果酵素生产的新途径，还可以避免桑椹由于常温条件不易贮藏所导致的腐烂、变质，将其开发成酵素产品，大大延长货架期，具有很高的社会效益和经济效益。技术实现要素：本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种桑椹酵素的制备方法，所得桑椹酵素能够有效增强胃排空及小肠推进功能。一种桑椹酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取桑椹，洗净，粉碎，得桑椹浆液；步骤2，以重量份计，在桑椹浆液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的混合菌液0.1份，35～40℃发酵10～15天，得发酵液；步骤3，将发酵液经板框过滤去除果渣，滤液经超滤膜过滤，得到桑椹酵素提取液；步骤4，以重量份计，取明胶5～12份、卡波姆2～5份、海藻酸钠1～7份、壳聚糖2～6份、聚乙二醇3～8份、水20份，混合，超声分散，得到载体溶液；步骤5，以重量份计，将桑椹酵素提取液10份加至载体溶液20～40份中，混合，50～70℃减压蒸发得到凝胶溶液，冻干，得到桑椹酵素。进一步地，步骤2中分散条件为200～400rpm、10～15min。进一步地，步骤2中混合菌液的pH为5.5～6.5。进一步地，步骤2混合菌液中长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的用量比为1:1:1:1。进一步地，步骤2中超滤膜的孔径在0.01～0.2μm。进一步地，步骤4中超声分散条件为20～40kHz、20～30min。进一步地，步骤5中混合条件为35～40℃、200～300rpm、20～30min、氮气氛围。本发明的桑椹酵素能有效地恢复胃正常机械运动，模型动物经治疗后，其胃收缩频率、幅度均明显提高，并能明显增强胃排空及小肠推进功能。具体实施方式实施例1一种桑椹酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取桑椹，洗净，粉碎，得桑椹浆液；步骤2，以重量份计，在桑椹浆液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的混合菌液0.1份，35℃发酵15天，得发酵液；步骤3，将发酵液经板框过滤去除果渣，滤液经超滤膜过滤，得到桑椹酵素提取液；步骤4，以重量份计，取明胶5份、卡波姆2份、海藻酸钠1份、壳聚糖2份、聚乙二醇3份、水20份，混合，超声分散，得到载体溶液；步骤5，以重量份计，将桑椹酵素提取液10份加至载体溶液20份中，混合，50℃减压蒸发得到凝胶溶液，冻干，得到桑椹酵素。其中，步骤2中分散条件为200rpm、15min，混合菌液的pH为5.5，混合菌液中长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的用量比为1:1:1:1；步骤3中超滤膜的孔径在0.01μm；步骤4中超声分散条件为20kHz、30min；步骤5中混合条件为35℃、300rpm、20min、氮气氛围。实施例2一种桑椹酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取桑椹，洗净，粉碎，得桑椹浆液；步骤2，以重量份计，在桑椹浆液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的混合菌液0.1份，40℃发酵10天，得发酵液；步骤3，将发酵液经板框过滤去除果渣，滤液经超滤膜过滤，得到桑椹酵素提取液；步骤4，以重量份计，取明胶7份、卡波姆3份、海藻酸钠4份、壳聚糖5份、聚乙二醇6份、水20份，混合，超声分散，得到载体溶液；步骤5，以重量份计，将桑椹酵素提取液10份加至载体溶液24份中，混合，60℃减压蒸发得到凝胶溶液，冻干，得到桑椹酵素。其中，步骤2中分散条件为300rpm、10min，混合菌液的pH为5.5，混合菌液中长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的用量比为1:1:1:1；步骤3中超滤膜的孔径在0.02μm；步骤4中超声分散条件为30kHz、20min；步骤5中混合条件为35℃、200rpm、25min、氮气氛围。实施例3一种桑椹酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取桑椹，洗净，粉碎，得桑椹浆液；步骤2，以重量份计，在桑椹浆液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的混合菌液0.1份，35℃发酵15天，得发酵液；步骤3，将发酵液经板框过滤去除果渣，滤液经超滤膜过滤，得到桑椹酵素提取液；步骤4，以重量份计，取明胶11份、卡波姆3份、海藻酸钠2份、壳聚糖5份、聚乙二醇6份、水20份，混合，超声分散，得到载体溶液；步骤5，以重量份计，将桑椹酵素提取液10份加至载体溶液30份中，混合，50℃减压蒸发得到凝胶溶液，冻干，得到桑椹酵素。其中，步骤2中分散条件为200rpm、15min，混合菌液的pH为6.0，混合菌液中长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的用量比为1:1:1:1；步骤3中超滤膜的孔径在0.01μm；步骤4中超声分散条件为20kHz、30min；步骤5中混合条件为35℃、300rpm、20min、氮气氛围。实施例4一种桑椹酵素的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取桑椹，洗净，粉碎，得桑椹浆液；步骤2，以重量份计，在桑椹浆液10份中加入蜂蜜0.1份，分散，加入长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的混合菌液0.1份，40℃发酵10天，得发酵液；步骤3，将发酵液经板框过滤去除果渣，滤液经超滤膜过滤，得到桑椹酵素提取液；步骤4，以重量份计，取明胶12份、卡波姆5份、海藻酸钠7份、壳聚糖6份、聚乙二醇8份、水20份，混合，超声分散，得到载体溶液；步骤5，以重量份计，将桑椹酵素提取液10份加至载体溶液40份中，混合，70℃减压蒸发得到凝胶溶液，冻干，得到桑椹酵素。其中，步骤2中分散条件为400rpm、10min，混合菌液的pH为6.5，混合菌液中长双歧杆菌、德氏乳杆菌保加利亚种、嗜酸乳酸杆菌和嗜热链球菌的用量比为1:1:1:1；步骤3中超滤膜的孔径在0.02μm；步骤4中超声分散条件为40kHz、20min；步骤5中混合条件为40℃、200rpm、30min、氮气氛围。桑椹酵素改善胃肠功能试验1.小鼠小肠推动功能的检测取昆明种小白鼠30只，禁食20-24小时，随机分为3组，即对照组、桑椹酵素组、吗丁啉组，每组10只动物。用药组分别给予桑椹酵素溶液(5mg/kg)及吗叮啉溶液(5mg/kg)灌胃，对照组给予等量生理盐水灌胃，90分钟后各组给予0.3mL墨汁液灌胃。20分钟后，颈椎脱臼处死，打开腹腔分离肠膜，上端至幽门、下端至回盲部剪取肠管，置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度作为小肠总长度。从幽门至墨汁前沿的距离作为“墨汁在肠内推进距离”。用公式计算墨汁推进百分率。墨汁推进率(％)＝墨汁在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100％。各组小鼠小肠推动功能检测结果如下：2.小鼠胃排空功能的检测将小白鼠30只随机分为桑椹酵素组、吗叮啉组和对照组，每组10只，桑椹酵素组以5mg/kg、吗叮啉组以3.9mg/kg、对照组以等容积去离子水分别灌胃给药，10分钟后灌服2％葡聚糖蓝2000溶液，每只0.4mL。再经30分钟颈椎脱臼处死动物，开腹取出全部胃肠，自幽门括约肌处取胃，将其内残留色素(葡聚糖蓝2000)充分溶于2mL去离子水中，3500rpm离心15分钟，取上清液，玻璃棉滤器过滤，滤液用723型分光光度计入620nm测吸光度为胃内色素残留量，并求出各组均值。以对照组均值为100％，各组均值与其之百分比为相对胃内色素残留率。结果如下：胃内色素残留量相对胃内色素残留率/％对照组186.6±42.6100桑椹酵素组84.7±23.645.3吗叮啉组152.3±14.0181.83.大鼠胃运动频率、幅度的检测将Wistar雄性清洁级大白鼠20只，随机分为4组：模型组3组，正常对照组1组。模型组，采用纱布包裹尖端的止血钳夹鼠尾巴刺激，使大鼠互相打斗、激怒，每次刺激30分钟，每隔3小时1次，每天刺激4次，1周后，动物饮水、进食明显减少，甚至不思饮食，多呈困倦状，毛发变暗、枯黄体重随之下降。呈现出较典型的肝胃不和NUD大鼠模型。将肝胃不和大鼠模型，再次随机分为模型组、桑椹酵素组、吗叮啉组，每组5只，桑椹酵素组按5mg/kg.d，分2次灌胃治疗，吗叮啉组按5mg/kg.d，分3次灌胃治疗，模型组以等量生理盐水灌胃。疗程全部2周。治疗完毕，用10％乌拉坦麻醉动物(0.1mLkg)，然后将其仰卧固定于手术台，沿腹壁中剪开腹腔，在胃大弯靠近胃窦部找到一块纵行肌，近端缝合1针，固定。远端缝合1针，引线连于张力换能器，用台式平衡记录仪，术后1小时开始记录胃运动频率和幅度，初始张力设定为5mV。实验中观察到，所有实验动物未出现溃疡等器质性病变。由上述结果可以，本发明的桑椹酵素能有效地恢复胃正常机械运动，模型动物经治疗后，其胃收缩频率、幅度均明显提高，并能明显增强胃排空及小肠推进功能。当前第1页1 2 3