菜柏6%，食盐1.5%，小苏打1.5%，石粉1.0%，碳酸氢钙 1. 0%〇
[0030] 所述的基础日粮的粗料由下列原料组成：象草，麦芽啤酒糟，木薯渣。
[0031] 实施例2采用本发明所述饲料对奶水牛进行对比饲喂实验
[0032] 1.试验过程
[0033] I. 1试验材料
[0034] 火麻油，在广西巴马购买的巴马火麻籽自榨而得。根据张春梅（2008)对植物油的 测定方法测定得到火麻油脂肪酸组成如表1。
[0035] 表1火麻油脂肪酸组成（％ )
[0036]
[0038] I. 2试验动物和饲养管理
[0039] 试验地点：中国农业科学院广西水牛研究所的养殖示范研究基地牛场1栋牛舍
[0040] 试验动物：三品杂奶水牛（本地水牛X尼里-拉菲水牛X摩拉水牛）18头
[0041] 试验时间：2014年5月18日一2014年6月28日
[0042] 饲养管理：牛只由专人负责，单槽统一饲养，按先粗后精的原则饲喂且饲喂一致， 试验动物的精料为玉米豆柏型，粗料由象草、麦芽啤酒糟、木薯渣组成。常规光照，驱虫，自 由饮水。分别在上午6:00-9:00和下午14:30-16:00统一人工挤奶。并于每次挤奶后驱赶 至运动场适量运动或到池塘泡水。
[0043] 1. 3试验设计
[0044] 本试验采用单因素随机分组的试验设计，挑选18头泌乳中期、胎次相近（2、3胎） 且健康状况良好的泌乳期奶水牛按每组产奶量无明显差异的原则分为3组，每组6头。3组 奶牛随机安排以下三种日粮中的一种：⑴对照组：饲喂基础日粮⑵l〇〇g/d火麻油组：在 基础日粮的精料中添加 l〇〇g/d的火麻油（3)200g/d火麻油组：在基础日粮的精料中添加 200g/d的火麻油。试验持续42天，其中前2周为预饲期，后4周为正式试验。预饲期内火 麻油的添加量由低到高，逐步添加至试验设定水平并维持。
[0045] 1.4试验日粮
[0046] 试验动物的基础日粮由精饲料和粗饲料组成，其中精饲料为玉米豆柏型，粗饲料 由麦芽啤酒渣、象草和发酵木薯渣组成。试验动物的基础日粮及日粮中精饲料和粗饲料的 组成及营养水平分别列表如下，见表2、3和4。
[0047] 表2基础日粮组成及营养水平（风干基础，％ )
[0048]
[0049] 表3精料组成及营养成分（风干基础，％ )
[0050]
[
[0052] 1预混料组成：维生素 A500KIU/kg，维生素 D3150KIU/kg，维生素 E3000KIU/kg，铁 4. Og/kg，铜 I. 3g/kg，猛 3. Og/kg，锌 6. Og/kg，碘 80mg/kg，硒 50mg/kg，钴 80mg/kg。
[0053] 2所有营养水平均为测定值All nutrient levels are measured values〇
[0054] 表4粗饲料组成和常规营养成分（风干基础，％ )
[0055]
[0056] 1.5样品的采集
[0057] 在试验正式期的第一周、第二周、第三周、第四周每周倒数第二天的上午8:30和 下午3:30分别采集乳样一次，每次采集100mL。上午采集的样品于4°C冷藏，待下午采集后 两份样品轻摇混合均匀，每头牛得到200mL奶样。将奶样分成两份，一份立刻测乳成分，一 份-80°C冰箱储存，用于测定乳脂肪酸组成。
[0058] 1.6测定指标与方法
[0059] 1. 6. 1干物质采食量的测定
[0060] 于试验最后一周随机选4天测定每头试验牛每种饲料原料的喂料量和剩料量，通 过计算并统计出每组试验牛的日均干物质采食量。
[0061] 1.6. 2产奶量和乳成分的测定
[0062] 试验期每天每次挤奶后称奶重并记录，统计出每头试验牛日产奶量。
[0063] 取采集的乳样IOOmL立刻用乳品多功能分析仪（MSC FT-120,F0SS)测定其常规营 养成分：乳脂率、乳蛋白率、总固形物和乳糖的含量。
[0064] 1. 6. 3乳脂肪酸组成的测定
[0065] 1. 3. 2. 1乳脂的提纯和甲酯化
[0066] 奶样中脂肪酸需先提取进行甲酯化后进行气相检测，具体方法根据相关文献做了 部分修改，具体如下：
[0067] 乳脂的纯化：
[0068] (1)从_80°C冰箱取出待测样品，置于30°C水浴锅中解冻后摇匀。取奶样50mL，在 8°C下5000r/min离心30min使之分层，定量称取上层乳脂500mg于一组15mL带盖离心管。
[0069] (2)向第一组试管中加入9mL正己烷：异丙醇混合溶液（v/v = 3:2)，涡旋成乳浊 液，再加2mL丙酮，涡旋30s，加入0. 067g/mL浓度的硫酸钠溶液5mL，涡旋后密封，静置分层 或在5°C下2000r/min离心5min分层。
[0070] (3)将上层有机相转移至第二组15mL带盖离心管，加 Ig无水硫酸钠剧烈震荡干燥 后定量滤纸过滤。将滤液转入一组新的试管，用氮吹仪在40°C水浴锅内氮气吹至胶体状即 得到提纯的脂质。
[0071] 脂肪酸的甲酯化：
[0072] (1)定量称取脂质80mg左右于一组新的15mL带盖离心管，加入4mL正己烷，涡旋 至完全溶解，加入100 μ L浓度为2mg/mL的C19:0做内标物，涡旋混匀。
[0073] (2)立即加入80 μ L乙酸甲酯，涡旋混勾，防止甲酯化试剂过量造成长链脂肪酸皂 化或者异构化。再加入160yL 0.5Μ的甲醇钠试剂，涡旋混匀，静置IOmin进行甲酯化。
[0074] (3)加入120 μ L终止剂（3 %无水草酸乙醚），涡旋混勾，使体系pH变小，甲酯化反 应终止。静置沉淀。
[0075] (4)加少量无水硫酸钠震荡干燥，在5°C下2500r/min离心5min，取上清液于干净 的离心管内，在40°C水浴锅内氮气吹干后用正己烧定容至ImL后，转移至Agilent气象色谱 瓶中，上机测定其脂肪酸含量。
[0076] 1. 3. 2. 2色谱分析条件
[0077] (1)气相色谱仪与积分仪：Agilent 7890A
[0078] (2)自动进样器：Agilent G4513A，温度为 250°C
[0079] (3)检测器：氢火焰离子化检测器（FID)，温度为250°C
[0080] (4)气相色谱柱：Agilent HP88脂肪酸测定专用毛细管柱，规格为 IOOmXO. 25mmX0. 20um
[0081] (5)升温程序：参照张双双乳脂气象色谱检测升温程序。
[0082] (6)载气及流速：载气为高纯氦气（He，纯度为99. 999% )，流量为I. lmL/min ;氢 气，流量为30mL/min ;压缩空气，流量为400mL/min。
[0083] (7)进样量：1. OyL
[0084] (8)分流比：20:1。
[0085] 1. 3. 2. 3标准溶液的配制
[0086] 将脂肪酸甲酯标准品 C4:0、C6:0、C8:0、C10:0、C12:0、C14:0、C14:ln5、C16:0、 C16:ln7、C17:0、C18:0、C18:ln9c、C18:ln9t、C18:lnllt、C18:2n6c、C18:3n3、C19:0、 C18:3n6 (均为Sigma公司）和C18:2n9c、C18:2nl0t (均为Matreya公司）分别配制成浓度 梯度为 lmg/mL，0· 5mg/mL，0· 25mg/mL，0· 125mg/mL，0· 0625mg/mL 的系列标准液。在 1. 3. 2. 2 的色谱条件下上机重复测定三次，计算各脂肪酸测定的重复性和同一脂肪酸甲酯不同质量 浓度下的峰面积。以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标绘制标曲，得到个单个脂肪酸甲酯的线 性回归方程式。
[0087] 结果采用面积归一法分析，按各脂肪酸组分占总脂肪酸的百分比表示。
[0088] 1. 7数据统计
[0089] 所有记录数据均用Excel 2014软件录入并进行初步统计，然后用SPSS Statistics 17. 0软件作单因素方差分析、Duncan法进行多重比较，结果用平均值土标准 误（Mean土SE)表示，试验结果以P < 0. 05作为差异显著的判断标准。
[0090] 2.结果与分析
[0091] 2. 1日粮添加火麻油对奶水牛干物质采食量的影响
[0092] 日粮添加火麻油对奶水牛干物质采食量的影响如表5。由表5可知，与对照组相 比，日粮添加火麻油可降低奶水牛的干物质采食量，l〇〇g/d火麻油组和200g/d火麻油组干 物质采食量相对于对照组分别降低了 11. 4%和10. 9%，差异均显著（P < 0. 05)，但是两处 理组间无显著差异（P > 0. 05)。这说明添加火麻油能够显著降低奶水牛的干物质采食量， 但不同添加剂量间无显著差异。
[0093] 表5日粮添加火麻油对干物质采食量的影响（kg/d)
[0094]
[0095] 2. 2日粮添加火麻油对奶水牛产奶量的影响
[0096] 各试验组试验正式期每周日产奶量和4%标准乳产量见表6。由表6可知，各处理 组与对照组间日产奶量和4%标准乳产量