水溶性酵母细胞壁的制作方法

文档序号:14455725阅读:560来源:国知局
本发明属于酵母处理
技术领域
,具体涉及一种水溶性酵母细胞壁。
背景技术
:酿酒酵母(saccharomycescerevisiae),又称面包酵母,是人类最早发现并实现第一款超百万吨商业化生产的微生物益生菌。早在19世纪,人们就已经开始工业化生产酵母产品。酵母及其深加工产品,作为一种天然的发酵剂、天然的鲜味剂与风味及营养强化剂和一种天然的发酵氮源,具有广泛的使用用途,不仅传统上它用于制作面包、馒头、酿酒等食品,在现代生物学中的应用也越来越广泛,如酿酒酵母是重要的模式生物之一,是遗传学和分子生物学的重要研究材料。酵母细胞壁多糖是从酵母中提取出来的一些大分子糖类聚合物,约占细胞干重的30%,细胞壁从内向外分3层,分别为葡聚糖(约占细胞壁干重的30%~34%)、蛋白质、甘露聚糖(约占细胞壁干重的30%)。在酵母细胞最里层的葡聚糖有3类:碱溶性葡聚糖,酸溶性葡聚糖,碱不溶、酸不溶性葡聚糖。葡聚糖为主要活性多糖,其结构中除少量的β-(1,6)组成的糖苷键外,大部分是β-(1,3)糖苷键组成,因此也称为β-(1,3-1,6)葡聚糖。酵母甘露聚糖是酵母胞壁多糖中的另一种多糖,分子量为2~20万道尔顿,主链为α-甘露糖以α-(1,6)糖苷键形成的糖链,侧链有以α-(1,2)和α-(1,3)糖苷键连接的甘露糖。目前动物养殖行业使用的甘露寡糖主要来源于酵母细胞壁。但由于酵母细胞壁中甘露寡糖和葡聚糖、蛋白质是紧密结合在一起,未能充分释放出活性位点,因此实际应用效果并非特别显著。如果能将酵母细胞壁中的甘露寡糖、β-葡聚糖以及蛋白质进行有效分离,可以将各成分的活性位点充分暴露,可显著提高其养殖效果,具有替代抗生素的应用潜力。禁止饲料行业抗生素已是大势所趋,开发水溶性的酵母细胞壁产品,不仅能够增强产品增强免疫力、促生长、增强霉菌毒素吸附能力,而且对于替代抗生素、解决药物残留,保护环境和人体健康,加速水产品的出口创汇,都具有重要意义。技术实现要素:本发明提出一种水溶性酵母细胞壁,该水溶性酵母细胞壁制备的成本低,产品溶解性比普通酵母细胞壁提升至少1倍以上,具有增强动物免疫力、吸附霉菌毒素的功能。本发明的技术方案是这样实现的:一种水溶性酵母细胞壁,由以下方法制备得到:1)前处理:将酵母细胞壁溶于水中制备得到酵母细胞壁溶液,然后在100℃以上的温度条件下对酵母细胞壁溶液进行高压处理;2)第一阶段酶处理:将步骤1)高压处理的酵母细胞壁溶液恢复至常压,并降温至45~55℃,调节溶液ph至5.0~7.0,加入葡聚糖酶、甘露聚糖酶及碱性蛋白酶进行酶解的同时超声处理,得到第一阶段酶解溶液;3)第二阶段酶处理:将第一阶段酶解溶液降温至37℃及以下,加入蜗牛消化酶进行酶解的同时超声处理,结束后进行喷雾干燥即可获得水溶性酵母细胞壁。优选地,所述步骤1)的温度为121~125℃,高压的压强范围为10mpa~100mpa。优选地,以酵母细胞壁的质量为基础计算,所述步骤2)的葡聚糖酶的添加量为0.3~1%,甘露聚糖酶的添加量为0.3~1%,碱性蛋白酶的添加量为0.1~1%。优选地,所述步骤2)的超声处理条件为:超声功率为500~600w,超声处理时间为20~32小时。优选地,以酵母细胞壁的质量为基础计算,所述步骤3)的蜗牛消化酶的添加量为0.1~0.2%。优选地,所述步骤3)的超声处理条件为:超声功率为500~600w,超声处理时间为4~6小时。优选地,所述步骤1)中的酵母细胞壁溶液中酵母细胞壁的质量浓度为5~20%。本发明的有益效果:本发明的水溶性酵母细胞壁制备的成本低,产品溶解性比普通酵母细胞壁提升至少1倍以上,具有增强动物免疫力、吸附霉菌毒素的功能。具体实施方式实施例1一种水溶性酵母细胞壁,由以下方法制备得到:酵母细胞壁溶解于水中形成5wt%溶液,121℃温度下60mpa的高压处理5h;然后恢复至常压,降温至45℃加入0.3wt%葡聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、0.3wt%甘露聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、1wt%碱性蛋白酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算),调节ph至6.5,超声功率560w,处理时间32小时。降温至37℃,加入0.1wt%蜗牛消化酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算),超声功率560w,处理时间6小时;超声酶解结束后喷雾干燥即得产品。实施例2一种水溶性酵母细胞壁,由以下方法制备得到:酵母细胞壁溶解于水中形成10wt%溶液,125℃温度下10mpa高压处理7h。然后恢复至常压,降温至55℃加入0.5wt%葡聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、0.5wt%甘露聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、0.5wt%碱性蛋白酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算),调节ph至5.0,超声功率600w,处理时间26小时。降温至37℃,加入0.15wt%蜗牛消化酶,超声功率600w,处理时间4小时。超声酶解结束后喷雾干燥即得产品。实施例3一种水溶性酵母细胞壁,由以下方法制备得到:酵母细胞壁溶解于水中形成20wt%溶液,123℃温度下60mpa高压处理4h。然后恢复至常压,降温至50℃加入1wt%葡聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、1wt%甘露聚糖酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算)、0.1wt%碱性蛋白酶(以酵母细胞壁的质量为基础计算),调节ph至7.0,超声功率500w,处理时间20小时。降温至37℃,加入0.2wt%蜗牛消化酶,超声功率500w,处理时间4小时。超声酶解结束后喷雾干燥即得产品。试验例将实施例1~3水溶性酵母细胞壁与普通酵母细胞壁溶解率进行比较,结果见表1。溶解率测定方法如下:准确称取样品10g(精确到0.1mg),记为m0,溶解于200ml蒸馏水中,使其充分溶解后全部转入离心杯中,5000g离心5min,准确测定沉淀重量,记为m1,并测定沉淀干物质含量(按照gb5009.3-2010第一法检测),沉淀干物质含量记为d。样品溶解率为:x=(m0-m1*d)/m0*100%。表1水溶性酵母细胞壁与普通酵母细胞壁溶解率普通酵母细胞壁实施例1实施例2实施例3溶解率20~27%50~55%53~57%53~58%以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12
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