本发明属于饲料
技术领域：
，具体涉及一种增强冬日牛羊免疫力的饲料及其制备方法。
背景技术：
：我国北方农作物大多是一季一熟的，因此秋冬季就会出现草饲料缺乏的现象，特别是鲜青草饲料。牧民多数以干草饲喂，但是干草饲料极大地降低了草饲料的营养成分和适口性。通过青贮加工，做成的青贮饲料青鲜适口，不仅提高了饲草的营养价值，扩大了饲料的来源，又解决了秋冬饲草匮乏的困扰。另外，多种农作物收割后，大量的茎叶材料被焚烧，这种做法既浪费资源，又污染环境，一定程度上影响了经济社会的可持续发展。将青草饲料青贮后饲喂牲畜，既可以降低饲料成本，还可以使秸秆通过牲畜粪便实现过腹还田，促进农业良性循环，是一种效益较高的利用方式。另一方面，由于全球气候变暖，极端天气越来越多，冬天气温也越来越低，牛羊发病的机会也在不断增加，养殖户为了预防牛羊在冬日可能感染疾病，在饲料中普遍加入抗生素。但由于饲料中添的抗生素药物会导致抗药菌株产生、牛羊产生耐药性，这就使疾病的防治更加困难；同时药物残留也影响人们的身体健康。随着人们生活水平的不断提高，对食品安全也越来越重视。然而目前具有提高牛羊免疫功效的健康绿色饲料种类少，而且成本较高，因此，开发新型的提高牛羊免疫力的饲料，以减少抗生素等药物的使用，同时解决牛羊肉中药物残留问题显得越来越迫切。目前已经有文献对中草药作为饲料添加剂的作用机理和应用效果做了相关介绍，但使用附子和甘草副产物作为添加剂的技术还未见报道。附子作为传统中药材，具有回阳救逆，补火助阳，散寒止痛等的作用。目前的研究结果表明，附子水煎剂能够显著降低免疫性肝损伤大鼠血清中的alt、ast、tbil，明显减轻肝脏的损伤；另外，大黄附子汤能够明显的抑制balb/c小鼠腹腔巨噬细胞中lps诱导的no、细胞因子il-6、tnf-α的合成，降低mda含量，提高sod的酶活力，从而提高balb/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫及抗氧化功能。已有研究证实，附子茎叶中的有效成分含量仅略低于根中的含量。技术实现要素：为了解决现有技术中存在的秋冬牛羊饲草匮乏、干草饲料的营养成分和适口性差、为提高牛羊免疫能力在饲料中滥加抗生素的问题，本发明提供了一种增强冬日牛羊免疫力的饲料及其制备方法。本发明要解决的技术问题通过以下技术方案实现：一种增强冬日牛羊免疫力的饲料，由下述质量份的组分制备而成：附子副产物28～32份，干姜18～22份，甘草副产物28～32份，茯苓4～6份，白术4～6份，山楂8～12份，米糠10～14份、大青叶8～10份，马克斯克鲁维酵母4～6份，乳酸菌发酵剂2～3份，麦麸30～35份，玉米皮30～35份。进一步地，所述附子副产物为附子的茎、叶；所述甘草副产物为甘草的茎、叶。上述的增强冬日牛羊免疫力的饲料的制备方法，包括以下步骤：步骤1，将28～32份附子副产物即附子茎、叶和28～32份甘草的副产物即甘草的茎、叶切碎、混合，形成混合物a；步骤2，在混合物a中掺入2～3份乳酸菌发酵剂和10～14份米糠，形成混合物b；步骤3，待混合物b的含水量为65％～70％时，将混合物b放入青贮窖中青贮，得到青贮饲料；步骤4，将青贮饲料与18～22份干姜、4～6份茯苓、4～6份白术、8～12份山楂、8～10份大青叶等混匀粉碎，过100目筛，放入发酵罐中，加足量的水使之没过原料，再加入4～6份马克斯克鲁维酵母，30℃条件下发酵；步骤5，将30～35份麦麸和30～35份玉米皮将入到发酵罐中，并不断搅拌，使其充分润湿，得到中药饲料混合物；步骤6，将得到的中药饲料混合物投入造粒机中进行造粒，烘干，即得本发明的饲料。进一步地，所述步骤1中切碎是指切碎至长度为2～3mm。进一步地，所述步骤3中青贮的具体操作为：将混合物b放入青贮窖中，逐层平摊填装，同时踩实，每装30cm踩实一次，整个窖尽量一天装满，充分压实后用塑料布封严窖口，上面压40kg左右的泥土，在前几天原料下沉后及时将泥土的裂缝封严；青贮时间为20天。进一步地，所述步骤5中充分润湿是指含水量达到70％。进一步地，所述步骤6中粒径为3～5mm。与现有技术相比，本发明的有益效果：(1)通过将附子和甘草副产物青贮，不仅减少资源浪费，还能有效解决秋冬季节饲草料匮乏的难题；同时通过青贮加工，做成的青贮饲料青鲜适口，还提高了饲草的营养价值；(2)通过用马克斯克鲁维酵母发酵可以显著增加饲料的适口性；(3)由本发明的原料配比制备而成的饲料，能显著增强牛羊的免疫力，降低冬日牛羊发病率，并在一定程度具有治愈的功效；更重要的一个优点是减少牛羊肉中抗生素和激素的含量，更有利于人们食用，且肉质口感更好；(4)通过添加与青贮饲料等量的麦麸和玉米皮，使本发明的饲料可以充当牛羊的整日喂食饲料，解决了青贮饲料营养含量低，只能充当喂食量30％的难题。附图说明图1是饲喂实施例1的饲料的小鼠与饲喂普通饲料的小鼠的脾脏指数对比图。图2是饲喂实施例1的饲料的小鼠与饲喂普通饲料的小鼠的胸腺指数对比图。图3是饲喂实施例1的饲料的小鼠与饲喂普通饲料的小鼠的白细胞计数对比图。图4a是饲喂实施例2的饲料的山羊与饲喂普通饲料的山羊血清中免疫球蛋白iga对比图。图4b是饲喂实施例2的饲料的山羊与饲喂普通饲料的山羊血清中免疫球蛋白igg对比图。图4c是饲喂实施例2的饲料的山羊与饲喂普通饲料的山羊血清中免疫球蛋白igm对比图。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。实施案例1：一种增强冬日牛羊免疫力的饲料，由下述质量份的组分制备而成：附子副产物30份，干姜20份，甘草副产物30份，茯苓5份，白术5份，山楂10份，米糠12份、大青叶10份，马克斯克鲁维酵母4份，乳酸菌发酵剂2份，麦麸30份，玉米皮30份。一种增强冬日牛羊免疫力的饲料的制备方法，包括如下步骤：步骤1，将30份附子副产物即附子茎，叶和30份甘草的副产物即甘草的茎、叶切碎，长度约为2-3cm，混合后形成混合物a。步骤2，在混合物a中掺入2份乳酸菌发酵剂和12份米糠，形成混合物b。步骤3，待混合物b的含水量为65％～70％时，将混合物b放入青贮窖中青贮，得到青贮饲料；检测其含水量时，可以手抓切碎的混合物b茎叶，用双手握紧，若没有水滴从指缝中滴出，但松开后手掌中有些许水珠，说明含水量适合青贮；也可以采用仪器检测其含水量。青贮的具体操作为：将混合物b放入青贮窖中，逐层平摊填装，同时踩实，每装30cm踩实一次，整个窖尽量一天装满，充分压实后用塑料布封严窖口，上面压40kg左右的泥土，在前几天原料下沉后及时将泥土的裂缝封严；青贮20天。步骤4，20天后，取出青贮饲料，与干姜20份、茯苓5份、白术5份、山楂10份、大青叶10份等混匀粉碎，过100目筛，放入发酵罐中，加足量的水，再加入4份马克斯克鲁维酵母，30℃条件下发酵。步骤5，将30份麦麸和30份玉米皮依次加入到发酵罐中，并不断搅拌，使其充分混匀润湿，得到中药饲料混合物；润湿程度以其含水量为70％为宜，含水量可以通过手抓起中药饲料混合物一捏能挤出几滴水珠来观察，也可以通过仪器检测。步骤6，将得到的中药饲料混合物投入造粒机中进行造粒，粒径控制在3～5mm，烘干，即得本发明的饲料。实施例2：一种增强冬日牛羊免疫力的饲料，由下述质量份的组分制备而成：附子副产物28份，干姜18份，甘草副产物28份，茯苓4份，白术4份，山楂8份，米糠12份、大青叶8份，马克斯克鲁维酵母6份，乳酸菌发酵剂3份，麦麸32份，玉米皮32份。一种增强冬日牛羊免疫力的饲料的制备方法，包括如下步骤：步骤1，将28份附子副产物即附子茎，叶和28份甘草的副产物即甘草的茎、叶切碎，长度约为2-3cm，混合后形成混合物a。步骤2，在混合物a中掺入3份乳酸菌发酵剂和12份米糠，形成混合物b。步骤3，待混合物b的含水量为65％～70％时，将混合物b放入青贮窖中青贮，得到青贮饲料；检测其含水量时，可以手抓切碎的混合物b茎叶，用双手握紧，若没有水滴从指缝中滴出，但松开后手掌中有些许水珠，说明含水量适合青贮；也可以采用仪器检测其含水量。青贮的具体操作为：将混合物b放入青贮窖中，逐层平摊填装，同时踩实，每装30cm踩实一次，整个窖尽量一天装满，充分压实后用塑料布封严窖口，上面压40kg左右的泥土，在前几天原料下沉后及时将泥土的裂缝封严；青贮20天。步骤4，20天后，取出青贮饲料，与干姜18份、茯苓4份、白术4份、山楂8份、大青叶8份等混匀粉碎，过100目筛，放入发酵罐中，加足量的水，再加入6份马克斯克鲁维酵母，30℃条件下发酵。步骤5，将32份麦麸和32份玉米皮依次加入到发酵罐中，并不断搅拌，使其充分混匀润湿，得到中药饲料混合物；润湿程度以其含水量为70％为宜，含水量可以通过手抓起中药饲料混合物一捏能挤出几滴水珠来观察，也可以通过仪器检测。步骤6，将得到的中药饲料混合物投入造粒机中进行造粒，粒径控制在3～5mm，烘干，即得本发明的饲料。实施例3：一种增强冬日牛羊免疫力的饲料，由下述质量份的组分制备而成：附子副产物32份，干姜22份，甘草副产物32份，茯苓6份，白术6份，山楂12份，米糠11份、大青叶9份，马克斯克鲁维酵母5份，乳酸菌发酵剂2.5份，麦麸35份，玉米皮35份。一种增强冬日牛羊免疫力的饲料的制备方法，包括如下步骤：步骤1，将32份附子副产物即附子茎，叶和32份甘草的副产物即甘草的茎、叶切碎，长度约为2-3cm，混合后形成混合物a。步骤2，在混合物a中掺入2.5份乳酸菌发酵剂和11份米糠，形成混合物b。步骤3，待混合物b的含水量为65％～70％时，将混合物b放入青贮窖中青贮，得到青贮饲料；检测其含水量时，可以手抓切碎的混合物b茎叶，用双手握紧，若没有水滴从指缝中滴出，但松开后手掌中有些许水珠，说明含水量适合青贮；也可以采用仪器检测其含水量。青贮的具体操作为：将混合物b放入青贮窖中，逐层平摊填装，同时踩实，每装30cm踩实一次，整个窖尽量一天装满，充分压实后用塑料布封严窖口，上面压40kg左右的泥土，在前几天原料下沉后及时将泥土的裂缝封严；青贮20天。步骤4，20天后，取出青贮饲料，与干姜22份、茯苓6份、白术6份、山楂12份、大青叶9份等混匀粉碎，过100目筛，放入发酵罐中，加足量的水，再加入5份马克斯克鲁维酵母，30℃条件下发酵。步骤5，将30份麦麸和30份玉米皮依次加入到发酵罐中，并不断搅拌，使其充分混匀润湿，得到中药饲料混合物；润湿程度以其含水量为70％为宜，含水量可以通过手抓起中药饲料混合物一捏能挤出几滴水珠来观察，也可以通过仪器检测。步骤6，将得到的中药饲料混合物投入造粒机中进行造粒，粒径控制在3～5mm，烘干，即得本发明的饲料。下面通过具体的检测实验对本发明的饲料的功效进行详细说明。青贮饲料和饲料成品的质量检测：一、青贮产物品质检测采用农业部颁布的青贮饲料质量评定标准进行，饲料品质评价检测结果见表1。表1青贮饲料质量评价项目、标准和评分结果由以上结果我们可以看出，本发明的青贮饲料的ph值较为适合乳酸菌的生长，而对杂菌的生长不利，说明发酵条件适宜。饲料的含水率在正常范围内，过高或过低都不利于发酵。青贮出的饲料气味甘酸香，色泽鲜亮，有利于增强牛羊的食欲。以上结果表明本发明的青贮饲料的品质优良，可以用作后续发酵的材料。二、对发酵前青贮饲料及发酵后饲料中的中药有效成分含量进行检测1.附子中生物碱含量测定按照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部)测定方法进行检测，以phenomenexrp-c18色谱柱为固定相，流动相为两相洗脱(a泵：0.1％二乙胺的超纯水；b泵：乙腈)，梯度洗脱条件：0～5min，b28％；5～12min，b28％～35％；12～35min，b35％～46％；35～45min，b46％～55％；45～50min，b55％～56％；50～65min，b56％。柱温25℃，流速1.0ml/min，进样量为20μl，紫外检测波长为230nm。检测结果如表2。表2发酵前后附子中生物碱含量(μg/mg)附子中双酯型乌头碱的毒性很强，特别是乌头碱，炮制能去掉部分毒性，但依旧有毒，熟附片的水煎剂对小鼠的半数致死量口服为17.42g/kg，静注为3.516g/kg。附子副产物中双酯型乌头碱的含量比附子中略低。而且，附子与甘草或者干姜同煮时附子的毒性就会大幅降低。由表2结果可以看出，发酵之后附子的双酯型乌头碱的含量显著降低，而且显著低于安全水平。同时，经过发酵，附子有效成分单酯型乌头碱的含量增加，更有利于饲料发挥作用。2.甘草中甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草次酸和甘草查尔酮的检测采用高效液相色谱法进行测定，色谱条件为：agilentxdb-c18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相乙腈(a)-0.1％磷酸水溶液(b)梯度洗脱(0～20min，90％～68％b；20～45min，68％～30％b；45～75min，30％～5％b)，流速1.0ml·min-1，柱温室温，进样10μl，检测波长(0min，275nm；32min，250nm；33.5min，300nm；34.5min，360nm；53min，280nm；55min，270nm；57.5min，265nm)。测定结果见表3。表3发酵前后甘草中各有效成分测定结果(mg/μg)甘草为豆科植物，其有效成分主要有：三萜类化合物(甘草次酸等)、黄酮类化合物(甘草素等)和甘草多糖类化合物。研究表明，甘草中的甘草酸，甘草次酸对糖皮质激素的作用具有离解作用；甘草次酸对对大鼠棉球肉芽肿、皮下肉芽肿性炎症具抑制作用；甘草酸能促进抗体的分泌，对河豚毒、蛇毒等有解毒效力，还有抗病毒的作用。通过对青贮之后的甘草进行发酵发现，发酵后甘草中的各有效成分的含量有不同程度的增加，因此更有利于饲料发挥提高机体免疫力的作用。3.大青叶中有效成分测定按照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部)测定方法进行检测，以phenomenexrp-c18色谱柱为固定相，乙腈-水为流动相，洗脱程序(b为乙腈)：0～20min，8％～20％b；20～25min，20％～40％b；保持5min，30～55min，40％～90％b，保持10min，流速1.0ml/min，柱温30℃，进样10μl，检测波长225nm。测定结果见表4。表4发酵前后大青叶中各有效成分含量大青叶常用作清热解毒药，具有抑杀病原微生物、提高机体免疫力等作用，临床上主要用于治疗流感、腮腺炎、肝炎和肿瘤等，现代药理学认为这些药效作用的发挥是基于大青叶抑制病原微生物和抗内毒素作用；还有学着认为，除此之外，还与大青叶提高机体免疫力密切相关。目前对大青叶的质量评价方法是以靛蓝、靛玉红以及喹唑酮化合物为质控指标，经过检测我们发现青贮饲料和发酵后的饲料中这些有效成分的含量较高，而且发酵后的含量高于青贮饲料。三、成品饲料质量检测依据饲料行业现行国家标准和行业标准，对制作的成品饲料进行品质检测，检测结果见表5。表5颗粒饲料营养成分分析结果(％)由以上结果表明，各实施例中的抽检样品均达到了国家标准。四、饲料提高免疫力的药效学试验试验项目一：小鼠免疫力试验受试饲料：实施例1中制作的饲料和普通饲料。受试动物：昆明小鼠，体重20～22g，雌雄各半。普通饲料成分：硫酸锌，硫酸亚铁，硫酸铜，复合维生素，氯化钙，d-泛酸钙，蛋氨酸，氯化胆碱，亚硝酸钠，磷酸氢钙，食盐，酶制剂，有益菌，香味剂，防霉剂，肠道保护剂，诱食剂，抗氧化剂，沸石粉和钙粉。试验方法与结果：首先将小鼠分为实施例1饲料组和普通饲料组，再给两组小鼠腹腔注射环磷酰胺70mg/kg体重三天，同时分别给两组小鼠喂食该专利饲料和普通饲料，每7天测一次体重，30天后给各组小鼠再称重并记录数字，处死各组小鼠，取小鼠血，脾脏和胸腺。实验结果如下：1.实验过程中记录的小鼠体重根据表6的结果，可以看出饲喂实施例1的饲料的小鼠的体重增明显高于饲喂普通饲料组的小鼠的体重。表6各组小鼠体重2脾脏指数(脾脏指数＝脾脏重/体重)运用spss21.0分析实验结果如图1，饲喂实施例1的饲料的小鼠脾脏指数与饲喂普通饲料组的小鼠相比无显著性差异(p＞0.05)，但仍然高于饲喂普通饲料组的小鼠的脾脏指数。3胸腺指数(胸腺指数＝胸腺重/体重)运用spss21.0分析实验结果如图2(注：**表示p＜0.01，差异极显著)，饲喂实施例1的饲料的小鼠的胸腺指数与饲喂普通饲料组的小鼠相比具有极显著性差异，即显著高于饲喂普通饲料组的小鼠的胸腺指数。4白细胞计数(血液中所含的白细胞数)运用spss21.0分析实验结果如图3(注：*表示p＜0.05，差异显著)，饲喂实施例1的饲料的小鼠的白细胞计数与饲喂普通饲料组的小鼠相比具有显著性差异，即显著高于饲喂普通饲料组的小鼠的白细胞计数。5血清中细胞因子的测定使用酶联免疫吸附测定elisa方法测定各个细胞因子的含量。测定结果如表7，饲喂实施例1的饲料的小鼠的各项指标都显著高于饲喂普通饲料组的小鼠的各项指标。表7血清中细胞因子的含量*表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.05)，**表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.01)。试验项目二：山羊免疫力试验受试饲料：实施例2中制作的饲料和普通饲料。受试动物：山羊，雌雄各半。试验方法与结果：首先将山羊分为实施例2饲料组和普通饲料组，分别给两组山羊喂食该实施例2饲料和普通饲料，30天后抽取血样。1.采用酶联免疫吸附法测定山羊血清中免疫球蛋白iga、igg、igm的水平结果如图4a、4b、4c(注：*表示p＜0.05，差异显著；**表示p＜0.01，差异极显著)，与饲喂普通饲料组的山羊相比，饲喂实施例2的饲料的山羊血清中iga、igg、igm含量均显著增加。2.血清中gsh-px、mda、sod的含量血清中gsh-px、mda、sod的含量采用试剂盒测定，结果如表8所示。与饲喂普通饲料组的山羊相比，饲喂实施例1的饲料的山羊的血清中抗氧化酶明显升高，mda含量显著降低。表8血清中gsh-px、mda、sod的含量*表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.05)，**表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.01)。实验项目三：本发明的饲料对羊羔羊生长性能的影响受试饲料：实施例3中制作的饲料和普通饲料。受试动物：羊羔羊，雌雄各半。选取60只羊羔羊，随机分为两组，分别喂食专利饲料和普通饲料，在试验第1、30d和第60d早晨对试验羊进行空腹称重,并记录各重复耗料量，分别计算各日粮处理组、平均日采食量(adfi)平均日增重(adg)和增重耗料比(g/f)。计算公式如下：平均日增重＝(末重-初重)/试验天数；平均日采食量＝耗料量/试验天数；耗料增重比＝耗料量/增重。实验结果如表9。表9本发明的饲料对羊羔羊生长性能的影响*表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.05)，**表示与普通饲料组相比具有显著性差异(p＜0.01)。由表9实验结果可以看出，饲喂实施例3饲料组的羊羔羊耗料增重比显著低于普通饲料组。实验项目四：本发明的饲料对牛肉品质的影响在养殖户牛场将40头健康的、体重接近的一月龄幼牛随机分为两组，每组20头，分别饲喂本发明的饲料和普通饲料，为期三个月。试验结果如表10所示。表10项目本发明的饲料组普通饲料组死亡率02.1％发病率010.2日增重(g)730±42580±30肌肉含量62％56％脂肪含量22％27.5％肉质口感良好一般试验结果表明，饲喂本发明的饲料的牛的死亡率比饲喂普通饲料组的牛的死亡率降低了2.1％；饲喂本发明的饲料的牛的发病率与饲喂普通饲料组的牛相比下降了10.2％；饲喂本发明的饲料的牛的日增重与饲喂普通饲料组的牛相比提高了26％；饲喂本发明的饲料的牛的肌肉含量与饲喂普通饲料组的牛相比提高了12％；饲喂本发明的饲料的牛的脂肪含量与饲喂普通饲料组的牛相比降低10％。本发明通过将附子和甘草副产物青贮，不仅减少资源浪费，还能有效解决秋冬季节饲草料匮乏的难题；同时通过青贮加工，做成的青贮饲料青鲜适口，还提高了饲草的营养价值；通过用马克斯克鲁维酵母发酵可以显著增加饲料的适口性；由本发明的原料配比制备而成的饲料，能显著增强牛羊的免疫力，降低冬日牛羊发病率，并在一定程度具有治愈的功效；更重要的一个优点是减少牛羊肉中抗生素和激素的含量，更有利于人们食用；通过添加与青贮饲料等量的麦麸和玉米皮，使本发明的饲料可以充当牛羊的整日喂食饲料，解决了青贮饲料营养含量低，只能充当喂食量30％的难题。以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。当前第1页12