本发明涉及一种防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂,属于饲料添加剂
技术领域:
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背景技术:
:水貂是一种半水栖动物,其体形细长,雄性体长38~42厘米,尾长20厘米,体重1.6~2.2公斤,雌性较小。体毛黄褐色,颌部有白斑,头小,眼圆,耳呈半圆形,稍高出头部并倾向前方,不能摆动。颈部粗短,四肢粗壮,前肢比后肢略短,指、趾间具蹼,后趾间的蹼较明显,足底有肉垫。尾细长,毛蓬松。主要在夜间活动,吃小型啮齿动物,也吃蝼蛄、蛙类和鱼。生活在溪流岸边的洞中或岩石缝间,有些繁殖场饲养水貂取其毛皮。以深棕色皮毛为主。北美水貂的体型大些,现已被引入欧洲皮毛养殖场。水貂的主要商品部分是皮。水貂作为肉食动物,疾病大多来源于食物,腐败的蛋白质饲料,近些年来养殖量的不断扩大,密度的增加也导致疾病泛滥,抗生素的滥用,病药菌耐药越来越严重,乳酸菌作为肉食动物的最佳保健制剂应用越来越广泛。尤其是活性乳酸菌制剂的效果也得到了养殖业的认可。水貂广布于西藏东部地区,以各种啮齿动物为食,因而在控制鼠害方面有着积极作用。水貂皮坚韧轻薄,毛被绒细、丰厚,张幅大,色调淡雅美观,是毛皮中珍贵的高级制裘原料皮。长期以来深受藏族人民喜爱,是主要对外贸易品种之一。水貂大肠杆菌病为一种急性传染病,是由大肠杆菌引起的。本病多为自发感染,即肠道内的大肠杆菌在水貂机体抵抗力下降时会迅速繁殖,产生毒力,引发致病。该病在发病初期多表现为食欲减退,精神不佳,体温升高,鼻镜干燥,粪便稀软呈黄色或灰色,继而出现下痢,水样腹泻及血便,四肢无力,体质虚弱,弯腰弓背,肛门周围粪便污染严重。水貂尤其是幼貂食物摄入营养不足,卫生欠佳,很容易患此病。采用传统的口服、注射抗生素的方法防治该病,虽然可以起到一定的效果,但容易引起较强的抗药性,且损害水貂自身免疫力,影响其正常生长发育。技术实现要素:本发明的目的在于提供一种防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂。该饲料添加剂采用天然中草药和食材制成,安全无毒副作用,可以快速有效治疗水貂大肠杆菌病,产品直接添加入饲料中方便水貂采食,在针对病因病症治疗该病的同时,可以在补充幼貂身体所需维生素、矿物质等营养物质,增强其体质,提高自身免疫力的,促进水貂康复,减轻该病对貂正常生长发育的影响,降低死亡率,保障养殖户的利用。为解决上述技术问题,本发明采用以下技术方案:防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂,由以下重量份的原料制备而成:黄芩20~30份、杭白菊20~30份、连翘20~30份、十六酸异丙酯0.01~0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.001~0.01份、当归20~30份。优选由以下原料及其重量份数组成:黄芩25份、杭白菊25份、连翘25份、十六酸异丙酯0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.01份、当归25份。优选由以下原料及其重量份数组成:黄芩30份、杭白菊20份、连翘20份、十六酸异丙酯0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.01份、当归30份。上述饲料添加剂,将原料粉碎磨成粉末,采用水煎醇沉法提取,再经旋转蒸发提取获得。水煎醇沉法包括以下步骤:1、按重量份数称取黄芩、杭白菊、连翘、十六酸异丙酯0.01~0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.001~0.01份、当归,按质量体积比1:4加水浸泡0.5h,之后加热1h水温保持在100℃,过滤;2、滤渣再按质量体积比1:4加水,直接加热1h,温度依然保持在100℃,过滤,重复两次;3、将所获得的滤液合并,放在3000r/min的离心机上离心1h;再取上清液于旋转蒸发仪上提取,加入95%酒精,使混合液乙醇浓度达80%,静置24h,旋转蒸发回收酒精至药液浓度为1g/mL;115℃高压灭菌20min,-20℃保存备用。上述饲料添加剂的使用方法,将添加剂按50~150mL药液/kg饲料拌入基础饲料投喂。针对水貂大肠杆菌病缺乏安全有效药物的问题,本发明采用纯中药制成,配方合理,绿色纯天然,有效性高。具体方析如下:黄芩是唇形科植物黄芩的干燥根,是常用中草药,其味苦,性寒,具有清热燥湿、泻火解毒、抗菌作用;杭白菊为菊科草本植物,也是我国的重要药材,杭白菊味甘苦,性微寒,含有的杭白菊总黄酮具有抗菌、抗病毒、抗氧化、降血脂、抗肿瘤等功能,能提高鸭的免疫力;连翘的根(连翘根)、茎叶(连翘茎叶)亦供药用,连翘性味苦,凉,具有清热,解毒,散结,消肿的功效;当归含有挥发油和有机酸等成分,其根可入药,是最常用的中药之一。具有补血止血,调经止痛,润燥滑肠、抗癌、抗老防老、免疫之功效。本发明所用原料来源于纯天然药物,具有来源广、起效快、无毒副作用、低残留、防治效果良好等优点。经实验证明,在易发病的时间针对性的使用本发明的添加剂,可有效预防罗非鱼链球菌病的发生。具体实施方式实施例1防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂的制备表1防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂配方,由以下重量份的原料制备而成:序号黄芩杭白菊连翘当归120302030225252525320303020425302025520253025参考表1的配方,取中草药原料分别制备配方一至五的添加剂,先将中草药原料粉碎磨成粉末,采用水煎醇沉法提取,再经旋转蒸发提取获得,具体如下:1、按重量份数称取黄芩、杭白菊、连翘、十六酸异丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、当归,按质量体积比1:4加水浸泡0.5h,之后加热1h水温保持在100℃,过滤;2、滤渣再按质量体积比1:4加水,直接加热1h,温度依然保持在100℃,过滤,重复两次;3、将所获得的滤液合并,放在3000r/min的离心机上离心1h;再取上清液于旋转蒸发仪上提取,加入95%酒精,使混合液乙醇浓度达80%,静置24h,旋转蒸发回收酒精至药液浓度为1g/mL;115℃高压灭菌20min,-20℃保存备用。少量的十六酸异丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯混合后,能与植物原料结合,起到一定的广谱抑菌杀菌作用,特别适合抑制大肠杆菌。上述饲料添加剂的使用方法,将添加剂按50~150mL药液/kg饲料拌入基础饲料投喂。实施例2防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂的制备表1防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂配方,由以下重量份的原料制备而成:序号黄芩杭白菊连翘当归125302030225252525320302520425302025520253025参考表1的配方,取中草药原料分别制备配方一至五的添加剂,先将中草药原料粉碎磨成粉末,采用水煎醇沉法提取,再经旋转蒸发提取获得,具体如下:1、按重量份数称取黄芩、杭白菊、连翘、十六酸异丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、当归,按质量体积比1:4加水浸泡0.5h,之后加热1h水温保持在100℃,过滤;2、滤渣再按质量体积比1:4加水,直接加热1h,温度依然保持在100℃,过滤,重复两次;3、将所获得的滤液合并,放在3000r/min的离心机上离心1h;再取上清液于旋转蒸发仪上提取,加入95%酒精,使混合液乙醇浓度达80%,静置24h,旋转蒸发回收酒精至药液浓度为1g/mL;115℃高压灭菌20min,-20℃保存备用。上述饲料添加剂的使用方法,将添加剂按50~150mL药液/kg饲料拌入基础饲料投喂。实施例3防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂的制备表1防治水貂大肠杆菌病的饲料添加剂配方,由以下重量份的原料制备而成:序号黄芩杭白菊连翘当归125302030225252525320303025425302525530253025参考表1的配方,取中草药原料分别制备配方一至五的添加剂,先将中草药原料粉碎磨成粉末,采用水煎醇沉法提取,再经旋转蒸发提取获得,具体如下:1、按重量份数称取黄芩、杭白菊、连翘、十六酸异丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、当归,按质量体积比1:4加水浸泡0.5h,之后加热1h水温保持在100℃,过滤;2、滤渣再按质量体积比1:4加水,直接加热1h,温度依然保持在100℃,过滤,重复两次;3、将所获得的滤液合并,放在3000r/min的离心机上离心1h;再取上清液于旋转蒸发仪上提取,加入95%酒精,使混合液乙醇浓度达80%,静置24h,旋转蒸发回收酒精至药液浓度为1g/mL;115℃高压灭菌20min,-20℃保存备用。上述饲料添加剂的使用方法,将添加剂按50~150mL药液/kg饲料拌入基础饲料投喂。实施例4抑菌试验1、实验菌种:大肠埃希氏菌(ATCC25922)2、菌种培养基:营养琼脂培养基和营养肉汤培养基。3、抑菌实验分三个实验组和一个对照组,实验组分别使用实施例1至3的饲料添加剂浸出液,其中,实验组A为实施例1的浸出液,实验组B为实施例2的浸出液,实验组C为实施例3的浸出液,对照组使用生理盐水。4、具体实验步骤:1)饲料添加剂浸出液的制备:将实施例1至3的饲料添加剂各10g分别放入50ml蒸馏水中浸泡2小时后过500目筛过滤,分别得到3种饲料添加剂的浸出液;2)药敏感片制备:双圈牌定性滤纸用打孔器制成直径6mm的圆纸片放入清洁干燥的青霉素空瓶中,瓶口以单层牛皮纸包扎,121℃高压灭菌30min,再经100℃烘干,密闭保存备用。在无菌条件下分别将纸片浸泡于实施例1至3的饲料添加剂浸出液和生理盐水中2h后,取出滤纸片,室温下晾干制成药敏片备用,每种药物各制备5片药敏感片;3)制备菌液:大肠埃希氏菌置于10ml营养肉汤培养基中,37℃培养18h;取培养液1ml加入9ml的0.9%无菌氯化钠溶液,采用10倍递增稀释法,将菌液分别稀释至105~106cfu/ml,备用;4)将上述步骤3)制得的菌液均匀接种于甘露醇氯化钠琼脂平板上,室温下静置5min,将步骤2)中制得的20片药敏感片平铺在大肠埃希氏菌接种的琼脂平板上,将平板倒置放入培养箱中37℃培养24h后,测量各药敏片的抑菌圈直径(mm),计算各组的抑菌圈直径平均值,以上操作均为无菌操作。5、试验观察测量:观察:无抑菌圈以“-”表示;抑菌圈直径<10mm为轻度抑菌,以“+”表示;抑菌圈直径10~14mm为中度抑菌,以“++”表示;抑菌圈直径>14mm为高度抑菌,以“+++”表示;对照组实验组A实验组B实验组C大肠埃希菌-++++++++实验结果表明,本发明的饲料添加剂对水貂大肠杆菌病的致病菌具有较强的的抑制作用,可起到较好的杀菌抑菌,可起到防治该病的效果。实施例4应用实施例,选择了40只患有大肠杆菌病的水貂进行试验,患貂表现为食欲不振,精神不佳,体温升高,鼻镜干燥,粪便稀软呈黄色或灰色,多少出现下痢,水样腹泻及血便,肛门周围粪。将患貂随机均分为3个实验组和1个对照组,实验组1至3分别使用实施例1至3的饲料添加剂,在水貂日常饲料中添加本发明的饲料添加剂饲喂水貂,所述饲料添加剂在水貂饲料中的添加量为2。5wt%,对照组水貂饲喂正常饲料,饲喂5天后,统计幼貂死亡率,并观察该饲料添加剂的疗效,疗效评价标准如下:痊愈:临床症状消失,采食和精神恢复正常;好转:临床症状减轻,食欲和精神有所恢复;无效:病症无变化,或加重,或幼貂死亡。实验结果统计如下:对照组实验1组实验2组实验3组治愈(只)0467好转(只)0443无效(只)10200有效率(%)080100100死亡率(%)80000由以上实验结果可以看出,本发明的饲料添加剂可以有效治疗水貂大肠杆菌病,所有患貂在使用期间均无不良反应,即该饲料添加剂配方安全有效。当前第1页1 2 3