本发明属于食品加工领域，具体涉及一种从芸薹属蔬菜中提取植物硒蛋白的方法。
背景技术：
芸薹属(Brassica)是十字花科植物中经济价值最大的一个属。此属的植物包括了多种重要的农业及园艺作物，如西兰花、甘蓝、花椰菜、油菜、芥菜、榨菜、大头菜、雪里蕻等。
西兰花是一种很受人们欢迎的蔬菜。西兰花中营养丰富全面，主要包括蛋白质、碳水化合物、脂肪、矿物质、维生素C和胡萝卜素等。据分析，每100克新鲜西兰花的花球中，含蛋白质3.6克，是番茄的4倍。此外，维生素A含量比白菜高100多倍，西兰花中矿物质成也很全面，钙、磷、硒、铁、钾、锌、锰等含量都很丰富。西兰花具有防癌抗癌、增强机体免疫力、增强血管韧性、抗衰老等多种功效，其中最受关注的是其在癌症防治方面的特殊作用。
甘蓝是世界卫生组织推荐的最佳蔬菜之一，被誉为天然“胃菜”。其所含的维生素K1、维生素U，不仅能抗胃溃疡、保护并修复胃黏膜组织，还可保持胃部细胞活跃旺盛，降低病变几率。此外，甘蓝还含有丰富的维生素A、钾、钙和磷等维生素及微量元素。
花椰菜又称花菜，是一种常见蔬菜。它含有丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物、食物纤维、维生素和钙、磷、铁、硒等矿物质。花椰菜是含有类黄酮最多的食物之一。类黄酮除了可以防止感染，还是最好的血管清理剂，能够阻止胆固醇氧化，防止血小板凝结成块，因而减少心脏病与中风的危险。花椰菜中含有吲哚衍生物，具有预防乳腺癌的功效。此外，花椰菜还可以清理血管，增强肝脏解毒能力。
已有不少文献表明，植物硒蛋白在抗肿瘤、抗氧化、缓解疲劳等方面均具有突出的潜力。文献报道，植物中硒的存在形态以有机硒为主，而其中又以硒蛋白为主，约占80％以上。研究表明，西兰花、甘蓝、花椰菜等芸薹属蔬菜对硒元素有较强的富集作用。采用人工富硒栽培技术，可使上述芸薹属蔬菜将无机硒转化为有机硒，植株总硒含量可达数百ppm(DeanA.Kopsell,2001；Silvio J.Ramos,2011)。同时，本类蔬菜对铅、镉等重金属具有较高的富集能力(林君锋，2002；顾燕青，2015)。因此，从西兰花、甘蓝、花椰菜等芸薹属蔬菜中提取硒蛋白，并降低提取产物中的铅、镉等重金属污染物含量，有利于推动芸薹属蔬菜在食品领域的深加工及应用。
技术实现要素：
本发明旨在提供一种芸薹属蔬菜深加工方法，以芸薹属富硒蔬菜为原料，采用碱提醇沉工艺，提取植物硒蛋白，并联合应用树脂技术，脱除提取产物中的重金属，提升农作物附加值。
一种从芸薹属蔬菜中提取植物硒蛋白的方法，具体方案步骤如下：
步骤1：将芸薹属蔬菜干燥至所述蔬菜水份含量质量百分比在5％～10％之间，粉碎成干粉，过20目筛；
步骤2：将芸薹属蔬菜干粉置于质量浓度为0.1％～0.3％的碳酸钠溶液中，料液质量比为1:10～20，于70℃～80℃下进行提取，提取1～3小时，提取后过滤，同一条件下重复提取2～4次，将提取后的滤液合并；
步骤3：用稀盐酸将所述滤液调节至中性滤液，将所述中性滤液浓缩为质量浓度为5％～15％的浓缩液；
步骤4：向所述浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇溶液至浓缩液中乙醇体积分数为75％～85％，静置过夜得醇沉物；
步骤5：将所述醇沉物干燥后溶于纯水得醇沉物溶液，所述醇沉物溶液通过装有胺基羧酸螯合树脂的树脂柱得过柱液，所述醇沉物溶液与胺基羧酸螯合树脂的体积比为15～25:1，醇沉物溶液的过柱流速为1～3BV/h，收集所得过柱液；
步骤6：将所述过柱液浓缩、干燥即得硒蛋白。
所述芸薹属蔬菜为富硒西兰花、富硒花椰菜、富硒甘蓝。
所述步骤2将芸薹属蔬菜干粉置于质量浓度为0.2％的碳酸钠溶液中，料液质量比为1:15，于75℃下进行提取，提取2小时，提取后过滤，同一条件下重复提取3次，将提取后的滤液合并。
所述步骤3用稀盐酸将所述滤液调节至中性滤液，将所述中性滤液浓缩为质量浓度为10％的浓缩液。
所述步骤4将所述浓缩液中加入体积分数为95％乙醇溶液至浓缩液中乙醇体积分数为80％。
所述步骤5中的胺基羧酸螯合树脂型号为LSC-100、HYC-100、DIAION CR11。
所述步骤5中的胺基羧酸螯合树脂型号为LSC-100。
所述步骤5中，所述醇沉物溶液与胺基羧酸螯合树脂的体积比为20:1。
本发明的创新之处在于：
(1)碱性条件提取：采用碳酸钠溶液碱性条件提取芸薹属蔬菜植物硒蛋白，有助于提高硒蛋白的溶解性，促进硒蛋白溶解；
(2)重金属脱除技术：采用胺基羧酸螯合树脂处理提取物水溶液，大大降低铅、镉等重金属含量。
本发明的优点在于：
本发明所公开的一种从芸薹属蔬菜中提取植物硒蛋白的方法，结合了硒蛋白提取工艺与重金属脱除技术，提取步骤简便，提取产物重金属污染物含量低，便于推广至同类食品深加工领域，有利于推动芸薹属蔬菜的应用。
具体实施方式
本发明中，胺基羧酸螯合树脂LSC-100、HYC-100、DIAION CR11及其他试剂购自江南化工有限公司。
实施例1
一种从富硒西兰花中提取植物硒蛋白的方法，具体方案步骤如下：
(1)将富硒西兰花至富硒西兰花中所含水份质量百分比为8％，干燥后的富硒西兰花粉碎成干粉，过20目筛；
(2)将富硒西兰花干粉置于质量浓度为0.2％的碳酸钠溶液中，料液质量比为1:15，于75℃下进行提取，提取2小时，提取后过滤，同一条件下重复提取3次，将提取后的滤液合并；
(3)用稀盐酸将滤液调节至中性滤液，将中性滤液浓缩为质量浓度为5％的浓缩液；
(4)向浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇溶液至浓缩液中乙醇体积分数为80％，静置过夜得醇沉物；
(5)将醇沉物干燥后溶于纯水得醇沉物溶液，醇沉物溶液通过装填预处理后的LSC-100胺基羧酸螯合树脂的树脂柱得过柱液，醇沉物溶液与LSC-100胺基羧酸螯合树脂的体积比为20:1，醇沉物溶液的过柱流速为2BV/h，收集所得过柱液；
(6)将过柱液浓缩、干燥即得硒蛋白。
经检测，本实施例中使用的富硒西兰花干粉、未经树脂处理的西兰花硒蛋白、本实施实例经树脂处理的西兰花硒蛋白各项指标见表1。
表1
表1中，经树脂处理后的西兰花硒蛋白与未经树脂处理的西兰花硒蛋白纯度基本一致，但经树脂处理后的西兰花硒蛋白中重金属铅、镉含量明显下降。
实施例2
一种从富硒花椰菜提取植物硒蛋白的方法，具体方案步骤如下：
(1)将富硒花椰菜干燥至富硒花椰菜中所含水份质量百分比为5％，干燥后的富硒花椰菜粉碎成干粉，过20目筛；
(2)将富硒花椰菜干粉置于质量浓度为0.3％的碳酸钠溶液中，料液质量比为1:20，于80℃下进行提取，提取1小时，提取后过滤，同一条件下重复提取2次，将提取后的滤液合并；
(3)用稀盐酸将滤液调节至中性滤液，将中性滤液浓缩为质量浓度为10％的浓缩液；
(4)向浓缩液中加入体积分数为95％的乙醇溶液至浓缩液中乙醇体积分数为75％，静置过夜得醇沉物；
(5)将醇沉物干燥后溶于纯水得醇沉物溶液，醇沉物溶液通过装填预处理后的HYC-100胺基羧酸螯合树脂的树脂柱得过柱液，醇沉物溶液与HYC-100胺基羧酸螯合树脂的体积比为25:1，醇沉物溶液的过柱流速为3BV/h，收集所得过柱液；
(6)将过柱液浓缩、干燥即得硒蛋白
经检测，本实施例中使用的富硒花椰菜干粉、未经树脂处理的花椰菜硒蛋白、本实施实例经树脂处理的花椰菜硒蛋白各项指标见表2。
表2
表2中，经树脂处理后的花椰菜硒蛋白与未经树脂处理的花椰菜硒蛋白纯度基本一致，但经树脂处理后的花椰菜硒蛋白中重金属铅、镉含量明显下降。
实施例3
一种从富硒甘蓝中提取植物硒蛋白的方法，具体方案步骤如下：
(1)将富硒甘蓝干燥至富硒甘蓝中所含水份质量百分比在10％，干燥后的富硒甘蓝粉碎成干粉，过20目筛；
(2)将富硒甘蓝干粉置于质量浓度为0.1％的碳酸钠溶液中，料液质量比为1:10，于70℃下进行提取，提取3小时，提取后过滤，同一条件下重复提取4次，将提取后的滤液合并；
(3)用稀盐酸将滤液调节至中性滤液，将中性滤液浓缩为质量浓度为15％的浓缩液；
(4)向浓缩液中加入体积分数为95％乙醇溶液至浓缩液中乙醇体积分数为85％，静置过夜得醇沉物；
(5)将醇沉物干燥后溶于纯水得醇沉物溶液，醇沉物溶液通过装填预处理后的DIAION CR11胺基羧酸螯合树脂的树脂柱得过柱液，醇沉物溶液与DIAION CR11胺基羧酸螯合树脂的体积比为15:1，醇沉物溶液的过柱流速为1BV/h，收集所得过柱液；
(6)将过柱液浓缩、干燥即得硒蛋白
表3
表3中，经树脂处理后的甘蓝硒蛋白与未经树脂处理的甘蓝硒蛋白纯度基本一致，但经树脂处理后的甘蓝硒蛋白中重金属铅、镉含量明显下降。。
由实施例可以看出本发明所公开的一种从芸薹属蔬菜中提取植物硒蛋白的方法，在不降低硒蛋白纯度的情况下，提取硒蛋白的重金属污染物含量低，便于推广至同类食品深加工领域，有利于推动芸薹属蔬菜的应用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。