一种降尿酸成分的提取工艺及其在制备龟苓膏中的应用的制作方法

本发明涉及生物，尤其是涉及一种降尿酸成分的提取工艺及其在制备龟苓膏中的应用。

背景技术：

1、尿酸是嘌呤类物质在体内代谢的最终产物，由次黄嘌呤和黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶的催化作用下产生，同时生成过氧化物自由基。机体内稳定的尿酸水平涉及到尿酸的生成、吸收、代谢和分解之间的平衡。嘌呤代谢紊乱导致的尿酸生成增多或尿酸排泄减少均会导致高尿酸血症。一般认为血尿酸盐水平≥417μmol/l就会诱发高尿酸血症或一系列的其它症状如痛风性关节炎和高尿酸血症肾病等。现代医学已经明确痛风的发病与高尿酸血症直接相关，是危害人类健康的一种严重的代谢性疾病。痛风性关节炎是由于体内尿酸增高致使尿酸盐沉积在关节囊、滑膜、软骨、肾脏、皮下、其他组织而引起的一种组织病损及炎性反应，主要表现为关节肿胀、疼痛反复发作，关节屈伸不利。血尿酸升高是痛风性关节炎的重要特征。

2、尿酸升高的主要原因是饮食结构的变化，糖、蛋白、脂肪的摄入量明显增加。目前，西医治疗常用药物有非甾类抗炎药、秋水仙碱、糖皮质激素、丙磺舒、苯澳马隆、别嘌呤醇等，这些药物多为抗炎止痛药，虽能迅速缓解疼痛，终止痛风的急性发作，预防痛风性关节炎和痛风性肾结石的形成，但是这类药物均具有严重的副作用，如可引起胃肠道不同程度的损伤，严重时引起肝肾功能异常，长期服用可引起骨髓抑制、肝细胞坏死和神经毒性反应等。因此研究者尝试探索中药成分以降低尿酸的累积。

3、葛根味甘、辛、性凉，它具有丰富的药理作用，如减少血管阻力、改善心脏和大脑的血液循环、降低心率怕、减少心肌的耗氧量等。临床上常用于具有治疗脾虚发热导致的腹泻、口渴、背痛、退热等疾病。研究发现，葛根具有降尿酸和抗痛风作用，其作用机制可能与改善肝肾损伤，降低血清尿酸以及减少肾脏组织中尿酸盐转运体蛋白的表达相关。进一步的，研究还发现，葛根中具有降尿酸作用的主要成分为葛根素；为避免葛根中其他成分对患者身体造成负担，需要设计方法将葛根中的葛根素提取出来。

4、针对葛根素，传统提取方法主要有:水煮法、溶剂浸出法、渗漉法等。近年来，新材料、新技术不断应用到中药提取研究中，如超临界流体萃取法、超声波提取法、半仿生提取法、旋流提取法、酶法等,这些技术仍处于研究开发阶段。目前，葛根的提取在实际生产中多采用水提、醇提工艺路线实验设计多采用单因素设计、正交设计、均匀设计等方法优选最佳工艺条件。由于各实验使用不同地区的葛根原材料以及实验条件不同，造成优选出的工艺参数的差异较大。但是，无论哪种方法，对葛根的提取效率均较低，例如常规渗漉法对葛根素的提取效率不足1.5％，常规水煮法和溶剂浸出法的效率更低。

5、综上，如何提升对葛根中葛根素的提取效率，是影响葛根素在医学上发挥其降尿酸作用的关键因素。

技术实现思路

1、本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种降尿酸成分的提取工艺，能够有效提高葛根素的提取效率，且提取工艺简单，易于实现、推广。

2、本发明还提供了上述提取工艺在制备降尿酸产品中的应用。

3、本发明还提供了一种龟苓膏，该龟苓膏的制备原料包括所述提取工艺提取到的降尿酸成分(葛根素)。

4、根据本发明第一方面的实施例，提供了一种降尿酸成分的提取工艺，所述提取工艺包括：将葛根、浸提溶剂、碱性纤维素酶混合，并在50～70℃条件下浸提；

5、所述浸提溶剂为水、醇和有机胺的混合物；所述浸提溶剂的ph为8～9。

6、根据本发明实施例的提取工艺，至少具有如下有益效果：

7、(1)葛根素在水中和醇中的溶解度均不是非常高，这是限制其提取效率的一个因素，本发明在浸提溶剂中添加有机胺，在8～9的ph下，有机胺和葛根素中的羟基发生反应，生成醇胺，促进了其在有机溶剂的溶解度，进而提升了葛根素的提取效率。

8、(2)葛根素是植物的次生代谢产物，会存在于细胞内部核细胞间质中，而葛根的细胞被包裹在成分为纤维素的细胞壁中。本发明采用的碱性纤维素酶在8～9的ph条件下具有较高的活性，且可分解细胞壁，由此可促进细胞内部的葛根素被提取出来；由此提升了葛根中葛根素的提取效率。

9、根据本发明的一些实施例，所述葛根可通过80目筛网。由此增加了所述葛根和所述浸提溶剂之间的接触面积，提升了降尿酸成分(包括葛根素)的浸提效率。

10、根据本发明的一些实施例，所述浸提溶剂中，水和醇的体积比为1:0.3～4。考虑到有机胺的种类不同，有机胺和葛根素的反应产物或者倾向在水中溶解，或者倾向在醇中溶解，本发明采用的浸提溶剂中包括了水和醇，实际生产中可根据需要调整水醇比例，提升葛根素在浸提溶剂中的溶解度。

11、根据本发明的一些实施例，所述有机胺包括甲胺、乙胺和三乙胺中的至少一种。所述有机胺的添加量，根据所述浸提溶剂的ph确定。

12、根据本发明的一些实施例，所述浸提溶剂中还包括有助溶剂。由此可进一步提升所述将尿酸成分的浸提效率。

13、根据本发明的一些实施例，所述助溶剂包括pvp、赖氨酸和烟酰胺中的至少一种。

14、根据本发明的一些实施例，所述浸提溶剂中，所述助溶剂的质量百分数为1～5wt％。

15、根据本发明的一些实施例，所述葛根和浸提溶剂的质量体积比为1g：5～20ml。

16、根据本发明的一些实施例，所述碱性纤维素酶占所述葛根的质量百分数为0.1～1％。

17、根据本发明的一些实施例，所述浸提的次数为1～3次。

18、根据本发明的一些实施例，单次所述浸提的时长为1～3h。

19、根据本发明的一些实施例，所述浸提的方法包括超声波辅助的回流浸提。

20、根据本发明的一些实施例，所述浸提采用的超声波的功率为0.3w/cm2～0.5w/cm2。

21、根据本发明的一些实施例，所述浸提采用的超声波的超声频率为40khz～60khz。

22、根据本发明的一些实施例，所述浸提后，浸提滤液的获取方式包括依次进行的过滤和静置沉淀。其中过滤可滤除大颗粒的葛根渣，所述静置沉淀，可去除其中的葛根淀粉。

23、根据本发明的一些实施例，所述过滤采用的筛网目数≥200目。

24、根据本发明的一些实施例，所述静置沉淀的时长为2～5h。

25、根据本发明的一些实施例，所述提取工艺还包括在所述浸提后，对所得浸提滤液依次进行酸化和萃取。

26、根据本发明的一些实施例，所述酸化所得浸提滤液的ph为5～7。

27、根据本发明的一些实施例，所述酸化所用试剂为酸水溶液。所述酸水溶液的溶质包括盐酸和乙二酸中的至少一种。所述酸水溶液的ph为2～4。由此酸浓度不是非常高，可促进葛根素和有机胺形成化合物转变为葛根素，且不会因酸度过高对葛根素性能发生影响。

28、根据本发明的一些实施例，所述萃取所用萃取剂包括乙酸乙酯和正丁醇中的至少一种。这些萃取剂可选择性萃取葛根素，且葛根素的分离比高；即采用上述萃取剂，可将葛根素从浸提滤液中转移至萃取剂中，且萃取步骤的收率较高。

29、根据本发明的一些实施例，所述萃取的o/a值为1:2～4。由此，所述降尿酸成分可在萃取相中富集。

30、根据本发明的一些实施例，所述萃取包括依次进行的震荡和静置。所述震荡的时长为10～40min。所述静置的时长为1～2h。

31、根据本发明的一些实施例，所述提取工艺还包括在所述酸化前，对浸提滤液进行初步浓缩。初步浓缩后的体积为原体积的40～70％。由此可降低后续酸化、萃取的量，节约萃取剂的用量；进一步的，该步骤可一定程度减少浸提滤液中醇的含量，避免后续萃取过程中，浸提滤液和萃取剂之间互溶、乳化。

32、根据本发明的一些实施例，所述提取工艺还包括在所述萃取后，浓缩所得负载有机相。

33、根据本发明的一些实施例，所述浓缩的方法包括减压浓缩。

34、根据本发明的一些实施例，所述浓缩的温度为50～70℃。

35、根据本发明的一些实施例，所述浓缩的终点为无萃取剂。

36、根据本发明的一些实施例，所述提取工艺包括以下步骤：

37、s1.将葛根、浸提溶剂、碱性纤维素酶混合，浸提；

38、所述浸提溶剂为水、醇和有机胺的混合物，ph为8～9；

39、所述浸提的方法包括超声波辅助的回流浸提；

40、s2.将步骤s1所得浸提滤液进行酸化，并将酸化产物进行萃取；

41、所述萃取采用的萃取剂包括乙酸乙酯和正丁醇中的至少一种；

42、s3.浓缩步骤s2所得负载有机相；所得浓缩产物中包括所述降尿酸成分，即所述葛根素。

43、根据本发明第二方面的实施例，提出了一种所述的提取工艺在制备降尿酸产品中的应用。

44、由于所述应用采用了上述实施例的提取工艺的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果。

45、根据本发明的一些实施例，所述降尿酸产品为龟苓膏。所述龟苓膏中包括所述提取工艺提取得到的降尿酸成分，因此所述龟苓膏不仅具有清热利湿、美容养颜的作用，还可以降尿酸、有效缓解痛风问题。

46、根据本发明第三方面的实施例，提供了龟苓膏，所述龟苓膏的制备原料包括通过所述的提取工艺提取得到的降尿酸成分。

47、由于所述龟苓膏采用了上述实施例的提取工艺制得的降尿酸成分的全部技术方案，因此至少具有上述实施例的技术方案所带来的所有有益效果。

48、根据本发明的一些实施例，所述龟苓膏的制备原料还包括龟甲提取物、其他植物提取物和助剂。

49、根据本发明的一些实施例，所述其他植物提取物的植物原料包括草决明、山楂、丹参、黄芪、茯苓、车前草和牛蒡子中的至少一种。由此，所述其他植物提取物可和所述提取工艺提取到的降尿酸成分相互协同，具有更好的降尿酸作用。

50、根据本发明的一些实施例，所述降尿酸成分占所述龟苓膏的质量百分数为0.1～1wt％。

51、根据本发明的一些实施例，所述龟苓膏的制备方法包括：

52、d1.将龟甲熬煮，得所述龟甲提取物；

53、将植物原料煎煮，得所述其他植物提取物；

54、d2.合并所述龟甲提取物、其他植物提取物，加热搅拌至糊化后，和所述降尿酸成分混合。

55、根据本发明的一些实施例，步骤d1中，所述龟甲和所述植物原料的质量比为1:8～10。

56、根据本发明的一些实施例，步骤d1中，所述熬煮的时长为1～4h。

57、根据本发明的一些实施例，步骤d1中，所述熬煮中，水和所述龟甲的质量比为5～10:1。

58、根据本发明的一些实施例，步骤d1中，所述煎煮，水和所述植物原料的质量比为8～10:1。

59、根据本发明的一些实施例，步骤d1中，所述煎煮得时长为10～40min。

60、根据本发明的一些实施例，步骤d2中，所述助剂包括矫味剂和稳定剂中的至少一种。

61、若无特殊说明，本发明的“约”实际表示的含义是允许误差在±2％的范围内，例如约100实际是100±2％×100。

62、若无特殊说明，本发明中的“在……之间”包含本数，例如“在2～3之间”包括端点值2和3。

63、本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。