本发明属于保健品技术领域，特别涉及一种海灵参椰子水口服液及制备工艺。
背景技术：
椰子水是存在于椰子果实腔内的一种天然果汁，是椰子果在发育成熟过程中形成果肉的物质基础，富含多种营养素。研究表明，椰子水含有人体所需的17种氨基酸，必需氨基酸种类齐全，营养丰富；椰子水蛋白质中的精氨酸、丙氨酸、胱氨酸和丝氨酸的含量比牛奶还高；椰子水中的矿物质有na、k、ca、fe、mg、
cu、s、p和几种能使高等植物的成熟细胞迅速而不规则分裂从而刺激植物生长的活性物质。而且椰子水还具有医药价值，可以治疗胃功能紊乱、痢疾和儿童营养不良，具有解毒、抗菌消炎、驻颜美容、促消化和利尿等功能，对肾结石和尿道结石有一定疗效，还具有明目健胃醒酒和降压止血的功效，是一种营养和保健价值很高的天然饮料。
椰子水经发酵可制椰果、椰子酒、椰子醋等多种产品,或经加热、过滤、杀菌等过程制成饮料。椰果是以椰子水为主要原料,通过微生物的作用,由培养液表面长出一种乳白色凝胶状厚膜,经加工后制成的罐头类食品,口感脆滑细嫩而有弹性,产品独具特色。菲律宾已研制出椰子酒,并进行商业化生产;此外,用椰子水制醋也有小到中等规模的商业生产。海南的天然椰子王酒即采用天然响水椰子的果体作包装,其酒质醇和细腻,酒味天然清香纯正,饮完果体里的酒液,破开硬壳里的果体,芳香嫩白的果肉既可直接食用。
目前的椰子水饮料由于含有丰富的营养物质和某些生长激素,又是微生物生长最适合的培养液,极易受微生物感染而变质。因此以通过椰子水发酵并配以名贵的中药材的主要活性成分提取物制备增强人体免疫力、抗氧化、降血糖等功能保健品，可以达到椰子水的长期保存饮用同时具有保健功能。
海马活性成分丰富，含有甾体类、蛋白质、脂肪酸类、磷脂类等，其中蛋白质含量高达67.90%～73.56%(干重)，海马多肽为海马蛋白质酶解的产物，具有清除自由基、温肾壮阳、延缓衰老、抗疲劳、抗肿瘤、抗炎等活性。同等条件下抗氧化能力是抗氧化剂维生素c的4.73倍。灵芝多糖是灵芝的主要活性成分，存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中，具有抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗肿瘤、提高免疫力、降血脂、降血糖等作用。太子参多糖是太子参的主要活性成分之一，具有抗脂质过氧化、增强免疫、抗应激、抗疲劳，抗炎作用等作用。
技术实现要素：
本发明提供一种海灵参椰子水口服液及制备工艺，以天然椰子水为原料，经发酵、离心、过滤得澄清发酵椰子水。在发酵椰子水中添加海马多肽、灵芝多糖和太子参多糖，再配以姜油、阿拉伯胶、冰糖等，制成海灵参椰子水发酵复配原液，以此无菌灌装制备海灵参椰子水口服液。
本发明的技术方案为：
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，步骤包括：
1）选取成熟的椰子打孔取水，加入50～90ppm二氧化硫，过滤除去固形物，加入酵母发酵3～5d，3000～5000r/min离心取上清液，过滤，得澄清椰子水发酵液；
2）在澄清椰子水发酵液中依次加入浓度为1～10g·l-1的阿拉伯胶和10～50g·l-1的冰糖搅拌20min，然后依次加入浓度为100～700mg·l-1的灵芝多糖和50～600mg·l-1的太子参多糖搅拌10min，再依次加入的5～20mg·l-1姜油和70～300mg·l-1的海马多肽搅拌5min，无菌灌装，得海灵参椰子水口服液。
步骤1）中，所述的酵母为果酒酵母或葡萄酒酵母，用量优选为椰子水质量的5%。
步骤1）中，所述的发酵温度优选为28～30℃。
步骤1）中，所述的过滤，优选为采用微滤膜过滤。
步骤2）中，所述的海马多肽，分子量为0.43-2.78kda；制备方法优选为将40目海马冻干粉按照gb/t9695.7-2008方法使用索氏提取器进行脱脂处理，脱脂条件为：提取剂60~90℃石油醚，水浴温度65℃，料液比1:8，时间4h；脱脂处理的海马粉2g加超纯水30ml，95℃水浴加热10min，调节ph值至10，加入e/s为6%的碱性蛋白酶51℃酶解5h，然后90℃水浴加热15min后，冷却至室温，调节ph值至7，超纯水定容至50ml，离心取上清液，浓缩至25mg/ml；采用湿法自然沉降法装填sephadexg25凝胶柱，超纯水洗脱，洗脱流速0.4ml/min，收集45～55min的洗脱液，冻干，得海马多肽。
步骤2）中，所述的灵芝多糖，分子量小于5kda，纯度大于90%，蛋白质含量小于1%，灰分小于1%；优选以赤灵芝、紫灵芝、黑灵芝和黄灵芝中的至少一种为原料，经提取、浓缩过柱制得。
步骤2）中，所述的太子参多糖，分子量小于5kda，纯度大于80%，灰分小于1%。
本发明方案还包括一种上述方法制备得到的海灵参椰子水口服液。
所述的海灵参椰子水口服液，酒精含量小于1vol。
本发明海灵参椰子水口服液，在制备过程中添加了灵芝多糖、太子参多糖、海马多肽（窄分子量），同时添加了姜油、阿拉伯胶和冰糖，姜油具有与海马多肽协同促进药效的作用；阿拉伯胶主要起到乳化、增加口感的作用；冰糖具有甜味、增加口感舒适度，同时调节浓度起到口服液稳定性的作用。制备得到的海灵参椰子水口服液，具有明显的提高免疫力、清除人体自由基、增强肾功能、延缓衰老等功能，不但最大限度的利用了椰子水的营养物质，同时克服了椰子水不能长期保存的缺陷。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行进一步说明，下述说明仅是示例性的，并不对其内容进行限定。
下述实施例中采用的原料：海马多肽，为0.43-2.78kda；制备方法为将40目海马冻干粉按照gb/t9695.7-2008方法使用索氏提取器进行脱脂处理，脱脂条件为：提取剂60~90℃石油醚，水浴温度65℃，料液比1:8，时间4h；脱脂处理的海马粉2g加超纯水30ml，95℃水浴加热10min，调节ph值至10，加入e/s为6%的碱性蛋白酶51℃酶解5h，然后90℃水浴加热15min后，冷却至室温，调节ph值至7，超纯水定容至50ml，离心取上清液，浓缩至25mg/ml；采用湿法自然沉降法装填sephadexg25凝胶柱，超纯水洗脱，洗脱流速0.4ml/min，收集45～55min的洗脱液，冻干，得海马多肽。灵芝多糖，分子量小于5kda，纯度大于90%，蛋白质含量小于1%，灰分小于1%；以赤灵芝、紫灵芝、黑灵芝和黄灵芝中的至少一种为原料，经提取、浓缩过柱制得。太子参多糖，分子量小于5kda，纯度大于80%，灰分小于1%；通过太子参提取、浓缩过柱制备。
实施例1
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，步骤为：
1）选取成熟的椰子打孔取水，加入50ppm二氧化硫，纱布过滤除去固形物，加入椰子水质量的5%的果酒酵母28℃发酵5d，3000r/min离心取上清液，微滤膜过滤，得澄清椰子水发酵液；
2）在澄清椰子水发酵液中依次加入浓度为3g·l-1的阿拉伯胶和25g·l-1的冰糖搅拌20min，然后依次加入浓度为700mg·l-1的灵芝多糖和50mg·l-1的太子参多糖搅拌10min，再依次加入的5mg·l-1姜油和70mg·l-1的海马多肽搅拌5min，无菌灌装，得15ml/支海灵参椰子水口服液。
酒精含量0.6vol，保存6个月后，颜色透亮澄清，无悬浮物、无沉淀。
实施例2
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，步骤为：
1）选取成熟的椰子打孔取水，加入70ppm二氧化硫，纱布过滤除去固形物，加入椰子水质量的5%的果酒酵母或葡萄酒酵母28～30℃发酵4d，4000r/min离心取上清液，微滤膜过滤，得澄清椰子水发酵液；
2）在澄清椰子水发酵液中依次加入浓度为6g·l-1的阿拉伯胶和30g·l-1的冰糖搅拌20min，然后依次加入浓度为400mg·l-1的灵芝多糖和300mg·l-1的太子参多糖搅拌10min，再依次加入的10mg·l-1姜油和150mg·l-1的海马多肽搅拌5min，无菌灌装，得海灵参椰子水口服液，
酒精含量0.4vol，保存6个月后，颜色透亮澄清，无悬浮物、无沉淀。
实施例3
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，步骤为：
1）选取成熟的椰子打孔取水，加入90ppm二氧化硫，过滤除去固形物，加入椰子水质量的5%的果酒酵母或葡萄酒酵母28～30℃发酵3d，5000r/min离心取上清液，微滤膜过滤，得澄清椰子水发酵液；
2）在澄清椰子水发酵液中依次加入浓度为1～10g·l-1的阿拉伯胶和10～50g·l-1的冰糖搅拌20min，然后依次加入浓度为100mg·l-1的灵芝多糖和600mg·l-1的太子参多糖搅拌10min，再依次加入的20mg·l-1姜油和300mg·l-1的海马多肽搅拌5min，15ml/支无菌灌装，得海灵参椰子水口服液。
酒精含量0.5vol，保存6个月后，颜色透亮澄清，无悬浮物、无沉淀。
对比例1
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，不添加姜油，其余步骤同实施例1。
对比例1产品酒精含量1.2vol，保存3个月后，开始有沉淀产生，粘稠。可以看出，本发明制备的口服液，保质期限至少延长了3个月。
对比例2
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，不添加海马多肽，其余步骤同实施例1。
酒精含量0.6vol，保存6个月后，颜色透亮澄清，无悬浮物、无沉淀。
对比例3
一种海灵参椰子水口服液制备工艺，采用分子量为大于10kda的海马多肽，其余步骤同实施例1。海马多肽制备方法为收集35～45min的洗脱液。
酒精含量0.6vol，保存6个月后，颜色透亮澄清，无悬浮物、无沉淀。
实施例1～3与对比例1～3口服液活性分析
1、dpph自由基清除率的测定
取1ml样品溶液与1ml50mmol/l的dpph无水乙醇溶液混匀，25℃避光水浴30min，测定其在517nm波长下的吸光度。按照下式计算样品液的清除率。
2、超氧阴离子清除率的测定
分别取1.5ml50mmol/l的tris-hcl缓冲液（ph8.2）、0.1ml样品溶液和0.1ml45mmol/l的邻苯三酚迅速混匀，立即在325nm波长下，每隔30s读取吸光度，并以时间为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸光度的变化曲线，计算吸光度的变化率f1。以超纯水代替样品作对照，计算吸光度的变化率。按照下式计算样品液的清除率。
3、羟自由基清除率的测定
向25ml容量瓶中分别加入3.5ml0.02mmol/l的结晶紫溶液、2.5ml5mmol/l的feso4溶液、1.0ml1%的h2o2溶液和2.5mltris-hcl缓冲液（ph5.5），混匀后用超纯水定容后摇匀，静置5min后，再加入1.25ml样品溶液，静置10min后，在588nm波长处测定其吸光度a2。按照下式计算样品液的清除率。
4、上述dpph自由基清除率、超氧阴离子清除率、羟自由基清除率，具体结果见表１。
表１