一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法与流程

文档序号:15927423发布日期:2018-11-14 01:17阅读:240来源:国知局

本发明涉及水产养殖领域,特别涉及一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法。

背景技术

太湖是我国第三大淡水湖,水产品种繁多,自古就有“太湖八百里,鱼虾捉不尽”之说,在众多的湖鲜佳肴中,蟹类因其营养价值高、味道鲜美,深受人们喜爱。

在食品工业中,呈味核苷酸作为鲜味增强剂被广泛使用,水产品中呈味核苷酸的含量对肉的滋味和香味的影响尤为重要。目前关于肉类呈味核苷酸的测定方法,国内外文献报道很不一致。有纸层析法,离子交换层析法,薄层层析法,紫外吸收法,这几种方法的共同缺点是步骤繁琐,样品测定时间长,不适合大批量样品的测定分析。

目前,国内外使用较多的是液相色谱法,如中国专利cn104237412b。种方法具有快速灵敏的优点,且能同时分离多种核苷酸,但流动相成分、测定条件及时间差异较大,有的采用磷酸盐溶液,有的采用磷酸盐溶液加乙酸胺或三乙胺作流动相。流动相中使用的胺盐类物质缓冲能力差,液相色谱短时间运行色谱峰型变化不大,但长时间运行,柱效下降快,色谱图形飘移严重,会造成测量结果不准确。因此本发明建立一个简便易行,快速准确、对柱效损伤小,适合大量样品测定的液相色谱方法。

在太湖蟹养殖方面的研究较少,如中国专利cn107372255a中提供了一种太湖蟹的科学养殖方法,提高太湖蟹的存活率。而有关饲料调控对动物肌肉imp、gmp含量的影响国内外研究很少,而关于河蟹方面的还处于空白。饲粮成分除影响瘦肉率外,对肉的风味也有影响,有些成分和温湿度能对核苷酸代谢等生理反应产生巨大影响。因此,本发明从太湖蟹养殖出发,从饲养源头来调控提高呈味核苷酸的含量,通过喂养含有不同成分的饲料,来考察太湖蟹呈味核苷酸的含量的变化,从而提升太湖蟹的品质。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,从而解决现有技术中测定食品中呈味核苷酸含量测量结果不准确,对仪器损伤大等问题,并填补饲料调控动物肌肉呈味核苷酸的研究的空白。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方,其特征在于:所述饲料配方组成为:

i组:鱼粉17~20%;面粉24.25~43.75%;豆粕15~17%;菜粕6~8%;虾粉4~6%;棉粉4~6%;蚕蛹干1~3%;乌贼粉5~7%;正大预混料0.7~2.5%;磷脂油0.8~1.5%;磷酸酯0.2~0.5%;氯化胆碱1~1.5%;猪油1.5~2.5%;肌醇0.05~0.25%;

ii组:鱼粉17~19%;面粉17.75~38.75%;豆粕15~17%;菜粕6~8%;虾粉4~6%;棉粉4~6%;蚕蛹干1~3%;乌贼粉5~7%;正大预混料0.7~2.5%;磷酸二氢钙1~3%;磷酸二氢钾1~3%;氯化镁0.5~1.5%;磷脂油0.8~1.5%;磷酸酯0.2~0.5%;氯化胆碱1~1.5%;猪油1.5~2.5%;肌醇0.05~0.25%;

iii组:鱼粉17~19%;面粉17~41%;豆粕15~17%;菜粕6~8%;虾粉4~6%;棉粉4~6%;蚕蛹干1~3%;乌贼粉5~7%;正大预混料0.7~2.5%;磷酸二氢钙1~3%;磷酸二氢钾1~3%;氯化镁0.5~1.5%;磷脂油0.8~1.5%;磷酸酯0.2~0.5%;氯化胆碱1~1.5%;猪油1.5~2.5%;肌醇0.05~0.25%;甜菜碱0.25~0.75%。

采用特定的饲料配方,添加一定量的无机盐、甜菜碱,提高太湖蟹中呈味核苷酸的含量,从而提高太湖蟹的口感。

进一步优选,在饲养过程中通过控制养殖方式控制太湖蟹呈味核苷酸;具体养殖方式包括将个体健康的太湖蟹,随机分配到若干试验池塘中,试验池塘随机分类为三组,每组池塘投喂一种饲料,每2~5天更换30~60%的池塘水。

这样做可以有效的保证池塘水的质量,从而控制养殖环境对太湖蟹品质的影响。

进一步优选,所述试验池塘中注有经50~80目筛绢过滤后的淡水。

这样做可以过滤点大颗粒杂质,获得水质较好的太湖蟹养殖池塘水。

进一步优选,所述池塘水保持ph为6~8,溶解氧5.0~15mg,氨氮0~0.5mg/l,亚硝酸盐0~0.2mg/l。

这样做可以保证太湖蟹的存活率,对饲养太湖蟹起协同增效作用。

进一步优选,根据投喂后的残饵量调整投喂量,投喂接近太湖蟹饱食,为体重的1%~3%。

这样做可以避免过多的投喂饲料,多余的饲料在池塘中变质,产生微生物,影响养殖池塘水的水质。

进一步优选,试验时间为50~70天。

这样做可以确保太湖蟹的大小,从而保证太湖蟹呈味核苷酸的含量。

进一步优选,太湖蟹呈味核苷酸的测定方法为:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将8~12g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入4%~6%三氯乙酸,用高速均质机9000~11000r/min充分均质1~3min,以3000~6000r/min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入4%~6%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5~7,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45~0.50μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

该方法可以快速、准确的检测出太湖蟹呈味核苷酸的含量,且对柱效损伤小,适合大量样品测定。

进一步优选,采用c18高效液相色谱柱,以乙腈-水为1~3:97~99作为流动相,以流速0.5~0.7ml/min等梯度洗脱,柱温为29~31℃,进样量为8~12μl。

该方法的精密度和准确度均较高,能有效地将太湖蟹中imp和gmp能有效分离。

进一步优选,所述的流动相包括0.002~0.008mol/l四丁基溴化铵及0.03~0.07mol/l磷酸二氢钾。

这样做可以提高流动相的缓冲能力,从而提高测试结果的准确性。

进一步优选,所述每100g太湖蟹肉中的k+含量为203.57~213.33mg、ca+含量为170.83~181.59mg、mg+含量为47.06~50.84mg、po43+含量为412.77~419.73mg、cl-含量为184.98~189.50mg。

这样做,能够使太湖蟹摄入足够的无机盐离子,加强体内核苷酸及其三磷酸腺苷的合成,然后通过代谢生成具有滋味作用的氨基酸、多肽及各种有机物,这些物质协同无机盐使得太湖蟹具有更加鲜美的风味。

综上所述,本发明具有以下有益效果:

1、一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法中,采用不同的饲料配方对太湖蟹进行饲养,可以在一定程度上提高太湖蟹呈味核苷酸的含量,从而提高太湖蟹的口感。

2、通过在饲料配方中添加无机盐,太湖蟹摄入充足的无机盐,才能满足体内代谢的正常开展,合成具有呈鲜作用的核苷酸及其他有机物。

3、通过在饲料配方中添加甜菜碱,能增强太湖蟹体内的atp代谢,合成更多的呈味核苷酸、并且甜菜碱本身就是滋味物质,能与太湖蟹代谢产生的核苷酸、游离氨基酸、多肽等滋味物质协同作用使得太湖蟹具有更加鲜美的风味。

4、通过特定的呈味核苷酸、无机离子的检测方法,能有效地将太湖蟹中imp和gmp能有效分离,且快速、准确的提取测定太湖蟹中呈味核苷酸、无机离子的含量,从而为太湖蟹养殖提供理论基础。

具体实施方式

实施例1:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方及养殖方式,其特征在于:所述饲料配方包括以下配方组成:

i组:鱼粉18%;面粉34.25%;豆粕16.5%;菜粕7%;虾粉5%;棉粉5%;蚕蛹干2%;乌贼粉6%;正大预混料1.5%;磷脂油1.2%;磷酸酯0.4%;氯化胆碱1%;猪油2%;肌醇0.15%。

将12个大小相同的试验池塘进行编号,分别为1~12,将经过筛选的个体健康的太湖蟹,随机分配到1、2、3、4号试验池塘中,投喂第i组饲料。每一个试验池塘中注有经60目筛绢过滤后的淡水。池塘水保持ph为8,溶解氧10mg,氨氮0.25mg/l,亚硝酸盐0.1mg/l,每3天更换50%的池塘水。试验饲养时间为60天。投喂量为太湖蟹体重的2%。

利用hplc法对饲养60天后的太湖蟹进行呈味核苷酸的测定:

首先对样品进行处理:将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

其中hplc色谱条件为:

色谱柱:安捷伦zorbaxsb-cl8(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;检测器:二极管阵列,检测波长:260nm;流动相:乙腈-水(含0.002mol/l四丁基溴化铵及0.05mol/l磷酸二氢钾)(2:98);流速:0.6ml/min;柱温:30℃;进样量:10μl。

对饲养60天后的太湖蟹进行无机离子的测定:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,获得提取液,所得提取液待测。

钾、钠离子的测定参照国标gb/t5009.91-2003;钙离子参照gb/t9695.13-2009;镁离子参照gb/t9695.21-2008;磷酸盐参照gb/t5009.87-2003;氯离子参照gb/t9695.8-2008。样品重复测定三次,取平均值。

检测分析i组饲养的太湖蟹呈味核苷酸的含量,每100g太湖蟹肉中的imp为20.4mg/100g,gmp为14.9mg/100g。

检测分析ii组饲养的太湖蟹无机离子的含量,每100g太湖蟹肉中只含有po43+,且含量为120mg。

实施例2:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方及养殖方式,其特征在于:所述饲料配方包括以下配方组成:

ii组:鱼粉18%;面粉29.25%;豆粕16.5%;菜粕7%;虾粉5%;棉粉5%;蚕蛹干2%;乌贼粉6%;正大预混料1.5%;磷酸二氢钙2%;磷酸二氢钾2%;氯化镁1%;磷脂油1.2%;磷酸酯0.4%;氯化胆碱1%;猪油2%;肌醇0.15%。

将12个大小相同的试验池塘进行编号,分别为1~12,将经过筛选的个体健康的太湖蟹,随机分配到5、6、7、8号试验池塘中,投喂第ii组饲料。每一个试验池塘中注有经60目筛绢过滤后的淡水。池塘水保持ph为8,溶解氧10mg,氨氮0.25mg/l,亚硝酸盐0.1mg/l,每3天更换50%的池塘水。试验饲养时间为60天。投喂量为太湖蟹体重的2%。

利用hplc法对饲养60天后的太湖蟹进行呈味核苷酸的测定:

首先对样品进行处理:将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

其中hplc色谱条件为:

色谱柱:安捷伦zorbaxsb-cl8(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;检测器:二极管阵列,检测波长:260nm;流动相:乙腈-水(含0.005mol/l四丁基溴化铵及0.05mol/l磷酸二氢钾)(2:98);流速:0.6ml/min;柱温:30℃;进样量:10μl。

对饲养60天后的太湖蟹进行无机离子的测定:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,获得提取液,所得提取液待测。

钾、钠离子的测定参照国标gb/t5009.91-2003;钙离子参照gb/t9695.13-2009;镁离子参照gb/t9695.21-2008;磷酸盐参照gb/t5009.87-2003;氯离子参照gb/t9695.8-2008。样品重复测定三次,取平均值。

检测分析ii组饲养的太湖蟹呈味核苷酸的含量,每100g太湖蟹肉中的imp为25.4mg/100g,gmp为17.9mg/100g。

检测分析ii组饲养的太湖蟹无机离子的含量,每100g太湖蟹肉中的k+含量为208.45mg、ca+含量为176.21mg、mg+含量为48.95mg、po43+含量为416.25mg、cl-含量为187.24mg。

实施例3:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方及养殖方式,其特征在于:所述饲料配方包括以下配方组成:

iii组:鱼粉18%;面粉28.75%;豆粕16.5%;菜粕7%;虾粉5%;棉粉5;蚕蛹干2%;乌贼粉6%;正大预混料1.5%;磷酸二氢钙2%;磷酸二氢钾2%;氯化镁1%;磷脂油1.2%;磷酸酯0.4%;氯化胆碱1%;猪油2%;肌醇0.15%;甜菜碱0.5%。

将12个大小相同的试验池塘进行编号,分别为1~12,将经过筛选的个体健康的太湖蟹,随机分配到9、10、11、12号试验池塘中,投喂第iii组饲料。每一个试验池塘中注有经60目筛绢过滤后的淡水。池塘水保持ph为8,溶解氧10mg,氨氮0.25mg/l,亚硝酸盐0.1mg/l,每3天更换50%的池塘水。试验饲养时间为60天。投喂量为太湖蟹体重的2%。

利用hplc法对饲养60天后的太湖蟹进行呈味核苷酸的测定:

首先对样品进行处理:将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

其中hplc色谱条件为:

色谱柱:安捷伦zorbaxsb-cl8(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;检测器:二极管阵列,检测波长:260nm;流动相:乙腈-水(含0.008mol/l四丁基溴化铵及0.05mol/l磷酸二氢钾)(2:98);流速:0.6ml/min;柱温:30℃;进样量:10μl。

对饲养60天后的太湖蟹进行无机离子的测定:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,获得提取液,所得提取液待测。

钾、钠离子的测定参照国标gb/t5009.91-2003;钙离子参照gb/t9695.13-2009;镁离子参照gb/t9695.21-2008;磷酸盐参照gb/t5009.87-2003;氯离子参照gb/t9695.8-2008。样品重复测定三次,取平均值。

检测分析iii组饲养的太湖蟹呈味核苷酸的含量,imp为36.78mg/100g,gmp为21.4mg/100g。

检测分析iii组饲养的太湖蟹无机离子的含量,每100g太湖蟹肉中的k+含量为208.45mg、ca+含量为176.21mg、mg+含量为48.95mg、po43+含量为416.25mg、cl-含量为187.24mg。

并且在iii组饲料中添加了甜菜碱,甜菜碱具有良好的供甲基作用,添加甜菜碱可以通过蟹的消化腺合成多量的肉碱和肌酸,促进肌细胞内脂肪酸的β-氧化反应,产生的能量主要以磷酸肌酸形式储存。肌肉消耗atp时,磷酸肌酸将其磷酸基转移给adp合成atp,转化的atp进而分解为多量的imp,从而提高了太湖蟹的滋味。

对比实施例1:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方及养殖方式,其特征在于:所述饲料配方包括以下配方组成:

ⅳ组:鱼粉10.5%;面粉45%;豆粕11.75%;菜粕5%;虾粉8%;棉粉3%;蚕蛹干4%;乌贼粉3%;正大预混料4%;磷酸二氢钙0.5%;磷酸二氢钾0.25%;氯化镁0.25%;磷脂油2%;磷酸酯1%;氯化胆碱0.5%;猪油0.5%;肌醇0.25%;甜菜碱0.5%。

选取8个大小与试验池塘相同的对比试验池塘,并进行编号,分别为a~h,将经过筛选的个体健康的太湖蟹,随机分配到a、b、c、d号试验池塘中,投喂第ⅳ组饲料。每一个试验池塘中注有经60目筛绢过滤后的淡水。池塘水保持ph为8,溶解氧10mg,氨氮0.25mg/l,亚硝酸盐0.1mg/l,,每3天更换50%的池塘水。试验饲养时间为60天。投喂量为太湖蟹体重的2%。

利用hplc法对饲养60天后的太湖蟹进行呈味核苷酸的测定:

首先对样品进行处理:将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

其中hplc色谱条件为:

色谱柱:安捷伦zorbaxsb-cl8(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;检测器:二极管阵列,检测波长:260nm;流动相:乙腈-水(含0.005mol/l四丁基溴化铵及0.05mol/l磷酸二氢钾)(2:98);流速:0.6ml/min;柱温:30℃;进样量:10μl。

对饲养60天后的太湖蟹进行无机离子的测定:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,获得提取液,所得提取液待测。

钾、钠离子的测定参照国标gb/t5009.91-2003;钙离子参照gb/t9695.13-2009;镁离子参照gb/t9695.21-2008;磷酸盐参照gb/t5009.87-2003;氯离子参照gb/t9695.8-2008。样品重复测定三次,取平均值。

检测分析iii组饲养的太湖蟹呈味核苷酸的含量,imp为16.4mg/100g,gmp为8.9mg/100g。

检测分析ii组饲养的太湖蟹无机离子的含量,每100g太湖蟹肉中的k+含量为26.5mg、ca+含量为31.89mg、mg+含量为12.33mg、po43+含量为120.46mg、cl-含量为93.62mg。

并且在iii组饲料中添加了甜菜碱,甜菜碱具有良好的供甲基作用,添加甜菜碱可以通过蟹的消化腺合成多量的肉碱和肌酸,促进肌细胞内脂肪酸的β-氧化反应,产生的能量主要以磷酸肌酸形式储存。肌肉消耗atp时,磷酸肌酸将其磷酸基转移给adp合成atp,转化的atp进而分解为多量的imp,从而提高了太湖蟹的滋味。

对比实施例2:

一种饲养过程中控制太湖蟹呈味核苷酸的方法,包括饲料配方及养殖方式,其特征在于:所述饲料配方包括以下配方组成:

ⅴ组:鱼粉10%;面粉30%;豆粕11%;菜粕10%;虾粉3%;棉粉3%;蚕蛹干5%;乌贼粉4%;正大预混料3%;磷酸二氢钙5%;磷酸二氢钾5%;氯化镁3%;磷脂油1%;磷酸酯1%;氯化胆碱3%;猪油2%;肌醇0.5%;甜菜碱0.5%。

选取8个大小与试验池塘相同的对比试验池塘,并进行编号,分别为a~h,将经过筛选的个体健康的太湖蟹,随机分配到e、f、g、h号试验池塘中,投喂第ⅴ组饲料。每一个试验池塘中注有经60目筛绢过滤后的淡水。池塘水保持ph为8,溶解氧10mg,氨氮0.25mg/l,亚硝酸盐0.1mg/l,每3天更换50%的池塘水。试验饲养时间为60天。投喂量为太湖蟹体重的2%。

利用hplc法对饲养60天后的太湖蟹进行呈味核苷酸的测定:

首先对样品进行处理:将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,hplc进样分析,外标法定量。

其中hplc色谱条件为:

色谱柱:安捷伦zorbaxsb-cl8(4.6mm×250mm,5μm);柱温:30℃;检测器:二极管阵列,检测波长:260nm;流动相:乙腈-水(含0.005mol/l四丁基溴化铵及0.05mol/l磷酸二氢钾)(2:98);流速:0.6ml/min;柱温:30℃;进样量:10μl。

对饲养60天后的太湖蟹进行无机离子的测定:

将太湖蟹去壳,取蟹肉均质成浆状,将10g浆状蟹肉置于塑料离心管中,加入5%三氯乙酸,用高速均质机10000r/min充分均质1min,以4000r/min离心5min,取上清液转入烧杯中,在离心管中继续加入5%三氯乙酸,振荡4~6min,离心,合并上清液,用koh(1+1)溶液调节ph至6.5,过滤至25ml容量瓶中,用超纯水定容,摇匀,溶液过0.45μm滤膜过滤,获得提取液,所得提取液待测。

钾、钠离子的测定参照国标gb/t5009.91-2003;钙离子参照gb/t9695.13-2009;镁离子参照gb/t9695.21-2008;磷酸盐参照gb/t5009.87-2003;氯离子参照gb/t9695.8-2008。样品重复测定三次,取平均值。

检测分析iii组饲养的太湖蟹呈味核苷酸的含量,imp为19.6mg/100g,gmp为16.4mg/100g。

检测分析ii组饲养的太湖蟹无机离子的含量,每100g太湖蟹肉中的k+含量为208.45mg、ca+含量为176.21mg、mg+含量为48.95mg、po43+含量为416.25mg、cl-含量为187.24mg。

并且在iii组饲料中添加了甜菜碱,甜菜碱具有良好的供甲基作用,添加甜菜碱可以通过蟹的消化腺合成多量的肉碱和肌酸,促进肌细胞内脂肪酸的β-氧化反应,产生的能量主要以磷酸肌酸形式储存。肌肉消耗atp时,磷酸肌酸将其磷酸基转移给adp合成atp,转化的atp进而分解为多量的imp,从而提高了太湖蟹的滋味。

将实施例1~3饲养的太湖蟹与对比实施例1~2饲养的太湖蟹对比,实施例1~3中的太湖蟹的imp和gmp的含量显著上升。并且实施例2的i+g含量高于实施例1,实施例3的i+g含量高于实施例2。这是因为生物体内合成核苷酸和三磷酸腺苷分子必须有ca+、k+、po43+、cl-的参与,太湖蟹充足的无机盐摄入,才能满足体内代谢的正常开展,合成具有呈鲜作用的核苷酸及其他有机物,而imp和gmp是太湖蟹重要的呈味物质,因此饲料中添加无机盐能在一定程度上提高太湖蟹滋味。其次,甜菜碱具有良好的供甲基作用,添加甜菜碱可以通过蟹的消化腺合成多量的肉碱和肌酸,促进肌细胞内脂肪酸的β-氧化反应,产生的能量主要以磷酸肌酸形式储存。肌肉消耗atp时,磷酸肌酸将其磷酸基转移给adp合成atp,转化的atp进而分解为多量的imp,从而提高了太湖蟹的滋味。饲料中添加甜菜碱能显著提高太湖蟹滋味。

而对比实施例1的饲料中无机盐明显低于实施例1~3,对a~d池塘养殖的太湖蟹进行取样分析,发现该样品的i+g含量明显低于实施例1~3,并且发现大多数的太湖蟹的蟹壳硬度低,呈软壳状。这是饲料中的无机盐离子含量过低,养殖的太湖蟹无法摄入充足的无机盐,因而但是太湖蟹的骨骼、肌肉、免疫系统等发育不良,导致出现个体不健康的太湖蟹。

而对比实施例2饲料中无机盐明显高于实施例1~3,对e~h池塘养殖的太湖蟹进行取样分析,发现该样品的i+g含量与实施例1~3的i+g含量相同,但是e~h池塘养殖的太湖蟹存活率低,水质浑浊。这是因为饲料中的无机盐过剩,一部分溶解于水中,使水质富营养化,导致水中含氧量降低,影响太湖蟹的正常生理机能。

本具体实施例仅仅是对本发明的解释,其并不是对本发明的限制,本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改,但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

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