白芸豆α-淀粉酶抑制剂的提取分离方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品科学生物活性成分提取分离领域，尤其涉及白芸豆α -淀粉酶抑制剂的提取分离方法。
【背景技术】
[0002]白芸豆a-淀粉酶抑制剂是从豆科芸豆属植物白芸豆(phaseolus coccineus L.，P.multiflorus willd.)中提取而成。白芸豆生物学名为多花菜豆，原产美洲的墨西哥和阿根延，后经人工栽培驯化已适应冷凉潮湿的高原地带。种植面积较大的国家是美洲的阿根廷、美国、墨西哥，欧洲的英国，亚洲的中国、日本等。现在中国的各个省区均有种植，面积较大的省份是云南、贵州、四川等。
[0003]白芸豆a-淀粉酶抑制剂是一种天然淀粉阻断剂，它能在人体内的a-淀粉酶将摄入的淀粉转化为葡萄糖之前，抑制其活性，从而有效阻断肌体吸收来自淀粉类食物所产生的热量。淀粉酶抑制剂是第一个经临床验证有效的淀粉阻断剂，并且通过了美国FDA(食品药品监督管理局)和美国GRAS(—般认为安全)的认证，是唯一可以在包装上明示“可以减少膳食中淀粉的消化和吸收”、“配合合理的饮食和运动，可以帮助控制体重”等功能的食品。主要用于治疗和防治肥胖症，糖尿病，还有健脾壮肾等功用。
[0004]目前，国内外对于白芸豆α-淀粉酶抑制剂的提取分离主要采用以下流程:原料-粉碎-水浸-离心分离-上清液-盐析(沉淀再溶解)-加热灭酶-离心分离-上清液_透析-浓缩_干燥_成品。
[0005]这些方法大多都是作为白芸豆α -淀粉酶抑制剂较高纯度的产品生产，特点是纯度高，但得率极低。大多作为在科学研宄或贵重药品中使用，而在食品、保健品中因其成本偏高而无法使用，因而目前市场上有许多假货充斥市场，因此市场上急需一种适合食品、保健品生产中使用的白芸豆α-淀粉酶抑制剂产品。
【发明内容】
[0006]本发明的实施例提供一种白芸豆α -淀粉酶抑制剂的提取分离方法，可以提高获得率，增加产量。
[0007]为达到上述目的，本发明的实施例采用如下技术方案:
[0008]一种白芸豆α -淀粉酶抑制剂的提取分离方法，包括:
[0009]将白芸豆粉碎，获得白芸豆粗粉；将所述白芸豆粗粉在常温下用水搅拌提取3遍，过滤获得滤液，将所述滤液减压浓缩成浓缩液，将所述浓缩液煮沸杀毒，加葡萄糖内酯凝固剂，沉淀，过滤，获得沉淀物；将所述沉淀物脱色，脱水，过滤抽干，真空干燥，粉碎，即得白芸豆α-淀粉酶抑制剂产品。
[0010]优选的，所述方法具体包括:
[0011]S1、将白芸豆粉碎，过10目筛，获得白芸豆粗粉；
[0012]S2、用碳酸氢钠调制出pH为7.5的自来水；
[0013]S3、在所述白芸豆粗粉中加入10-15倍的所述pH为7.5的自来水，于20_35°C下搅拌4-6h，过滤，收集第一次滤液以及第一次残渣；
[0014]S4、在所述第一次残渣中在加入8-12倍的所述pH为7.5的自来水，于20_35°C下搅拌2-4h，过滤，收集第二次滤液以及第二次残渣；
[0015]S5、在所述第二次残渣中加入8-12倍的所述pH为7.5的自来水，于20-35°C下搅拌2-4h，过滤，收集第三次滤液；
[0016]S6、合并所述第一次滤液、第二次滤液以及第三次滤液为混合滤液，将所述混合滤液于65°C下减压浓缩至原料量的2-4倍，获得浓缩液；
[0017]S7、将所述浓缩液加热煮沸5-10min，趁热加入浓缩液量1% -2%的葡萄糖内酯，充分溶解，80°C下保温30-60min，再静置5h以上，使蛋白质充分凝固，然后离心或过滤，获得沉淀物；
[0018]S8、将所述沉淀物先用75%酒精洗一遍，脱色，再用95%酒精洗一遍，脱水，离心或过滤抽干，于55_60°C真空干燥，粉碎，即得白芸豆α -淀粉酶抑制剂产品。
[0019]本发明的有益效果:
[0020](I)本发明采用低温下搅拌提取，即不造成蛋白质变性，使α-淀粉酶抑制剂失活，又不造成淀粉糊化，影响溶液过滤。
[0021](2)本发明采用碳酸氢钠水溶液调pH为7.5的自来水来提取α -淀粉酶抑制剂，他有助于白芸豆蛋白质的溶出和胶体溶液的稳定，抑制蛋白质的水解反应，提高浓缩液中蛋白质的凝固率，增加产量。
[0022](3)本发明将葡萄糖内酯作为白芸豆蛋白质凝固剂，一改蛋白质沉淀常用的醇沉淀、酸沉淀或铵盐沉淀的方法，改变了醇沉工艺会使多糖随蛋白质一起沉淀出来，使产品含糖量过高，不利用产品在治疗和防治肥胖症，糖尿病中的应用；改变了铵盐沉淀后必须充分除盐方可使用的弊端，使白芸豆蛋白质沉淀物(白芸豆α-淀粉酶抑制剂)很安全、很适口的在食品、保健品中使用。
[0023](4)本发明采用浓缩液煮沸5-10min，其目的就是使植物凝集素失活，使白芸豆淀粉酶抑制剂在食品、保健品中能够得到安全使用，而不会因植物凝集素对人和哺乳动物有较强毒副作用的存在而造成伤害。
[0024](5)本发明采用沉淀物先用75%酒精洗一遍，脱色，在用95%酒精洗一遍，脱水，以保证产品有较浅的色泽，便于在食品、保健品中使用。
【具体实施方式】
[0025]下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0026]实施例1:
[0027]白芸豆粉碎，过10目筛，称取白芸豆粗粉50kg，加入用碳酸氢钠水溶液调pH为7.5的自来水10倍，于20°C下搅拌提取4h，过滤，收集第一次滤液，在第一次残渣中加入用碳酸氢钠水溶液调PH为7.5的自来水8倍，于20°C下搅拌提取2h，过滤，收集第二次滤液，在第二次残渣中加入用碳酸氢钠水溶液调pH为7.5的自来水8倍，于20 °C下搅拌提取2h，过滤，收集第三次滤液，合并三次滤液成混合滤液，混合滤液于65°C下减压浓缩成浓缩液，所述浓缩液是所述混合滤液原料量的3倍，将所述浓缩液加热煮沸5-10min，趁热加入浓缩液量1%的葡萄糖内酯，充分溶解，80°C下保温30min，再静置5h以上，使蛋白质充分凝固剂，离心或过滤获得沉淀物，沉淀物先用75%酒精洗一遍，脱色，再用95%酒精洗一遍，脱水，离心或过滤抽干，于55-60°C真空干燥，粉碎，即得白芸豆α -淀粉酶抑制剂产品
5.85kg0
[0028]实施例2:
[0029]白芸豆粉碎，过10目筛，称取白芸豆粗粉50kg，加入用碳酸氢钠水溶液调pH为7.5的自来水15倍，