一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法与流程

本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法。

背景技术：

金花茶（camellianitidissimachi）是山茶科山茶属的常绿灌木或小乔木，主要分布于我国广西南部地区，花期11月~翌年3月。因其金黄色花而成为山茶花的珍贵观赏植物，被誉为“茶族皇后”和“植物王国的大熊猫。研究表明，金花茶花叶中含有黄酮类、多糖类、多酚类、皂甙类、挥发性化合物和其他营养成分（如矿质元素和氨基酸），具有抗癌、抗氧化、降血糖、增强机体免疫等作用。因此，金花茶不仅成为一种珍贵的观赏植物，也是一种新兴的药食兼用植物。目前，开发的加工产品多以叶片为原料，对花的开发利用仅限于袋泡茶，对金花茶花的功能成分中的单体组分、安全性评价及深加工产品的研究并不完善，为促进这些有效成分的吸收利用，除了传统的袋泡茶饮用方式以外，还可以改变其食用状态，将整花加工处理，开发一系列的功能食品。

公布号cn103262917a的中国发明专利，公开了一种金花茶花朵茶的加工方法，其加工方法包括如下步骤：（1）鲜花速冻定型：将采摘后的金花茶鲜花朵进行速冻定型；（2）真空冷冻干燥：将定型的金花茶花朵中在-40℃~-50℃下进行真空冷冻干燥，干燥至花朵的含水量为20%~25%；（3）微波杀青：将真空冷冻干燥后的金花茶花朵恢复至常温，再进行微波杀青处理，微波杀青机功率24~30kw，杀青温度控制在80~100℃，杀青时间为1~2min即可；（4）真空干燥：将微波杀青后的金花茶花朵在10~25℃，真空度为5~10pa下进行真空干燥，干燥至花朵含水量为6~7%，即得金花茶花朵茶。

该方法能够有效保留金花茶花朵茶的影响成分，但是其最终得到的产品黄酮不高。

技术实现要素：

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法的技术方案。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）筛选：盛花期，选择品质较好的金花茶花朵；

2）冻干：金花茶花朵采用冻干机进行真空冷冻干燥，得到金花茶冻干花；

3）粗粉制备工艺：金花茶冻干花采用中药破碎机进行破碎粗制，得到目数为60-100目的金花茶花朵粗粉；

4）破壁粉制备工艺：金花茶花朵粗粉先采用流化床气流粉碎机进行低温高压气流破壁处理，制得200目以上金花茶花朵细粉，即为破壁粉。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于所述步骤2）中冻干机真空冷冻干燥条件为：制冷温度零下40℃；加热过程，前4个阶段温度梯度设置分别为25℃、30℃、35℃、40℃，每个阶段控制在240分钟，第5段45℃进行120分钟后出仓。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于所述步骤3）中中药破碎机破碎条件为：功率7.5kw；电压380v；刀片宽度：400mm；料口尺寸：400×240mm；温度控制在24～26℃，相对湿度控制在45～65%。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于所述步骤4）中流化床气流粉碎机进行低温高压气流破壁处理条件为：用于控制压缩空气压力0.75～0.95mpa，分级轮速度为80～110hz，设定脉冲宽度3ms，脉冲间隔30，室温25℃，环境湿度46%。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于将金花茶花朵破壁粉用自动分装机分袋包装，背封式压边处理，规格为2g/袋。

所述的一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法，其特征在于对包装好的破壁粉进行辐照杀菌处理。

本发明对金花茶花朵依次经过冻干、破碎机破碎处理以及流化床粉碎机低温高压气流破壁处理，有效将金花茶花朵细胞破壁，助于细胞内的有效成分，释放保证了金花茶花朵中有效成分的溶出。此方法适用于工业化连续生产，方法简便，制备得到的金花茶花朵破壁粉的各有效成分含量高及得率高，便于食用和储存且工艺简单，应用前景良好。

附图说明

图1金花茶花朵；

图2金花茶冻干花；

图3金花茶粗粉；

图4金花茶200目破壁粉；

图5光学显微镜下金花茶破壁粉（放大200倍）；

图6金花茶盛开期花瓣黄酮类化合物hplc分析图谱。

具体实施方式

以下结合实施例来进一步说明本发明。

实施例1：一种金花茶花朵低温高圧气流破壁粉的制备方法

（1）筛选：在盛花期，选择花朵完整、花色金黄、无污染等品质较好的金花茶花朵（图1）。

（2）冻干：将花朵放入真空冷冻干燥机（永利zdg-10）真空冷冻干燥，得到原材料（图2）。制作过程制冷温度零下40℃，加热过程，前4个阶段温度梯度设置分别为25℃、30℃、35℃、40℃，每个阶段控制在240分钟，第5段45℃进行120分钟后出仓。

（3）粗粉制备：采用中药破碎机（功率/电压：7.5kw380v；刀片宽度：400mm；料口尺寸：400×240mm）对金花茶冻干花进行破碎粗制，得到金花茶粗粉（图3）。生产厂房按照国家生产规范评价标准换气通风，温度控制在24-26℃，相对湿度控制在45-65%。

（4）破壁粉制备：将粗粉破壁粉放入流化床气流粉碎机，用于控制压缩空气压力0.75~0.95mpa，分级轮速度为80~110hz。设定脉冲宽度3ms，脉冲间隔30，室温25℃，环境湿度46%，对金花茶粗粉进行气流破壁制得金花茶200目细粉，即破壁粉（图4、5）。生产厂房按照国家生产规范评价标准换气通风，温度控制在24-26℃，相对湿度控制在45-65%。

（5）包装：将金花茶破壁粉用粉剂自动分装机分袋包装，背封式压边处理，规格为2g/袋。

（6）杀菌：对包装好的破壁粉进行辐照杀菌处理，处理时间为1.5-2h。

实施例2：采用hplc测定金花茶花瓣中黄酮类组分，以考察本发明提供的低温高压破壁粉制备工艺对金花茶有效成分含量的影响，考察金花茶的感官指标从而分析本发明提供的金花茶破壁粉的优缺点。

1仪器、材料及样品制备

1.1仪器

agilenttechnologies1290infinity高效液相色谱仪及分析系统（agilenttechnologies，美国）；aa6800原子吸收分光光度计（岛津，日本）；lc-20at高效液相色谱仪（岛津，日本）；色谱柱型号：inertsilods-sp（4.6×250mm,5μm）（glsciences，日本）；sartoriusbt224s电子天平（赛多利斯，德国）；thermoscientific™multiskan™go全波长酶标仪（赛默飞，美国）；艾本德eppendorfcentrifuge5804r冷冻离心机（艾本德，德国）；-80℃超低温冰箱（三洋，日本）；普析gwb-1超纯水制备仪（普析，中国）；美菱bcd-551wpcx低温冰箱（长虹美菱，中国）。

1.2材料

有机溶剂：甲酸（ar），丙酮（ar）和磷酸（ar）购自国药集团；色谱纯：cnw甲醇（hplc），三氟乙酸（hplc）和乙腈（hplc）购自上海安谱公司；冰醋酸（hplc）购于美国天地tedia有限公司；芦丁（芸香甙）标准品（≥99%，上海源叶公司）；分析纯：无水乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝（国药公司）。超纯水（实验室gwb-1超纯水制备仪自制）。

1.3样品制备

样品1：取金花茶瓣加入液氮研成粉末质量0.60g，置于10ml离心管中，加入5ml萃取溶剂至离心管中，提取溶剂为甲醇：水：甲酸：三氟乙酸=70:27:2:1（体积比），放置于暗处浸提24h，其中浸提时间达12h时振荡摇匀，浸提液经0.22μm的微孔膜过滤，将滤液转移至棕色瓶中，于-20℃保存。

样品2：称取实施例1制得的金花茶花破壁粉1.00g，放入15ml离心管中，加入10ml65%乙醇提取液，在65℃恒温4h，在4℃下以3500rpm离心10min，吸出上清液。合并三次上清液，混匀备用。

2方法与结果

2.1金花茶花瓣中黄酮类组分hplc分析

标品：精确称取5mg各黄酮类标准品，加100%甲醇（hplc）溶解定容至10ml，得500μg/ml的母液，再将各标准品的母液稀释5倍，取稀释后的山奈酚-3-o-葡萄糖苷、木樨草素、槲皮素、山奈酚4种标准液50μl，其余8种标准液各100μl，在进样瓶中混合得标准溶液。

色谱柱：inertsilods-sp（4.6×250mm，5μm），柱温：30℃，检测波长：370nm，流动相a：100%乙腈（色谱纯），流动相b：2%乙酸水溶液，柱流速：1.0ml/min，进样量10μl，进行梯度洗脱，洗脱程序设置为0～5min，80%b；5～15min，80%-60%b；15～20min，60%-40%b；20.2～24min,80%b，记录时间25min。

金花茶盛开期花瓣黄酮类化合物hplc分析图谱如图6。

2.2金花茶花朵破壁粉有效成分测定

标曲：将芦丁标准品在100℃下烘干恒重，准确称取20mg在65%乙醇中溶解，定容于100ml容量瓶，得浓度为0.20mg/ml的标准溶液，备用。精确吸取芦丁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于6支10ml的具塞试管中，加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min；加入5%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min；加入4.0ml4％氢氧化钠溶液，用65%乙醇补足体积，充分摇匀，静置15min。65%乙醇作空白对照，测a510，以吸光度为纵坐标，芦丁标准品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线得出回归方程。芦丁含量c(mg/ml)与吸光度a之间的回归方程为a=9.6833c-0.0075，r²=0.9994，得出总黄酮与吸光度a呈线性关系。

用回归方程计算总黄酮的浓度c。

总黄酮的含量(mg/g)=c×稀释倍数×v/m；（公式1）

公式中：c为样品中黄酮质量浓度(mg/ml)；稀释倍数为10；v为原液体积30ml；m为样品质量1.00g。

料液比1:3，提取温度65℃，提取时间12h，提取总黄酮，并于旋转蒸发仪中旋转浓缩至粘稠、滴下呈丝状。

总黄酮的提取率(%)=×100%；（公式2）

公式中v1为总黄酮提取液体积，v2为浓缩液体积。

对每个样品进行3次（样品1和样品2）测定，并将含量计算为干物质质量。样品1和样品2中总黄酮含量及黄酮提取效率如下表

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3感官比较

选择温度适宜、安静、通风顺畅、无其他气味污染的场地，邀请3～5个评价员组成感官评价小组，评价员进行产品评价之前用清水多次漱口，不涂抹、携带任何带有香味的物品，保持味觉、嗅觉的灵敏。评价员从颜色、状态、气味、口感、水溶性等感官方面对四种产品进行评价，并将具体描述填写在表格中。

金花茶破壁粉感官评价结果

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4金花茶破壁粉急性经口毒性试验

4.1试验材料及方法

冻干花经气流粉碎机粉碎后得破壁粉，为黄色粉末，取样品500g，于4~8℃密封保存备用。试验用icr小鼠（spf级）由浙江省实验动物中心提供。检测环境条件：温度范围20-25℃，相对湿度范围40～70%。

参照gb/t5009.124-2016，选用健康、成熟，体重18-22gicr小鼠20只，雌雄各半。按限量法设20.0g/kgbw一个剂量组。称量20g样品，并使用1％羧甲基纤维素钠作为溶剂制备成60ml样品溶液。在灌胃前将小鼠禁食（不含水）6小时，并以20ml/kgbw的剂量灌胃三次，间隔4小时。末次灌胃2小时后动物自由进食。灌胃后，观察小鼠的一般状况，中毒表现和死亡情况。观察期限为14天，记录小鼠实验期初及期末体重；在试验结束时，处死小鼠并进行大体解剖学检查以记录小鼠的总体病理变化。

4.2急性经口毒性试验结果

在试验验过程中，每只小鼠没有明显的中毒表现，也没有死亡；在小鼠的所有器官中没有病理变化。金花茶对雄性和雌性小鼠的口服ld50大于20.0g/kgbw，实际无毒。

喂食金花茶破壁粉的小鼠急性毒性死亡情况

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通过高效液相色谱仪采用保留时间定性，对金花茶花瓣中的黄酮类和儿茶素类物质进行定性分析。金花茶花瓣中黄酮种类比较多，如槲皮素-7-o-葡萄糖苷、芦丁、槲皮素3-β-d-葡萄糖苷等。

金花茶破壁粉，细腻，清新，入口较苦，不易溶于水，可用蜂蜜拌食，既解决口感苦涩的问题，又规避了不易溶于水的特性。

急性经口毒性试验显示，金花茶破壁粉安全无毒副作用，结合我国广西金花茶花食用及药用记载，综合评价金花茶花是相对安全可靠的。

金花茶花瓣的营养成分及生物活性成分丰富且全面，协同性好，能够满足人体的需要，利于机体吸收，有较高的营养价值。