一种基于丝瓜布处理棉籽制备棉籽蛋白的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种基于丝瓜布处理棉籽制备棉籽蛋白的制备方法，属于棉籽蛋白制备领域。
【背景技术】
[0002]棉籽蛋白是由棉籽经过剥绒、剥壳，在低温下一次性浸油、沥干后再经过脱除有毒物质一一棉酚后制成的一种高蛋白产品，是国内新上市的一种蛋白原料。我国是一个蛋白资源缺乏的国家，我国是产棉大国，拥有丰富的棉花资源，我国年产棉籽量约为663万吨，除一部分留作种用，剩下的基本用于榨油，因此每年在生产106万吨左右的棉籽油估的同时可产生318万吨左右的棉柏。棉柏含有丰富的蛋白质资源和多种维生素及微量元素，但由于其中含有较高的抗营养因子游离棉酚毒类及环丙烯脂肪酸，导致棉柏的综合利用受到极大限制。目前，仅有16%的棉酚用于饲料，绝大部分被直接用作肥料，导致大量优质蛋白的流失。棉柏中的蛋白是一种植物性蛋白，其含量约占33.21%?45.09%，是大米和小麦中的蛋白含量的5?8倍，从含量上可与大豆蛋白相媲美。开发利用好这一资源，既是解决我国饲料蛋白不足的快捷、经济的途径，又是解决奶源不足的有效办法，同时还是促进农村经济的发展。
[0003]目前棉籽蛋白的提取方法有溶剂萃取法、碱溶酸沉法和酶法，有溶剂萃取法通常采用甲醇、丙酮等进行萃取，由于溶剂的残留增加了产品的危害性，同时限制了棉籽蛋白的应用范围；碱溶酸沉法再制备过程中产生大量的废酸、废碱水，制备步骤繁琐且污染环境，提取的棉籽蛋白纯度低；酶解提取的棉籽蛋白质量好，但酶解过程控制难度大，生产成本高。因此研究出一种成本低、所得产品纯度高的棉籽蛋白制备方法，在相关领域具有重要的意义。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题:针对上述方法生产棉籽蛋白时需使用大量有机溶剂萃取，产生大量的废酸废碱污染环境，且由于制备过程中有机溶剂易残留、可控难度大，导致所得产品纯度低、生产成本高的弊端，提供了一种通过利用丝瓜布内部丰富的网状结构，首先通过盐酸及脯氨酸对其进行预处理，去除其中的杂质，再将其进行炭化，使其具有吸附有害物质及对微生物提供载体，然后对菌种培养，之后将其负载于所处理后的丝瓜布中，形成可去除有害物质及脱酚的丝瓜布，最后将棉籽喷入其中进行处理制得棉籽蛋白的方法。本发明制备步骤简单，所得产品纯度高。
[0005]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是:
(1)取600?900g丝瓜布放入容器中，向其中加入质量分数为15%的盐酸溶液浸泡丝瓜布，再向其中加入20?40g脯氨酸混合均匀，然后将容器移至超声波清洗机中，在超声环境下，振荡10?20min，随后对容器进行加热，温度设定为60?70°C，保持温度30?50min ； (2)待上述保温结束后过滤，收集丝瓜布，将所得的丝瓜布放入烘箱中进行烘干，然后将烘干后的丝瓜布放入气化式炭化炉中，在温度为180?220°C下，初步炭化1?2h，待初步炭化结束后，将初步炭化后的丝瓜布取出，自然冷却至室温，备用；
(3)按重量份数计，取50?60份牛肉膏、15?20份葡萄糖、15?25份琼脂及5?10份去离子水，混合均匀得培养液，然后取50?60mL培养液放入250mL摇瓶中，再将摇瓶放置在紫外灯下进行杀菌，随后取200?400mg蘑菇培养基上表面浅绿色菌丝放入摇瓶中，与培养液混合均勾;
(4)待上述混合均匀后密封摇瓶，将摇瓶移至温度为35?40°C的培养室内，进行培养7?15天后，将摇瓶中的培养物倒入500mL的烧瓶中，然后向其中加入300?320mL质量分数为0.7?0.9%的盐酸溶液，使用搅拌器以200?240r/min的转速，搅拌10?15min后，静置5?lOmin ；
(5)待上述静置结束后，将容器中的混合物放入离心机中，在6000?8000r/min的转速下，离心分离1?2min，收集离心液，然后将所得的离心液使用喷雾器，喷入步骤(2)中所得的初步炭化的丝瓜布中，进行自然风干；
(6)取500?600g棉籽放入烘箱中进行烘干，然后放入粉碎机中进行粉碎，过筛得100?120目粉末，将所得的粉末使用喷枪，喷入上述所得的丝瓜布中，然后将丝瓜布移至保温室中，控制温度为30?35°C，同时使用加湿器对其进行加湿，保持其内部空气的含水量为30?35%，保持温度18?22h ；
(7)待其上述保温结束后，对丝瓜布进行自然风干，然后使用振荡器对丝瓜布进行振荡处理，直至无任何物质下落，收集下落物放入容器中，向其中加入蒸馏水，淹没下落物2?3cm，搅拌均匀，去除漂浮在水面的漂浮物，将容器内的混合物放入离心机中进行离心分离，收集离心物，放入烘箱中烘干，再在紫外线下进行灭酶杀菌，即可得到棉籽蛋白。
[0006]本发明的应用方法:将本发明制得的棉籽蛋白添加到饲料中，添加量为5?7g/kg,每日早晚各添加一次，搅拌混合均匀，饲喂泌乳牛，10?15天后，泌乳牛平均每日增产
14.36%，食欲好、牛奶产量增高，食用后对泌乳牛的健康繁殖无不良影响。测得该棉籽蛋白中游离棉酚的含量低于0.038%以下，总棉酚含量低于0.8%以下，值得推广与发展。
[0007]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明制备方法简单，制备过程可控性强，无需使用大量有机溶剂，安全环保无污染；
(2)所得产品纯度高于其他方法12%以上，生产成本低于其他方法7%以上。
【具体实施方式】
[0008]首先取600?900g丝瓜布放入容器中，向其中加入质量分数为15%的盐酸溶液浸泡丝瓜布，再向其中加入20?40g脯氨酸混合均匀，然后将容器移至超声波清洗机中，在超声环境下，振荡10?20min，随后对容器进行加热，温度设定为60?70°C，保持温度30?50min ;待上述保温结束后过滤，收集丝瓜布，将所得的丝瓜布放入烘箱中进行烘干，然后将烘干后的丝瓜布放入气化式炭化炉中，在温度为180?220°C下，初步炭化1?2h，待初步炭化结束后，将初步炭化后的丝瓜布取出，自然冷却至室温，备用；然后按重量份数计，取50?60份牛肉膏、15?20份葡萄糖、15?25份琼脂及5?10份去离子水，混合均匀得培养液，然后取50?60mL培养液放入250mL摇瓶中，再将摇瓶放置在紫外灯下进行杀菌，随后取200?400mg蘑菇培养基上表面浅绿色菌丝放入摇瓶中，与培养液混合均匀；然后待上述混合均勾后密封摇瓶，将摇瓶移至温度为35?40°C的培养室内，进行培养7?15天后，将摇瓶中的培养物倒入500mL的烧瓶中，然后向其中加入300?320mL质量分数为0.7?
0.9%的盐酸溶液，使用搅拌器以200?240r/min的转速，搅拌10?15min后，静置5?lOmin ;待上述静置结束后，将容器中的混合物放入离心机中，在6000?8000r/min的转速下，离心分离1?2min，收集离心液，然后将所得的离心液使用喷雾器，喷入备用的初步炭化的丝瓜布中，进行自然风干；再取500?600g棉籽放入烘箱中进行烘干，然后放入粉碎机中进行粉碎，过筛得100?120目粉末，将所得的粉末使用喷枪，喷入上述所得的丝瓜布中，然后将丝瓜布移至保温室中，控制温度为30?35°C，同时使用加湿器对其进行加湿，保持其内部空气的含水量为30?35%，保持温度18?22h ;最后待其上述保温结束后，对丝瓜布进行自然风干，然后使用振荡器对丝瓜布进行振荡处理，直至无任何物质下落，收集下落物放入容器中，向其中加入蒸馏水，淹没下落物2?3cm，搅拌均匀，去除漂浮在水面的漂浮物，将容器内的混合物放入离心机中进行离心分离，收集离心物，放入烘箱中烘干，再在紫外线下进行灭酶杀菌，即可得到棉籽蛋白。
[0009]实例1
首先取600g丝瓜布放入容器中，向其中加入质量分数为15%的盐酸溶液浸泡丝瓜布，再向其中加入20g脯氨酸混合均匀，然后将容器移至超声波清洗机中，在超声环境下，振荡lOmin，随后对容器进行加热，温度设定为60°C，保持温度30min ;待上述保温结束后过滤，收集丝瓜布，将所得的丝瓜布放入烘箱中进行烘干，然后将烘干后的丝瓜布放入气化式炭化炉中，在温度为180°C下，初步炭化lh，待初步炭化结束后，将初步炭化后的丝瓜布取出，自然冷却至室温，备用；然后按重量份数计，取50份牛肉膏、20份葡萄糖、25份琼脂及5份去离子水，混合均匀得培养液，然后取50mL培养液放入250mL摇瓶中，再将摇瓶放置在紫外灯下进行杀菌，随后取200mg蘑菇培养基上表面浅绿色菌丝放入摇瓶中，与培养液混合均匀；然后待上述混合均匀后密封摇瓶，将摇瓶移至温度为35°C的培养室内，进行培养7天后，将摇瓶中的培养物倒入500mL的烧瓶中，然后向其中加入300mL质量分数为0.7%的盐酸溶液，使用搅拌器以200r/min的转速，搅拌lOmin后，静置5min ;待上述静置结束后，将容器中的混合物放入离心机中，在6000r/min的转速下，离心分离lmin，收集离心液，然后将所得的离心液使用喷雾器，喷入备用的初步炭化的丝瓜布中，进行自然风干；再取500g棉籽放入烘箱中进行烘干，然后放入粉碎机中进行粉碎，过筛得10