一种鱿鱼卵巢的综合利用制备方法与流程

本发明涉及到一种鱿鱼卵巢的综合利用制备方法，属于生物酶解、分离纯化技术与食品领域。

背景技术：

1、鱿鱼是常见的软体动物门头足纲生物，是一种良好的水产品加工原料。我国是世界上捕捞和加工鱿鱼的主要国家之一。在鱿鱼的加工过程中，常伴有大量废弃副产物——鱿鱼卵巢产生。由于鱿鱼卵巢除了含有大量的水分，其主要成分是蛋白质和脂肪，因此极易腐败变质，引发环境污染。同时，鱿鱼卵巢还带有令人讨厌，绝大多数的人不能接收的腥味，所以，鱿鱼卵巢一般只能被简单加工成为鱼粉饲料，几乎没有得到高效利用。

2、目前涉及鱿鱼卵巢的文献和专利主要关注于抗氧化肽的研究，即，鱿鱼卵巢中粗蛋白的提取制备，忽略了鱿鱼卵巢其他有效成分，如：鱿鱼卵巢卵磷脂。目前文献报道：来源于海洋动物卵磷脂(如：鱼卵卵磷脂)相对于来源于陆生动物/植物的卵磷脂(如：牛脑卵磷脂、猪脑卵磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂等)，具有较高含量的不饱和脂肪酸dha和epa，但是目前涉及鱿鱼卵巢卵磷脂的提取分离纯化技术的研究几乎没有报道。

3、不仅如此，目前市场上销售的鱿鱼食品(鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品)使用的都是价格较为昂贵的鱿鱼肉作为原料，如果能找到一种价格低廉且风味优良的鱿鱼下脚料(如：本发明的鱿鱼卵巢第二次固体残渣)作为替代原料，将具有广泛且光明的市场前景。

4、综上所述，以往关注于单一成分制备的文献和专利尽管也能得到某一个有效成分，但付出的代价是其他成分被当作杂质废弃处理，这无疑会造成资源的浪费。因此，本发明采用的一整套鱿鱼卵巢各成分综合利用的生产工艺具有显著的规模化推广价值！而且，本发明对废弃副产物鱿鱼卵巢的高值化开发与综合化利用，不仅可变废为宝，提升其科技附加值，同时还可减少处理废弃物的成本，对推进我国水产加工和食品加工产业的发展，以及环境保护具有重大意义。

技术实现思路

1、有鉴于鱿鱼卵巢综合利用的技术难题，本发明提供一种生产工艺简便、生产成本低、生产效率高、生产效果好、且产品多种多样、活性优异且特色明显的鱿鱼卵巢综合利用方法，实现海洋生物资源的高值开发与综合利用。

2、为解决上述技术问题，本发明的技术解决方案是：

3、一种鱿鱼卵巢的综合利用制备方法，包括以下步骤：

4、(1)酸醇联合浸泡脱腥

5、鱿鱼卵巢先用清水洗去表面的附着物及粘液等杂质，待漂洗干净后，投入反应釜中，加入鱿鱼卵巢重量5～10倍的脱腥溶液，搅拌混匀后，浸泡2～4小时，浸泡温度为15～40℃，浸泡完成后去除脱腥溶液，再用去离子水洗净鱿鱼卵巢待用；

6、(2)蛋白酶解与卧式离心分离

7、将经过浸泡脱腥并洗净的鱿鱼卵巢置于反应釜中，加入鱿鱼卵巢重量2～10倍的去离子水，加入碱溶液调节ph为6～9，加入鱿鱼卵巢投料重量0.5％～5％的蛋白酶，反应温度为45～60℃，反应2～4小时；酶解反应结束后，将反应釜中的酶解液与固体残渣一起导入卧式离心机中，进行固液分离；分离得到的鱿鱼卵巢酶解液直接进入“(3)连续流离心协同膜分离浓缩”步骤，分离得到的鱿鱼卵巢固体残渣(命名为：鱿鱼卵巢第一次固体残渣)可作为下一步鱿鱼卵磷脂生产的原料，进入“(5)超临界流体色谱纯化”步骤；

8、(3)连续流离心协同膜分离浓缩

9、连续流离心结合相对分子质量为20kda～10kda的纳滤膜去除鱿鱼卵巢酶解液中少量的固体残渣和大分子杂质，所得清液再用相对分子质量为500da～200da的纳滤膜去除小分子杂质和无机盐，并进一步浓缩得到含量≥95％的鱿鱼卵巢水解产物溶液；

10、(4)高温喷雾干燥与灭菌封装

11、利用高温喷雾干燥快速干燥鱿鱼卵巢水解产物溶液，得到鱿鱼卵巢水解产物粉状物，再通过光辐射进行快速灭菌，最后进行无菌分装；

12、(5)超临界流体色谱纯化

13、利用超临界流体色谱技术从鱿鱼卵巢第一次固体残渣中快速分离纯化得到鱿鱼卵巢卵磷脂溶液，分离得到的鱿鱼卵巢固体残渣(命名为：鱿鱼卵巢第二次固体残渣)可作为下一步的鱿鱼水产食品或鱿鱼休闲食品生产的原料，进入“(7)鱿鱼水产食品与鱿鱼休闲食品生产”步骤；

14、(6)低温喷雾干燥与灭菌封装

15、利用低温喷雾干燥快速干燥鱿鱼卵巢卵磷脂溶液，得到鱿鱼卵巢卵磷脂粉状物，再通过光辐射进行快速灭菌，最后进行无菌分装；

16、(7)鱿鱼水产食品与鱿鱼休闲食品生产

17、鱿鱼卵巢第二次固体残渣与鱼糜、其他配料搅拌混合，并利用双螺杆挤压与成型机塑型得到不同外形的鱿鱼食品原料，成型的鱿鱼食品原料既可以直接作为鱿鱼水产食品销售，也可以经过裹糠油炸膨化制备鱿鱼休闲食品。

18、所述的步骤(1)使用的鱿鱼卵巢来自阿根廷鱿鱼，其原料拉丁学名为illexargentinus；脱腥溶液由酸溶液与乙醇溶液组成，其中酸溶液的质量体积浓度为5～8％；乙醇溶液为脱腥溶液体积的1％～10％，酸溶液为脱腥溶液体积的90％～99％；脱腥处理所使用的酸为醋酸或柠檬酸；脱腥处理所使用的乙醇溶液既可以是食用酒精配制的溶液(该酒精配置溶液的乙醇质量体积浓度可以为1-95％)，也可以是白酒、黄酒或料酒等含有乙醇的溶液。

19、所述的步骤(2)中，加入碱液调节ph值所使用的碱为碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钠或氢氧化钾；所使用的蛋白酶为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种；卧式离心机的高速离心速度为4000～6000rpm。

20、所述的步骤(3)中，连续流离心机的高速离心速度为10000～15000rpm；所使用的相对分子质量为20kda～10kda的纳滤膜流速为8～18立方米/小时，膜压力为0.552～0.931mpa，温度为20～50℃；所使用的相对分子质量为500da～200da的纳滤膜流速为5～14立方米/小时，膜压力为0.483～2.758mpa，温度为20～50℃。

21、所述的步骤(4)中，所使用的高温喷雾干燥的进风温度为120～180℃、出风温度为70～95℃；所使用的光辐射为紫外光辐射、γ-射线或电子束辐射，辐射剂量为0.01～40kgy，辐射时间为1～60分钟。

22、所述的步骤(5)中，超临界流体色谱的夹带剂为无水乙醇，萃取时间为1～3小时，萃取压力为30～50mpa，萃取温度为40～60℃，夹带剂流速为1.0～2.0毫升/分钟。

23、所述的步骤(6)中，所使用的低温喷雾干燥的进风温度为50～70℃、出风温度为40～55℃、真空度为0.01～0.05mpa；所使用的光辐射为紫外光辐射、γ-射线或电子束辐射，辐射剂量为0.01～40kgy，辐射时间为1～60分钟。

24、所述的步骤(7)中，所使用的鱼糜为来源于蓝圆鲹、狗母鱼、沙丁鱼等低值鱼的鱼糜；所使用的其他配料为大豆蛋白、淀粉、魔芋粉、以及香辛粉、姜黄粉等调料。

25、本发明以水产加工废弃的鱿鱼卵巢为原料，先采用酸醇联合浸泡脱腥的方法去除原料的腥味，然后选择合适的蛋白酶进行生物酶解，并进一步通过卧式离心分离出鱿鱼卵巢酶解液和鱿鱼卵巢第一次固体残渣。对于鱿鱼卵巢酶解液，利用连续流离心协同膜分离技术进行分离纯化与浓缩除盐，得到含量≥95％的鱿鱼卵巢水解产物溶液，最后利用高温喷雾干燥技术快速干燥形成鱿鱼卵巢水解产物粉状物。对于鱿鱼卵巢第一次固体残渣，则利用超临界流体色谱快速分离纯化得到鱿鱼卵巢卵磷脂溶液和鱿鱼卵巢第二次固体残渣，鱿鱼卵巢卵磷脂溶液利用低温喷雾干燥技术快速干燥形成鱿鱼卵巢卵磷脂粉状物，并利用光辐射技术快速灭菌密封保存。对于鱿鱼卵巢第二次固体残渣，则加入鱼糜、其他配料搅拌混合，并利用双螺杆挤压与成型机塑型得到不同外形的鱿鱼食品原料，最后根据鱿鱼食品原料的外形不同，既可以作为鱿鱼水产食品直接销售，也可以进一步采用裹糠油炸膨化技术制备鱿鱼休闲食品。本发明实现一种原料(鱿鱼卵巢)进入，24小时内生产出多种产品(抗氧化活性优异的鱿鱼卵巢水解产物、富含不饱和脂肪酸dha和epa的鱿鱼卵巢卵磷脂、风味俱佳且安全性良好的鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品)的良好效果。因此，本发明达到海洋废弃资源——鱿鱼卵巢高值开发与综合利用的完美目标。与现有技术相比，本发明具有以下优点：

26、1.本发明以水产品副产物鱿鱼卵巢为原料，有别于专利文献中仅关注于鱿鱼卵巢抗氧化肽研究的不足之处，本发明生产的产品分为三个层次，依次是具有抗氧化活性的鱿鱼卵巢水解产物、富含不饱和脂肪酸dha和epa的鱿鱼卵巢卵磷脂以及各类风味俱佳的鱿鱼食品(鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品)，每一个产品都是以上一个产品的固体残渣为原料，上一个产品的提取分离纯化工艺则可以被看成是下一产品原料的除杂工艺，由此本发明既可以实现水产废弃资源鱿鱼卵巢100％的完全开发，也是被看成是一系列生产工艺技术的全面利用。

27、2.尽管目前文献报道：来源于海洋动物卵磷脂(如：鱼卵卵磷脂)相对于来源于陆生动物/植物的卵磷脂(如：牛脑卵磷脂、猪脑卵磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂等)，具有较高含量的不饱和脂肪酸dha和epa的优势，但是，目前涉及鱿鱼卵巢卵磷脂的提取分离纯化技术的研究几乎没有报道。有鉴于此，本发明基于鱿鱼卵巢本身富含卵磷脂，特别是经过鱿鱼卵巢水解产物的蛋白酶解提取与后续的卧式离心分离得到的鱿鱼卵巢第一次固体残渣中存在着更高含量的卵磷脂的特点，采用超临界流体色谱法结合低温喷雾干燥技术，快速制备富含不饱和脂肪酸dha和epa的鱿鱼卵巢卵磷脂。

28、3.鱿鱼卵巢属于海产品废弃资源，成本比作为食品销售的鱿鱼肉低很多，且本发明依次采用蛋白酶解、卧式离心和超临界流体色谱法，分离纯化得到的鱿鱼卵巢第二次固体残渣，属于废弃资源经过多重工艺处理后形成的废弃物，其成本无疑更低。同时，本发明以如此成本低廉的废弃物为原料制备的鱿鱼食品(鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品)，相较于鱿鱼肉为原料制备的鱿鱼食品，拥有更好的风味感受，更易于吸引消费者食用。

29、4.本发明基于不同的生产工艺，将各种生产设备有序组合形成三条生产线，并基于每一道生产工艺形成的固体残渣都是下一道生产工艺的原料的特点，将三条生产线衔接起来，有机整合成一套完整合理的生产体系，实现一种原料(鱿鱼卵巢)进入，24小时内生产出多种产品(鱿鱼卵巢水解产物、鱿鱼卵巢卵磷脂、鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品)的良好效果。

30、5.本发明生产的鱿鱼卵巢水解产物具有优良的抗氧化活性，其抗氧化活性优于食品中常见的抗氧化剂——bha和维生素e；本发明生产的鱿鱼卵巢卵磷脂富含人体生长发育所必需的不饱和脂肪酸dha和epa，且其dha含量与epa含量明显多于陆生动物/植物的卵磷脂(牛脑卵磷脂、猪脑卵磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂)，因此，本发明生产的鱿鱼卵巢水解产物和鱿鱼卵巢卵磷脂非常适合作为临床营养品、功能食品、保健食品、运动食品以及营养补充剂的核心成分；本发明生产的鱿鱼水产食品和鱿鱼休闲食品风味俱佳且安全性评价均符合食品安全国家标准与国家农业行业标准的限量要求，完全可以替代以鱿鱼肉为原料制备的鱿鱼食品，作为一系列成本低廉、风味优良的普通食品直接食用。

31、6.本发明采用的酸醇联合浸泡脱腥工艺，不仅能够有效去除鱿鱼卵巢原料的腥味，还能显著提升鱿鱼卵巢水解产物的酶解产率。同时，通过将浸泡温度控制在15～40℃的范围内，能够避免发生不必要的酯化反应(酯化反应是指羧酸与醇在酸催化下的发生的反应，该反应需要浓硫酸的催化作用，并在高温条件下才会发生)。