专利名称：一种破酵母细胞细胞壁的方法
技术领域：
本发明是一种新的酵母菌破壁方法，涉及碱法、变温法及盐法破细胞壁的方法。
背景技术：
我国啤酒工业发展迅速，2005年我国啤酒产量3061. 56万吨，随着啤酒工业的飞 速发展也带来了大量的副产物-啤酒酵母。酵母细胞中含有丰富的蛋白质、B族维生素、脂 肪、糖和酶等多种营养成分和某些协调因子、并具有众多生理功能在饲料工业中被受关注， 然而酵母细胞有比较坚实的细胞壁，其细胞内的物质不易释放出来，不能被动物很好的吸 收利用。为此国内外学者进行了大量的试验研究，以期找到理想的破壁方法。目前，关于啤 酒酵母的研究很多，大体可以归纳为化学破壁法(酸解、碱解)、物理破壁(液体剪切、固 体剪切等)、生物破壁(酶解、自溶)。本发明采用多种方法相结合的方法大幅度的提高了 破壁效率，且操作简单、设备要求低。非常适合啤酒废酵母的破壁再利用。
发明内容
本发明提供了 一种新的酵母细胞破壁方法(1)酵母细胞预处理废酵母细胞用无菌水稀释，所得溶液用70目分子筛筛分二次，再用90目分子筛筛 分二次，将所得溶液离心分离lOmin，得到纯净的酵母细胞。(2)利用碱法初步破碎酵母葡聚糖层配制酵母、氨混合菌悬液，其中酵母浓度为10%，氨浓度为1%，将菌悬液放入 60°C恒温水槽中水浴加热30min。所得溶液离心分离(3600n/min) lOmin，得到酵母沉淀。(3)利用变温法与盐法结合二次破碎酵母细胞壁所得酵母沉淀再用10倍无菌水稀释，用HCl调节PH至6. 5，速冻至零下20°C，冷 冻20min，然后用微波炉微波解冻，再IOOml水加2. 5克NaCl往溶液中加一定量的食盐，将 混合液放入70°C恒温水槽中，加热2. 5h，重复以上步骤3次。本发明采用碱法、盐法和变温法3种破壁方法相结合的方法多层次破碎细胞壁， 破碎率高。该法原料易得，设备要求低，操作简便。在工业化大生产中很好的应用前景。
权利要求
1.一种破酵母细胞细胞壁的方法，其特征包括以下几个步骤(1)酵母细胞预处理废酵母细胞用无菌水稀释，所得溶液用70目分子筛筛分二次，再用90目分子筛筛分二 次，将所得溶液离心分离lOmin，得到纯净的酵母细胞。(2)利用碱法初步破碎酵母葡聚糖层配制酵母、氨混合菌悬液，其中酵母浓度为10%，氨浓度为1%，将菌悬液放入60°C恒 温水槽中水浴加热30min。所得溶液离心分离(3600n/min)10min，得到酵母沉淀。(3)利用变温法与盐法结合二次破碎酵母细胞壁所得酵母沉淀再用10倍无菌水稀释，用HCl调节PH至6. 5，速冻至零下20°C，冷冻 20min，然后用微波炉微波解冻，再IOOml水加2. 5克NaCl往溶液中加一定量的食盐，将混 合液放入70°C恒温水槽中，加热2. 5h，重复以上步骤3次。
2.如权利(1)所述的酵母细胞预处理过程，其特征在于所用的酵母菌为啤酒废酵母。
3.如权利( 所述的酵母细胞破壁方法，其特征在于所用的酵母细胞为纯净的酵母细胞。
4.如权利C3)所述的酵母细胞破碎方法，其特征在于变温的温差为90°C时酵母细胞破碎率最高。
5.如权利(3)所述的酵母细胞破碎方法，其特征在于在酵母浓度10%时NaCl的加入 量为2. 5%时酵母细胞破碎率最高。
全文摘要
本发明提供了一种破酵母细胞壁的方法，其步骤包括废酵母用无菌水稀释再用70目和90目分子筛分别筛分2次，得到纯净酵母细胞；利用氨水破壁法初步破碎酵母细胞葡聚糖层，离心得到酵母沉淀。再利用变温法于盐法结合的方法进一步破碎酵母细胞壁。本发明细胞破碎工艺操作简便，设备要求低，破碎率高。
文档编号C12N1/06GK102071151SQ20091015465
公开日2011年5月25日 申请日期2009年11月23日 优先权日2009年11月23日
发明者史利斌, 吴菁 申请人:湖州来色生物基因工程有限公司