抗疲劳、改善性功能的发酵清液及其制备方法和用途与流程

文档序号:16633092发布日期:2019-01-16 06:45阅读:370来源:国知局
抗疲劳、改善性功能的发酵清液及其制备方法和用途与流程
本发明涉及一种具有抗疲劳、改善性功能的发酵清液,还涉及该发酵清液的制备方法和用途。
背景技术
:疲劳是一种复杂的生理现象,机体在一定条件下,由于长时间或过度紧张的体力或脑力活动而引起的劳动效率趋向下降,可导致工作效率降低。易疲劳是亚健康状态的一种表现,疲劳发生后如果得不到及时恢复,逐渐积累,还会导致过劳,使机体发生内分泌紊乱、免疫力下降。过度疲劳还可导致性功能障碍,特别是影响男性的性功能勃起障碍、射精障碍等患病率,严重影响性生活质量。目前已有具有抗疲劳、改善性功能作用的多种产品和技术。cn201711216015.1公开了一种改善男性性功能、抗疲劳的组合物,包括以下重量份的原料:牡蛎肽5~30份、乳多肽1~10份、人参粉1~10份、玛咖粉1~10份、黑姜粉0~15份、牛蒡根粉1~10份、桑葚粉5~15份、五味子粉5~15份、枸杞子粉5~15份、乌梅粉1~10份、异麦芽酮糖10~50份、三氯蔗糖0.1~0.5份。制备方法为各组分直接混合。该组合物多为药材粉末直接入药,影响吸收效果。cn201210386020.8公开了一种提高免疫力、抗疲劳、改善性功能的中药组合物,其包括如下重量份的原料:玛咖25~35份,淫羊藿提取物1~6份,红景天提取物5~15份,肉苁蓉提取物1~10份,刺五加提取物5~15份,蝮蛇粉5~20份,其制备方法是,玛咖、蝮蛇经粉碎后制得粉末;红景天、刺五加采用水提取得到水提物;肉苁蓉、淫羊藿采用醇提取得到醇提物,上述粉末、水提物、醇提物混合得到所述中药组合物。该组合物用到了多种稀有药材或名贵药材,价格昂贵;且制备方法均为传统方法。因此,仍然需要一种具有确切可靠的抗疲劳、改善性功能的产品。技术实现要素:有鉴于此,本发明的第一个目的在于提供一种发酵清液,其具有良好的抗疲劳和改善性功能作用,易于吸收,且原料廉价易得。本发明的第二个目的在于提供上述发酵清液的制备方法,其发酵周期较短,利于大规模生产。本发明的第三个目的在于提供一种发酵饮品,其具有良好的抗疲劳和改善性功能作用,且外观鲜亮,口感和味道好,易于接受。本发明的第四个目的在于提供上述发酵清液的用途。本发明提供一种具有抗疲劳和改善性功能作用的发酵清液,其由包括如下组分的原料制备得到:韭菜苗500~550重量份,黄精100~140重量份,覆盆子60~100重量份,山药60~100重量份,黑芝麻60~100重量份,果蔬浆600~1000重量份,发酵剂0.4~1.4重量份,酶制剂9~30重量份和水2200~2700重量份。根据本发明的发酵清液,优选地,所述原料还包括如下组分:蛹虫草10~20重量份,淫羊藿50~100重量份,五味子50~100重量份和巴戟天50~100重量份。根据本发明的发酵清液,优选地,所述果蔬浆是将如下水果和蔬菜破碎打浆后得到:苹果150~240重量份、梨150~240重量份、桃100~210重量份、香蕉50~130重量份、胡萝卜20~60重量份、西红柿30~70重量份、西葫芦20~45重量份和西兰花20~45重量份。根据本发明的发酵清液,优选地,所述酶制剂包括纤维素酶6~10重量份、果胶酶6~10重量份和酸性蛋白酶6~10重量份;所述发酵剂包括干酪乳杆菌0.2~0.7重量份、植物乳杆菌0.1~0.35重量份和青春双歧杆菌0.1~0.35重量份。根据本发明的发酵清液,优选地,所述原料还包括氮源,且所述氮源的用量为30~60重量份;所述氮源选自小麦低聚肽、大豆蛋白肽和酵母抽提物中的一种或几种。本发明还提供所述发酵清液的制备方法,包括如下步骤:(1)将所述韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子、山药、果蔬浆和水混合形成混合物,将所述混合物在酶制剂的作用下进行酶解,得到酶解液;酶解温度为40~60℃,酶解时间为60~180min;或者将所述韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子、山药、蛹虫草、淫羊藿、五味子、巴戟天、果蔬浆和水混合形成混合物,将所述混合物在酶制剂的作用下进行酶解,得到酶解液;酶解温度为40~60℃,酶解时间为60~180min;(2)将所述酶解液进行灭酶提取处理,得到灭酶提取液;灭酶提取温度为80~100℃,灭酶提取时间为0.4~1.0h;(3)将所述的灭酶提取液,可选地与所述氮源混合均匀,得到混合物;将所述混合物调节ph值至5~7,灭菌处理得到灭菌产物;将所述灭菌产物经所述发酵剂进行发酵处理,得到发酵产物;将所述发酵产物进行固液分离,得到所述发酵清液。根据本发明的制备方法,优选地,步骤(3)所述发酵处理为:首先将干酪乳杆菌接种至所述灭菌产物,在温度为25~40℃且搅拌速度为20~100r/min下发酵12~16d,得到第一发酵液;将植物乳杆菌和青春双歧杆菌接种至所述第一发酵液,在温度为25~40℃且搅拌速度为20~100r/min下发酵4~8d,得到作为所述发酵产物的第二发酵液。本发明还提供一种具有抗疲劳和改善性功能作用的发酵饮品,其包括所述发酵清液、调配剂和水,所述调配剂包括结晶果糖、菊粉、赤藓糖醇、α-环状糊精、增稠剂、蔗糖脂肪酸酯、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠和瓜拉纳提取物。本发明还提供所述发酵饮品的制备方法,包括如下步骤:a.将所述结晶果糖,菊粉,赤藓糖醇、α-环状糊精和增稠剂混合均匀得到预混料;b.将所述预混料缓慢加入部分水中,水温为60~80℃,进行第一次搅拌;然后加入蔗糖脂肪酸酯,进行第二次搅拌,得到混合液;c.将所述发酵清液、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠、瓜拉纳提取物和剩余的水加入所述混合液中,进行第三次搅拌,过滤,灭菌,得到所述发酵饮品。本发明还提供所述发酵清液用于制备具有抗疲劳和/或改善性功能作用的药物、食品或饮品的用途。本发明的发酵清液选择药用原料韭菜苗、黄精、覆盆子、山药和黑芝麻为基础,采用果蔬浆为底物,发酵剂发酵,并合理配置各组分含量,各原料之间相互配合,协同作用,得到的发酵清液具有良好的抗疲劳、改善性功能作用,易于吸收,且药用原料价格低廉易得。进一步地,所述药用原料还包括蛹虫草、淫羊藿、五味子、巴戟天,制备得到的发酵清液具有更好的抗疲劳、改善性功能作用。本发明通过加入优选的果蔬浆,使反应底物营养丰富,通过酶解和发酵处理后,更有利于营养成分的吸收利用。采用本发明优选的发酵剂进行发酵,更适合本发明的发酵底物,在发酵过程中能够长时间保持较高的活菌数,衰亡速度慢,具有很好的代谢活力,且获得的发酵清液具有更好的口感和风味。采用本发明优选的氮源种类及用量,对本发明优选的发酵剂的发酵过程控制和酶量表达具有显著正面影响,能够抑制杂菌的生长,保证发酵物的质量稳定。本发明的制备方法工艺简单,周期较短,适合工业化生产。本发明的发酵清液的药用原料均为药食两用,服用安全,无副作用。附图说明图1为实施例1的发酵清液在发酵过程中活菌数变化趋势图。图2为实施例1的发酵清液在发酵过程中总酸变化趋势图。图3为实施例1的发酵清液在发酵过程中ph变化趋势图。图4为实施例1的发酵清液在发酵过程中总糖含量变化趋势图。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明,但本发明的保护范围并不限于此。本发明,组分的用量“份”表示重量份。本发明中,韭菜苗为百合科植物韭菜alliumtuberosumrottl.exspreng.的嫩苗。黄精为百合科植物滇黄精polygonatumkingianumcoll.ethemsl.、黄精polygonatumsibiricumred.或多花黄精polygonatumcyrtonemahua的干燥根茎。黑芝麻为脂麻科植物脂麻sesamumindicuml.的干燥成熟种子。覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子rubuschingiihu的干燥果实。山药为薯蓣科植物薯蓣dioscoreaoppositethumb.的干燥根茎。蛹虫草为麦角菌科虫草属蛹虫草cordycepsmilitaris(linn.etfr.)link。淫羊藿为小檗科植物淫羊藿epimediumbrevicomumaxim.、箭叶淫羊藿epimediumsagittatum(sieb.etzucc.)maxim.、柔毛淫羊藿epimediumpubescensmaxim.或朝鲜淫羊藿epimediumkoreanumnakai的干燥叶。五味子为木兰科植物五味子schisandrachinensis(turcz.)baill.的干燥成熟果实。巴戟天为茜草科植物巴戟天morindaofficinalishow的干燥根。本发明中,小麦低聚肽是以小麦谷朊粉为原料,经调浆、蛋白酶酶解、分离、过滤、喷雾干燥等工艺制成的小分子多肽物质。大豆蛋白肽是大豆蛋白质经蛋白酶作用后,再经分离、精制获得的蛋白质水解产物,其由多种肽混合物共同组成,肽分子量在10000以下。酵母抽提物是以食品用酵母为主要原料,以酵母自身的酶或外加酶的共同作用下,酶解自溶后得到的产品。瓜拉纳提取物是指从原产于巴西的无患子科藤状灌木巴西香可可paulliniacupanakunth种子中提取的固体粉末,其中咖啡因的含量在10~25wt%。可直接采用市售产品。<发酵清液>本发明的发酵清液具有抗疲劳和改善性功能作用,其由包括如下组分的原料制备得到:韭菜苗500~550重量份,黄精100~140重量份,覆盆子60~100重量份,山药60~100重量份,黑芝麻60~100重量份,果蔬浆600~1000重量份,发酵剂0.4~1.4重量份,酶制剂9~30重量份和水2200~2700重量份。根据本发明的一个实施方式,本发明的发酵清液的活性成分仅由上述原料制备得到。本发明中,优选地,发酵清液由包括如下组分组成的原料制备得到:韭菜苗510~530重量份,黄精110~125重量份,覆盆子70~90重量份,山药80~95重量份,黑芝麻80~95重量份,果蔬浆700~950重量份,发酵剂0.5~1.2重量份,酶制剂12~30重量份和水2200~2500重量份。根据本发明的一个实施方式,本发明的发酵清液仅由上述原料制备得到。本发明中,更优选地,发酵清液由包括如下组分组成的原料制备得到:韭菜苗515重量份,黄精118重量份,覆盆子75重量份,山药90重量份,黑芝麻90重量份,果蔬浆800重量份,发酵剂0.8重量份,酶制剂24重量份和水2300重量份。根据本发明的一个实施方式,本发明的发酵清液仅由上述原料制备得到。本发明中,优选地,发酵清液由包括如下组分组成的原料制备得到:韭菜苗500~550重量份,黄精100~140重量份,覆盆子60~100重量份,山药60~100重量份,黑芝麻60~100重量份,蛹虫草10~20重量份,淫羊藿50~100重量份,五味子50~100重量份,巴戟天50~100重量份、果蔬浆600~1000重量份,发酵剂0.4~1.4重量份,酶制剂9~30重量份和水2200~2700重量份。根据本发明的一个实施方式,本发明的发酵清液仅由上述原料制备得到。本发明中,优选地,发酵清液由包括如下组分组成的原料制备得到:韭菜苗510~530重量份,黄精110~125重量份,覆盆子70~90重量份,山药80~95重量份,黑芝麻80~95重量份,蛹虫草10~15重量份,淫羊藿60~80重量份,五味子60~80重量份,巴戟天60~80重量份果蔬浆700~950重量份,发酵剂0.5~1.2重量份,酶制剂12~30重量份和水2200~2500份。根据本发明的一个实施方式,本发明的发酵清液仅由上述原料制备得到。本发明选择药食两用的原料韭菜苗、黄精、覆盆子、山药和黑芝麻为基础,果蔬浆为底物,酶解后发酵,并合理配置各组分含量,各原料之间相互配合,协同作用,得到的发酵液具有良好的抗疲劳、改善性功能作用,且服用安全,无副作用。通过进一步添加药食两用的蛹虫草,淫羊藿,五味子,巴戟天作为基础,配合果蔬浆,酶解后发酵可进一步提高发酵液的抗疲劳、改善性功能作用。在本发明中,所述韭菜苗和黄精可以分别加水破碎打浆后以浆液的形式投料,或者韭菜苗和黄精可以混合后加水破碎打浆后以浆液的形式投料。所述覆盆子,蛹虫草,淫羊藿,五味子,巴戟天和山药可以以粉末的形式投料。优选地,所述覆盆子,蛹虫草,淫羊藿,五味子,巴戟天和山药的粒径分别为50~150微米,优选为60~120微米,更优选为70~100微米。黑芝麻可以以粉末形式投料,也可以与韭菜苗、黄精混合后加水破碎打浆后以浆液形式投料。在本发明中,所述果蔬浆是将新鲜水果和蔬菜破碎打浆后得到的。所述果蔬浆的细度可以为40~80目,从而有利于后续发酵程序中菌种与营养底物的充分作用。所述水果和/或蔬菜可以为季节性果蔬。所述水果可以选自苹果、梨、桃、香蕉、柚子、柠檬、橙子、葡萄中的一种或几种。所述蔬菜可以选自胡萝卜、西红柿、西葫芦、西兰花、黄瓜、莲藕中的一种或几种。根据本发明的一个优选的实施方式,所述果蔬浆是将如下水果和蔬菜破碎打浆后得到:苹果150~240重量份、梨150~240重量份、桃100~210重量份、香蕉50~130重量份、胡萝卜20~60重量份、西红柿30~70重量份、西葫芦20~45重量份和西兰花20~45重量份。优选地,所述果蔬浆是将如下水果和蔬菜破碎打浆后得到:苹果180~210重量份、梨180~210重量份、桃120~160重量份、香蕉70~110重量份、胡萝卜30~50重量份、西红柿40~60重量份、西葫芦30~45重量份和西兰花30~45重量份。根据本发明的一个实施方式,所述果蔬浆是将如下水果和蔬菜破碎打浆后得到:苹果190重量份、梨180重量份、桃160重量份、香蕉90重量份、胡萝卜50重量份、西红柿60重量份、西葫芦40重量份和西兰花40重量份。本发明通过加入果蔬浆,使反应底物营养丰富,通过酶解和发酵处理后,更有利于营养成分的吸收利用。此外,本发明的果蔬浆作为后续发酵过程中的碳源,避免了发酵过程中额外添加蔗糖等碳源。本发明的酶制剂用于将果蔬浆和其他各原料进行酶解,分解果胶和降解细胞壁中的纤维素,从而使得中药材原料中的营养成分更加充分地释放出来;同时也有利于将中药材原料中的蛋白质分解成分子量更小的小肽,更有利于人体吸收;此外,使物料体系的流动性更好,有利于发酵过程中的传质、传热,发酵过程更稳定。本发明中,所述酶制剂可以包括纤维素酶6~10重量份、果胶酶6~10重量份和酸性蛋白酶6~10重量份;优选包括纤维素酶7~10重量份、果胶酶7~10重量份和酸性蛋白酶7~9重量份。纤维素酶的酶活力可以为1~3万u/g,优选为2~3万u/g。果胶酶的酶活力为1~3万u/g,优选为2~3万u/g。酸性蛋白酶的酶活力可以为6~12万u/g,优选为8~10万u/g。根据本发明一个优选的实施方式,所述酶制剂由纤维素酶6~10重量份、果胶酶6~10重量份和酸性蛋白酶6~10重量份组成;优选由纤维素酶7~10重量份、果胶酶7~10重量份和酸性蛋白酶7~9重量份。本发明的发酵剂可以选自乳酸菌、酵母、红曲霉或枯草芽孢杆菌的一种或多种。所述乳酸菌可以选自干酪乳杆菌、青春双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、肠膜明串珠菌和短双歧杆菌的一种或多种。所述酵母选自酿酒酵母、乳酸克鲁维酵母中的一种或者多种。发酵剂的用量可以为0.4~1.4重量份、优选为0.5~1.2重量份。本发明中,优选地,所述发酵剂包括干酪乳杆菌0.2~0.7重量份、植物乳杆菌0.1~0.35重量份和青春双歧杆菌0.1~0.35重量份;优选包括干酪乳杆菌0.3~0.5重量份、植物乳杆菌0.15~0.25重量份和青春双歧杆菌0.15~0.25重量份。根据本发明的一个优选的实施方式,所述发酵剂仅由上述重量份的干酪乳杆菌、植物乳杆菌和青春双歧杆菌组成。干酪乳杆菌、植物乳杆菌和青春双歧杆菌可以采用本领域已知的那些。本发明中,干酪乳杆菌的有效菌含量可以为2000~5000亿cfu/g,优选为2500~4000亿cfu/g。植物乳杆菌的有效菌含量可以为1500~4000亿cfu/g,优选为2000~3500亿cfu/g。青春双歧杆菌的有效菌含量可以为1500~4000亿cfu/g,优选为2000~3500亿cfu/g。针对本发明的发酵底物来说,干酪乳杆菌、植物乳杆菌和青春双歧杆菌是特别优选的发酵剂,其兼具多重优点。针对本发明的发酵底物,采用干酪乳杆菌、植物乳杆菌和青春双歧杆菌这三种菌种作为发酵剂时,获得的发酵清液具有更好的抗疲劳、改善性功能作用;同时,与其他种类的发酵剂相比,上述优选的发酵剂在发酵过程中能够长时间保持较高的活菌数,衰亡速度慢,具有很好的代谢活力。此外,上述优选的发酵剂对本发明发酵底物进行发酵后,获得的发酵清液在口感、风味方面明显优于其他菌种及组合。本发明的原料还可以包括氮源。所述氮源优选为有机氮源,更优选为小麦低聚肽、大豆蛋白肽和酵母抽提物中的一种或几种。根据本发明的一个实施方式,所述氮源为重量比为1:1的小麦低聚肽和大豆蛋白肽的混合物。根据本发明的另一个实施方式,所述氮源为小麦低聚肽。所述氮源的用量可以为30~60重量份,优选为35~50重量份。上述优选的有机氮源的种类及用量,对本发明优选的发酵剂的发酵过程控制和酶量表达具有显著正面影响,能够抑制杂菌的生长,保证发酵物的质量稳定。<制备方法>下面描述上述发酵液的制备方法,其包括(1)酶解步骤、(2)灭酶步骤和(3)发酵步骤。在步骤(1)中,当药用原料仅由韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子和山药组成时,将所述的韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子、山药、果蔬浆和水混合形成混合物,将所述混合物在酶制剂的作用下进行酶解得到酶解液。酶解温度可以为40~60℃,优选为45~55℃。酶解时间可以为60~180min,优选为90~120min。在步骤(1)中,当药用原料由韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子、山药、蛹虫草、淫羊藿、五味子和巴戟天组成时,将所述的韭菜苗、黄精、黑芝麻、覆盆子、山药、蛹虫草、淫羊藿、五味子、巴戟天、果蔬浆和水混合形成混合物,将所述混合物在酶制剂的作用下进行酶解得到酶解液。酶解温度可以为40~60℃,优选为45~55℃。酶解时间可以为60~180min,优选为90~120min。在步骤(1)中,优选地,韭菜苗和黄精可以分别加水破碎打浆后以浆液的形式投料,或者韭菜苗和黄精可以混合后加水破碎打浆后以浆液的形式投料。所述覆盆子,蛹虫草,淫羊藿,五味子,巴戟天和山药可以以粉末的形式投料。优选地,所述覆盆子,蛹虫草,淫羊藿,五味子,巴戟天和山药的粒径分别为50~150微米,优选为60~120微米,更优选为70~100微米。黑芝麻可以以粉末形式投料,也可以与上述韭菜苗、黄精混合后加水破碎打浆后以浆液形式投料。韭菜苗的用量可以为500~550重量份、优选为510~530重量份。黄精的用量可以为100~140重量份、优选为110~125重量份。覆盆子的用量可以为60~100重量份、优选为70~90重量份。山药的用量可以为60~100重量份、优选为80~95重量份。黑芝麻的用量可以为60~100重量份、优选为80~95重量份。本发明中,所述果蔬浆是将新鲜水果和蔬菜破碎打浆后得到的,所述水果和蔬菜的种类如前文所述,不再赘述。根据一个优选的实施方式,所述果蔬浆由苹果、梨、桃、香蕉、胡萝卜、西红柿、西葫芦和西兰花破碎打浆制得。可以采用打浆机进行破碎打浆。在打浆过程中,可以加入抗氧化剂,如维生素c,以防止破碎打浆过程中果蔬发生氧化,维生素c的用量可以为2~8重量份,优选为3~6重量份。可以将每种水果、蔬菜分别破碎打浆后混合,也可以将每种水果、蔬菜混合后再破碎打浆。所述果蔬浆中,各种水果、蔬菜的用量如上文所述,不再赘述。步骤(1)中,水的用量可以为2200~2700重量份,优选为2200~2500重量份。步骤(1)中,酶解在酶制剂的存在下进行。所述酶制剂如上文所述,不再赘述。步骤(1)中,酶解温度可以为40~60℃,优选为45~55℃。酶解时间可以为60~180min,优选为80~150min。根据本发明的一个具体实施方式,步骤(1)中,将韭菜苗515重量份、黄精118重量份和黑芝麻90重量份复水后打浆得到混合液;将覆盆子75重量份、山药90重量份分别粉碎至粒径为70~100微米,分别得到覆盆子粉和山药粉;将新鲜的苹果190重量份、梨180重量份、桃160重量份、香蕉90重量份、胡萝卜50重量份、西红柿60重量份、西葫芦40重量份、西兰花40重量份和维生素c6重量份进行破碎打浆,得到果蔬浆;将所述混合液、覆盆子粉、山药粉、果蔬浆和水混合均匀,加入纤维素酶8重量份、果胶酶8重量份和酸性蛋白酶8重量份,于55℃下酶解90min,得到酶解液。在步骤(2)中,将所述酶解液进行灭酶提取处理,得到灭酶提取液。灭酶提取温度可以为80~100℃,优选为90~95℃。灭酶提取时间可以为0.4~1.0h,优选为0.5~0.6h。在步骤(3)中,将所述的灭酶提取液,可选地与氮源混合均匀,得到混合物,调节ph值至5~7,灭菌处理得到灭菌产物;将所述灭菌产物经发酵剂进行发酵处理得到发酵产物;将所述发酵产物进行固液分离,得到所述发酵清液。所述氮源的种类和用量如上文所述,不再赘述。步骤(3)中,混合物的ph值调节至5~7,优选为5.5~6.5。采用上述ph值范围,有利于混合物发酵过程中菌种的增殖。本发明中,用于调节ph值的ph调节剂优选为磷酸氢二钾和磷酸二氢钾的混合物,或者碳酸氢钠。优选地,所述ph调节剂为碳酸氢钠。步骤(3)中,所述灭菌处理的灭菌温度可以为100~155℃,优选为120~150℃。灭菌时间可以为3~15s,优选为5~10s。在步骤(3)中,发酵剂的用量可以为0.4~1.4重量份、优选为0.5~1.2重量份。所述发酵剂如上文所述,不再赘述。本发明中,优选地,步骤(3)所述发酵处理为至少两个阶段的发酵,发酵条件有所不同。根据本发明的一个实施方式,首先将干酪乳杆菌0.2~0.7重量份接种至所述灭菌产物,在温度为25~40℃且搅拌速度为20~100r/min下发酵12~16d,得到第一发酵液;将植物乳杆菌0.1~0.35重量份和青春双歧杆菌0.1~0.35重量份接种至所述第一发酵液,在温度为25~40℃且搅拌速度为20~100r/min下发酵4~8d,得到作为所述发酵产物的第二发酵液。形成第一发酵液的发酵温度优选为27~30℃,搅拌速度优选为50~80r/min,发酵时间优选为13~15d。形成第二发酵液的发酵温度优选为27~30℃,搅拌速度优选为50~80r/min,发酵时间优选为5~7d。这样既可以缩短整体发酵周期,又可以保证发酵效果。所述固液分离方法可以为过滤或离心,其为领域内常规操作,不再是赘述。本发明的制备工艺简单,周期较短,适合工业化生产。<发酵饮品及制备方法>本发明的发酵饮品包括如上所述的发酵清液和调配剂。根据需要,所述发酵饮品还包括水。所述发酵清液的原料及制备方法如前所述,这里不再赘述。本发明中,所述调配剂选自结晶果糖、菊粉、赤藓糖醇、α-环状糊精、增稠剂、蔗糖脂肪酸酯、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠和瓜拉纳提取物中的一种或多种。优选地,所述调配剂包括结晶果糖、菊粉、赤藓糖醇、α-环状糊精、增稠剂、蔗糖脂肪酸酯、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠和瓜拉纳提取物。根据本发明的一个实施方式,所述调配剂由结晶果糖、菊粉、赤藓糖醇、α-环状糊精、增稠剂、蔗糖脂肪酸酯、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠和瓜拉纳提取物组成。所述增稠剂可以由果胶,瓜尔胶和柠檬酸钠制成。优选地,所述增稠剂由果胶、瓜尔胶和柠檬酸钠组成,且三者的重量比为1~3:6~9:1~5,优选为2.5:8:2。所述浓缩果汁为水果的浓缩汁,所述水果可以为任意水果。优选地,所述浓缩果汁选自浓缩苹果汁、浓缩梨汁、浓缩猕猴桃汁、浓缩草莓汁、浓缩石榴汁或浓缩桑葚汁。上述浓缩果汁可以直接采用市售产品。所述甜味剂选自甜菊糖苷、安赛蜜、甜蜜素或阿斯巴甜。本发明中,优选地,所述调配剂包括结晶果糖0.5~3重量份、菊粉0.5~3重量份、赤藓糖醇0.5~3重量份、α-环状糊精0.1~0.8重量份、增稠剂0.1~0.5重量份、蔗糖脂肪酸酯0.01~0.03重量份、葡萄糖酸锌0.001~0.02重量份、低聚木糖0.5~4重量份、焦糖浆0.05~4重量份、浓缩果汁0.5~3重量份、香精0.01~0.04重量份、甜味剂0.004~0.012重量份、海藻糖0.5~4重量份、柠檬酸钠0.05~0.5重量份和瓜拉纳提取物0.1~0.6重量份。更优选地,所述调配剂包括结晶果糖1~2.5重量份、菊粉1~3重量份、赤藓糖醇0.8~2.5重量份、α-环状糊精0.2~0.6重量份、增稠剂0.2~0.4重量份、蔗糖脂肪酸酯0.012~0.024重量份、葡萄糖酸锌0.005~0.015重量份、低聚木糖1.5~3.5重量份、焦糖浆0.1~2重量份、浓缩果汁0.8~2.5重量份、香精0.015~0.03重量份、甜味剂0.006~0.01重量份、海藻糖0.8~2.8重量份、柠檬酸钠0.1~0.4重量份和瓜拉纳提取物0.15~0.5重量份。本发明的调配剂可以仅由所述重量份的组分组成。本发明中,发酵清液和调配剂的重量比可以为1:0.2~0.7,优选为1:0.3~0.6,更优选为1:0.35~0.55。所述发酵清液与水的重量比可以为1:0.5~3.5,优选为1:0.55~2,更优选为1:0.6~1.5。当采用本发明的调配剂与发酵清液调配时,得到的发酵饮品的抗疲劳、改善性功能作用增强;外观上呈鲜亮的棕色;具有发酵清香,但发酵清液本身过于浓烈刺鼻的发酵味道被适当修饰和掩盖,并不过于浓烈;酸甜度适中、风味纯正,具有很好的口感,易于被消费者接受;饮品体系十分稳定,不易析出,能够长时间储存。本发明的发酵饮品的制备方法包括:(1)酶解步骤、(2)混合步骤、(3)发酵步骤和(4)调配步骤。在步骤(1)~(3)如上所述,不再赘述。本发明中,所述步骤(4)可以采用多种方法进行调配。优选地,所述步骤(4)具体如下:a.将所述结晶果糖,菊粉,赤藓糖醇、α-环状糊精和增稠剂混合均匀得到预混料;b.将所述预混料缓慢加入部分水中,水温为60~80℃,进行第一次搅拌;然后加入蔗糖脂肪酸酯,进行第二次搅拌,得到混合液;c.将所述发酵清液、葡萄糖酸锌、低聚木糖、焦糖浆、浓缩果汁、香精、甜味剂、海藻糖、柠檬酸钠、瓜拉纳提取物和剩余的水加入所述混合液中,进行第三次搅拌,过滤,灭菌,得到所述发酵饮品。本发明中,优选地,第一次搅拌的搅拌时间为10~50min,优选为10~35min。第二次搅拌的搅拌时间为3~30min,优选为5~20min。第三次搅拌的搅拌时间为10~50min,优选为15~40min。采用本发明的方法,特别是本发明的调配方法制备的发酵饮品,体系均匀且稳定。<用途>本发明的上述发酵清液具有抗疲劳和/或改善性功能的作用。因此,本发明提供上述发酵清液用于制备具有抗疲劳和/或改善性功能作用的药物、食品或饮品的用途。药物、食品或饮品具有本领域常规的含义,且并不属于上下位概念。本发明所述抗疲劳包括抗日常疲劳和抗性疲劳作用。下面描述以下实施例的测试方法:<活菌数>参考gb4789.35-2016进行测定。乳酸菌为一类可发酵糖主要产生大量乳酸的细菌的通称。1、样品制备样品的全部制备过程均遵循无菌操作程序。将液体样品先充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25ml放入装有225ml生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分振摇,制成1:10的样品匀液。2、乳酸菌计数双歧杆菌计数:根据对待检样品双歧杆菌含量的估计,选择2~3个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取1ml样品匀液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。稀释液移入平皿后,将冷却至48℃的莫匹罗星锂盐和半胱氨酸盐酸盐改良的mrs培养基倾注入平皿约15ml,转动平皿使混合均匀。36±1℃厌氧培养72h±2h,培养后计数平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板倾注要求在15min内完成。乳杆菌计数:根据待检样品活菌总数的估计,选择2~3个连续的适宜稀释度,每个稀释吸取1ml样品匀液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。稀释液移入平皿后,将冷却至48℃的mrs琼脂培养基倾注入平皿约15ml,转动平皿使混合均匀。36±1℃厌氧培养72h±2h。从样品稀释到平板倾注要求在15min内完成。乳酸菌总数:以上菌属总数之和。3、计算方法选取菌落数在30~300cfu之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30cfu的平板记录具体菌落数,大于300cfu的可记录为多不可计。每个度的菌落数应采用两个平板的平均数。一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀即可。计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每克或每毫升中菌落总数结果。若有两个连续稀释度的培养皿菌落数在适宜计数范围内时,应按下面公式进行计算:n=σc/(n1+0.1n2)dn—样品中菌落数;∑c—培养皿(含适宜范围菌落数的培养皿)菌落数之和;n1——第一稀释度(低稀释倍数)培养皿个数;n2——第二稀释度(高稀释倍数)培养皿个数;d——稀释因子(第一稀释度)。若所有稀释度的平板上菌落数均大于300cfu,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。若所有稀释度的平板菌落数均小于30cfu,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。若所有稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小1乘以最低稀释倍数计算。若所有稀释度的平板菌落数均不在30cfu~300cfu之间,其中一部分小于30cfu或大300cfu时,则以最接近30cfu或300cfu的平均菌落数乘以稀释倍数计算。<总酸测定>按照gb/t12456-2008进行测定。利用酸碱中和原理,用碱液滴定试液中的酸,以酚酞为指示剂确定滴定终点。按碱液的消耗量计算总酸含量<ph值测定>采用ph计测定发酵液的ph值。<总糖测定>糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后,与蒽酮(c14h10o)脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色。该物质在620nm处有最大吸收,在一定范围内,其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。1、葡萄糖标准液:称取100mg葡萄糖(粉末)于小烧杯内溶解(先溶解在50ml左右的水中转移时要用水多次冲洗),100ml容量瓶定容(标准液浓度1mg/ml)。2、浓硫酸(比重1.84)。3、蒽酮试剂:0.2g蒽酮溶于100ml浓h2so4中,当日配制使用(浓度0.2%)。4、取6个25ml容量瓶,配制一系列不同浓度(0、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml、60μg/ml)的葡萄糖溶液。取2.5ml各浓度标准液于试管中(空白加2.5ml蒸馏水),加入6.5ml蒽酮浓硫酸试剂,混匀,室温静置一小时,于波长620nm处比色,读出吸光度。以吸光度为横坐标,标准液浓度为纵坐标做标准曲线:y=kx+b(μg/ml)。5、总糖测定1)取10ml样品于50ml离心管,8500rpm/min离心10min。2)取上清5ml于50ml离心管中作为待测液。3)根据糖浓度确定稀释倍数,决定定容至50ml、100ml、250ml或500ml容量瓶或者定容好溶度太高继续稀释v1。4)取2.5ml待测液于试管,加入0.2%蒽酮~浓硫酸试剂,混匀,室温静置一小时,620nm处得出od值。5)结果计算x——样品中总糖含量[mg/ml];y——样品测定液中葡萄糖的浓度(μg/ml);v1——样品定容总体积(ml);1000——μg/ml转换为mg/ml;0.9——葡萄糖换算为粗多糖的系数。制备例1将韭菜苗515kg、黄精118kg和黑芝麻90kg复水后混合打浆得到混合液。将覆盆子75kg、山药90kg分别粉碎,过200目筛,分别得到覆盆子粉和山药粉。将苹果190kg、梨180kg、桃160kg、香蕉90kg、胡萝卜50kg、西红柿60kg、西葫芦40kg和西兰花40kg置于打浆机内,加入果蔬总量的0.5wt%的维生素c,破碎打浆,得到果蔬浆。制备例2将韭菜苗515kg、黄精118kg和黑芝麻90kg复水后混合打浆得到混合液。将覆盆子75kg、蛹虫草12kg、五味子60kg、巴戟天60kg、淫羊藿80kg、山药90kg、分别粉碎,过200目筛,分别得到覆盆子粉,蛹虫草粉,五味子粉,巴戟天粉、淫羊藿粉和山药粉。将苹果190kg、梨180kg、桃160kg、香蕉90kg、胡萝卜50kg、西红柿60kg、西葫芦40kg和西兰花40kg置于打浆机内,加入果蔬总量的0.5wt%的维生素c,破碎打浆,得到果蔬浆。实施例1将制备例1得到的混合液、覆盆子粉、山药粉、果蔬浆加入酶解罐,加入水2300kg,混合均匀形成混合物,加入纤维素酶8kg、果胶酶8kg和酸性蛋白酶8kg,于55℃下酶解90min,得到酶解液。将酶解液升温至90℃,灭酶提取0.5h,得到灭酶提取液;加入小麦低聚肽40kg,混合均匀,加入碳酸氢钠调节ph值至6,进行均质,脱气,于135℃灭菌5s,得到灭菌产物。将所得灭菌产物转移至发酵罐中,接入3200亿cfu/g的干酪乳杆菌0.4kg,于28℃、60r/min的转速搅拌下发酵15d,得到第一发酵液;向所述第一发酵液中接入2500亿cfu/g的植物乳酸菌0.2kg和3000亿cfu/g的青春双歧杆菌0.2kg,于28℃、60r/min的转速搅拌下继续发酵5d,得到第二发酵液。将所述第二发酵液离心,得到发酵清液。对发酵过程中发酵液进行监测,监测指标包括活菌数、总酸、ph值和总糖,结果如图1~4所示,由图1可知,益生菌在发酵过程中可大致分为以下三个阶段:(1)发酵起始至发酵第2天,益生菌处于对数生长期,此时益生菌进入高速生长繁殖阶段,活菌数呈指数级增加并达到最高水平(10次方);(2)发酵第2~6天,益生菌处于稳定期,活菌数保持相对稳定,维持在较高水平(9~10次方);(3)发酵第7~20天,代谢产物乳酸等有机酸大量积累,活菌数先迅速后缓慢下降至初始接种量水平(5~6次方),但在发酵结束时仍可检出活菌。由图2可知,随着发酵时间的延长,发酵液中总酸含量先急速后缓慢增加,直至增至最大值并保持稳定。因此,在发酵过程中总酸含量的变化可大致分为以下两个阶段:(1)发酵起始至发酵第5天左右,益生菌大量繁殖,并维持在最高水平,细胞代谢旺盛。此阶段总酸含量迅速增加,并达到最大值;一般此阶段结束后总酸含量可达到33~38g/l;(2)发酵第7~20天,活菌数开始下降,总酸含量维持在最高水平,波动较小。由图3可知,随着发酵时间的延长,发酵液ph值先急速后缓慢下降,直至降至最小值并保持稳定。因此,在发酵过程中ph值的变化可大致分为以下两个阶段:(1)发酵开始至发酵第5天,益生菌大量繁殖,并维持在最高水平,细胞代谢极其旺盛。此阶段ph值迅速下降,并达到最小值;一般此阶段结束后ph值可达到3.3~3.6;(2)发酵第6~20天,益生菌活菌数先维持恒定后开始快速下降,菌体开始大量裂解死亡,ph值维持在最低值。由图4可知,随着发酵时间的延长,发酵液中总糖含量先急速后缓慢下降,直至降至最小值并保持稳定。因此,在发酵过程中总糖含量的变化可大致分为以下两个阶段:(1)发酵起始至发酵第12天左右,益生菌大量繁殖,先维持在最高水平后缓慢下降,细胞代谢旺盛。此阶段总糖含量先急速后缓慢降低,并达到最小值;一般此阶段结束后总糖含量达到50~70g/l。(2)发酵第13~20天,益生菌处于衰亡期,活菌数降至较低水平,总糖含量维持在最低水平。实施例2a.将结晶果糖1.8kg,菊粉2.2kg,赤藓糖醇1.5kg、α-环状糊精0.45kg和增稠剂0.3kg混合均匀,得到预混料;b.将所述预混料缓慢加入12kg的70℃的水中,进行第一次搅拌,搅拌时间为20min;然后加入蔗糖脂肪酸酯0.02kg,进行第二次搅拌,搅拌时间为10min,得到混合液;c.将实施例1的发酵清液30l、葡萄糖酸锌0.01kg、低聚木糖2kg、焦糖浆0.2kg、浓缩梨汁1.25kg、香精0.022kg、安赛蜜0.01kg、海藻糖1.5kg、柠檬酸钠0.2kg和瓜拉纳提取物(咖啡因的含量为22wt%)0.362kg加入所述混合液中,再加水至50l水,进行第三次搅拌,搅拌时间为30min,过滤,灭菌,得到发酵饮品。将该发酵饮品无菌灌装,密封,得到产品,规格为50ml/瓶。实施例3将制备例2得到的混合液、覆盆子粉、蛹虫草粉、五味子粉、巴戟天粉、淫羊藿粉、山药粉、果蔬浆加入酶解罐,加入水2500kg,混合均匀形成混合物,加入纤维素酶10kg、果胶酶10kg和酸性蛋白酶8kg,于55℃下酶解90min,得到酶解液。将酶解液升温至90℃,灭酶提取0.5h,得到灭酶提取液;加入小麦低聚肽40kg,混合均匀,加入碳酸氢钠调节ph值至6,进行均质,脱气,于135℃灭菌5s,得到灭菌产物。将所得灭菌产物转移至发酵罐中,接入3200亿cfu/g的干酪乳杆菌0.4kg,于28℃、60r/min的转速搅拌下发酵15d,得到第一发酵液;向所述第一发酵液中接入2500亿cfu/g的植物乳酸菌0.2kg和3000亿cfu/g的青春双歧杆菌0.2kg,于28℃、60r/min的转速搅拌下继续发酵5d,得到第二发酵液。将所述第二发酵液离心,得到发酵清液。实施例4a.将结晶果糖1.8kg,菊粉2.2kg,赤藓糖醇1.5kg、α-环状糊精0.45kg和增稠剂0.3kg混合均匀,得到预混料;b.将所述预混料缓慢加入12kg的70℃的水中,进行第一次搅拌,搅拌时间为20min;然后加入蔗糖脂肪酸酯0.02kg,进行第二次搅拌,搅拌时间为10min,得到混合液;c.将实施例3的发酵清液30l、葡萄糖酸锌0.01kg、低聚木糖2kg、焦糖浆0.2kg、浓缩梨汁1.25kg、香精0.022kg、安赛蜜0.01kg、海藻糖1.5kg、柠檬酸钠0.2kg和瓜拉纳提取物(咖啡因的含量为22wt%)0.362kg加入所述混合液中,再加水至50l,进行第三次搅拌,搅拌时间为30min,过滤,灭菌,得到发酵饮品。将该发酵饮品无菌灌装,密封,得到产品,规格为50ml/瓶。实验例1对实施例2和实施例4的发酵饮品进行风味口感测试,其感官评分标准参见表1。感官评价小组由100名志愿者组成,分为两组,一组50人,分别服用实施例2和实施例4的发酵饮品,测试结果参见表2。表1感官评分标准表2测试结果色泽组织形态口感香气实施例223252324实施例423242423注:分数为50份评分结果的平均值。实验例2-功效评价64名志愿者参加试饮实验,分为两组,每组32名,第一组试饮实施例2得到的发酵饮品,第二组试饮实施例4得到的发酵饮品。志愿者均为已婚男性,年龄在33~56岁,亚健康状态,易疲劳,性能力不满意。饮用方法:每位志愿者饮用实施例2或实施例4的发酵饮品,每日2次,每次1瓶(50ml),连续10天。期间正常饮食。记录如下项目:(1)肠道方面,包括肠鸣、产气、排便情况;(2)抗疲劳方面,包括日常疲劳状况和性生活疲劳状况;(3)性功能方面,包括勃起功能、性唤起、射精情况、性高潮情况和射精潜伏期共五项。第一组实验结果:(1)肠道方面:25名志愿者在每次服用后0.5~2小时内产气增多,7名志愿者出现轻微肠鸣。排便无异常。(2)抗疲劳方面:26名志愿者白天日常疲劳状况改善,精力提升,夜间睡眠质量改善;20名志愿者性生活过程中性疲劳状况改善,精力充沛。(3)性功能方面:12名志愿者在五项中有三项或三项以上有明显改善;另有7名志愿者在五项中有一至两项明显改善;期中勃起功能和射精潜伏期两项改善尤其明显。此外,志愿者饮用饮品后,普遍出现了身体发热现象。试饮期间未见副作用。以下为其中的两例典型病例:志愿者1,男性,39岁,饮用后身体发热,轻微产气,无肠鸣,大便正常。饮用6天后,日常疲劳状况明显改善,精力提升,夜间睡眠改善。饮用8天后,性生活中勃起次数增多,射精潜伏期延长,射精情况和性唤起均明显改善;第7天起有晨勃且逐渐增多。志愿者2,男性,56岁,饮用后身体发热,产气增多,轻微肠鸣,小便变得有力,大便正常。以前夜间睡觉时间长但质量不好,白天感到疲劳、昏沉;饮用5天后,夜间睡眠逐渐变深,次日早上及白天精力变好,头脑清明。饮用7天后,性生活中射精潜伏期延长,性唤起明显改善,第6、7、8三天有晨勃。第二组实验结果:(1)肠道方面:27名志愿者在每次服用后0.5~2小时内产气增多,6名志愿者出现轻微肠鸣。排便无异常。(2)抗疲劳方面:25名志愿者白天日常疲劳状况改善,精力提升,夜间睡眠质量改善;17名志愿者性生活过程中性疲劳状况改善,精力充沛。(3)性功能方面:16名志愿者在五项中有三项或三项以上有明显改善;另有12名志愿者在五项中有一至两项明显改善;期中勃起功能和射精潜伏期两项改善尤其明显。此外,志愿者饮用饮品后,普遍出现了身体发热现象。试饮期间未见副作用。以下为其中的两例典型病例:志愿者1,男性,42岁,饮用后身体发热,轻微产气,有明显肠鸣,大便正常。饮用4天后,日常疲劳状况逐渐改善,精力提升。饮用6天后,性生活中勃起次数较平时增多,射精潜伏期延长,性唤起均明显改善;第5天起有晨勃且逐渐增多。志愿者2,男性,53岁,饮用第3天身体发热,出汗。第6天起产气增多,无肠鸣。第4天起日常精力有所提升,不昏沉。第9、10两天有晨勃现象。本发明并不限于上述实施方式,在不背离本发明的实质内容的情况下,本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。当前第1页12
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