专利名称：缫丝蛹的生物脱臭方法
技术领域：
本发明涉及缫丝蛹的脱臭技术，特别涉及用生物技术去除缫丝蛹蛋白质臭味的方法。
缫丝蛹是蚕业的大宗再生资源，蚕茧缫丝制一顿生丝的同时，可得到一吨左右的干蛹。蛹粉含有48.9％的蛹蛋白，29.5％脂肪及其它丰富的营养物，在食品、医药、轻纺方面有广泛用途，是制取蛋白胨、蛋白粉、复合氨基酸注射液，食品添加剂氨基酸肽、天然保健食品、饲料、蛹油、日化基料酰化肽、皮革光滑剂，轻纺助溶剂和洗涤剂的原料，但是，由于缫丝蛹脱臭技术难，直接影响着蛹资源综合加工系列产品质量。迫于茧丝绸产业生产上的急需，缫丝蛹蛋白脱臭技术改进仍停留在一般化工工艺与设备上，应用生物技术发酵缫丝蛹脱臭未见突破性进展，因此亟待开展用生物技术去除缫丝蛹臭味的研究。
缫丝蛹蛋白发臭，主要是因为有大量胺类物质、如三甲胺、二乙胺、正己胺、特别是三甲胺，所以除去或减少胺类物含量就可以脱臭。
本发明的目的是提供一种缫丝蛹的生物脱臭方法，生物发酵缫丝蛹脱臭，使缫丝蛹蛋白三甲胺类物含量＜0.5％。
实现上述目的技术方案是将缫丝蛹水蛹糜或干蛹粉碎成粉，过20目筛，加入麸皮，谷糠和水，灭菌后作培养基，接种As3.374栖土曲霉的增殖培养物，加温发酵，过滤得脱臭可溶性蛹蛋白，滤渣返回再发酵。具体方法步骤是1、按缫丝蛹∶麸皮∶谷糠＝100∶(8.75-20.0)∶(1.25-2.00)干料重量比例称料配料，加入配料量100％-120％的自来水、封闭，2、在110-121℃蒸汽灭菌30分钟，作培养基。
3、待料温度降到30-31℃时接种，As3.374培养物固体种子，加入量为4-8％重量(以培养基为基数)。
4、在33-35℃，PH7.0-7.2发酵≥58小时。
5、在30℃恒温2小时，即完成脱臭。
取样测得蛋白酶活力在4000单位以上，残胺量＜0.15％。
其原料缫丝干蛹、缫丝水蛹糜及麸皮由湖北省罗田明星实业总公司提供，谷糠市场上购买。As3.374增殖培养物，是中国典型生物保藏中心提供的As3.374栖土曲霉，原种菌在斜面种子培养基上进行增殖培养的产物。斜面培养基25克干蛹粉加100毫升水，煮沸15分钟，过滤得滤液80毫升，加入该液量的NaNO30.2％，K2HPO40.1％、KCl0.01％、MgSO40.05％、FeSO40.001％、蔗糖3％，琼脂1.5-2％，加水到100毫升。接入As3.374原菌，在30-32℃下培养3-4天，得到外观无绉折、菌落大，菌丝孢子土褐色，镜检孢子多、菌丝粗状、整齐。
监测方法蛋白酶活力费林法酸度0.1N NaOH溶液滴定PH值用精密PH(9-12)试纸测定残胺液相色谱法，用岛津LC-3A液相色谱仪、色柱为Lc柱-ISC-07/S1504，FLD-1萤光检测器测光，条件载流速度0.5毫升/分，压力60-70公斤/厘米2，柱温55℃，取基料5克用缓冲液(PHg)，40℃，500毫升浸取1小时，取50毫升浸出液待测，每发酵间隔24小时抽样监测一次。
发酵器盘式生物反应器。
附图给出了发酵过程中菌生长产酶和三甲胺的变化。
图1是菌生长产酶和三甲胺消耗曲线。
图2是发酵过程中酸度和PH曲线。
实施例1称取53.3克过20目筛的缫丝干蛹粉、36.6克粗麸皮、10.1克谷糠，加入500毫升水，拌匀装入500毫升三角瓶150克，封瓶，以1公斤/厘米2蒸汽灭菌30分钟，在灭菌室内取1支孢子生长茂蜜的As3.37培养物菌种、用无菌水10毫升洗成孢子悬液，无菌吸管吸取1毫升，接入三角瓶料中拌匀，置入30-33℃温箱培养12小时，摇瓶，6小时后再次摇瓶，待菌丝生长结块时，扣瓶成块，培养30小时后，产生大量褐色孢子时，升温到34-35℃培养24小时，测蛋白酶活力在5000单位以上，三甲胺类物在0.05％以下。
实施例2称取75.2克缫丝水蛹制糜，加麸皮14.8克，加入5克谷糠，水120毫升，拌匀装入500毫升三角瓶100克，封瓶，在110-121℃灭菌30分钟，用无菌吸管接入As3.374菌孢子悬液4毫升，置入30-33℃温箱斜放8小时后摇瓶立放，6小时后再摇瓶，培养至2天后，扣瓶升温至35℃培养一天，测得蛋白酶活力4000单位以上，三甲胺类物0.15％以下。
实施例3称取缫丝蛹蛋白粉26.7克，精麸皮62.8克，加入谷糠16克，和水700毫升，拌匀装入500毫升三角瓶250克，封瓶，1公斤/厘米2蒸汽灭菌30分钟，接入As3.374菌孢子悬液0.5毫升，置入28-30℃温箱斜放培养6小时，摇瓶直放、升温至32℃培养12小时后再摇瓶，培养至2天后扣瓶升温干燥，测其蛋白酶在4000-5000单位以内，三甲胺类物在0.01％以下。
实施例4常温下向盘式生物反应器内按固体培养基重量干蛹85％、麸皮10％、谷糠5％、加入100％-120％水比投料10公斤，用1公斤/厘米2蒸汽灭菌，然后待料温降至30-31℃时，接As3.374培养物，接种量为料量4％重量，先堆集培养5-6小时，品温升至35℃时翻堆，每盘1.5公斤(干料)。此时将反应器温度提高到31-33℃，继续培养7-10小时，进行划盘，将缫丝蛹培养料划成小块，供以充足空气，利于孢子生长，培养50小时后将反应器温度升至34-35℃，使其逐步干燥，至72小时，孢子生长均匀茂密。其菌体生长产酶和三甲胺消耗如图1，图中1表示蛋白酶变化曲线，2残胺三甲胺变化曲线，由图1可见，发酵菌生长48小时达产酶高峰，菌丝体繁殖速度最高，使三甲胺臭味物成份迅速呈线型下降。产酶高峰后期胺类消耗速度达最大值，发酵终了三甲胺类物达0.05％。说明菌丝体生长旺盛时，消耗了大量胺类，达到了去除蛹臭的目的。
在发酵除蛹臭过程中酸度和PH值的变化如图2，图中3是酸度的变化曲线，4是PH值变化曲线，可以看出，在发酵过程中PH值的变化不大，酸度随发酵时间的增长而提高，但提高幅度不大，增酸一般在3.5以内，说明杀菌并未影响缫丝蛹发酵脱臭过程。
从以上结果证明，用As3.374栖土曲酶发酵缫丝蛹脱臭工艺技术是可行的现代生物技术方法，其工艺简单，成本低，负加值高，经济效益好。
权利要求
1.一种缫丝蛹的生物脱臭方法，其特征是按缫丝蛹∶麸皮∶谷糠＝100∶(8.75-200)∶(1.25-2.00 )干料重量比例称料配料，加入配料干料重100％-120％水，封闭，在110-121℃蒸汽灭菌，待料温度降到30-31℃时接种As3.374培养物，加入量为料重量的4-8％，在33-35℃，PH7.0-7.2发酵≥58小时，然后在30℃恒温2小时。
2.如权利要求1所述脱臭方法，其特征是在110-121℃蒸汽灭菌30分钟。
3.如权利要求1所述的脱臭方法，其特征是As3.374培养物是栖土曲霉As3.374在斜面培养基上，在30-32℃下培养3-4天的培养物。
4.如权利要求3所述的除臭方法，其特征是所述斜面培养基，是25克干蛹粉加100毫升水，煮沸15分钟、过滤，滤液中加入该液重量的NaNO30.2％、K2HPO40.1％、KCl0.01％、MgSO40.05％、FeSO40.001％、蔗糖3％，琼脂1.5-2％，加水到100毫升。
全文摘要
一种缫丝蛹的生物脱臭方法，该方法是将缫丝蛹水蛹糜或干蛹粉加麸皮，谷糠和水，在110-121℃蒸汽灭菌后，接种As3.374栖土曲霉增殖培养物，加入量为上述料量4-8％，然后33-35℃，pH7.0-7.2条件下发酵≥58小时，再在30℃下恒温2小时，即可，这样处理过的缫丝蛹的蛋白酶活力在4000单位以上，三甲胺类物＜0.15％。
文档编号C12N1/14GK1156178SQ96119698
公开日1997年8月6日 申请日期1996年12月11日 优先权日1996年12月11日
发明者干信, 张远祥, 糜志远, 林世平, 王常高 申请人:罗田县明星实业总公司