尔马林溶液固定，石蜡包埋，切片，行皿染 色。根据光学显微镜下肝脏组织学变化情况，将肝脏脂肪变性程度分为4个等级：
[0060] 表示肝细胞结构正常或偶见脂肪空泡；
[0061 ] V'表示肝小叶内1/3肝细胞脂肪变性，累及的肝小叶数<50% ;
[0062] "++"表示肝小叶内2/3肝细胞脂肪变性，累及的肝小叶数<50%，或肝小叶内1/3 肝细胞脂肪变性，累及肝小叶数巧0% ;
[0063] "+++"表示肝小叶内>2/3肝细胞脂肪变性，累及的肝小叶数巧0%。
[0064] 另取肝组织，切成Imm3左右小块，4%戊二醒前固定，1%饿酸后固定，常规丙酬梯 度脱水，环氧树脂61的参透包埋，超薄切片，醋酸双轴和巧樣酸铅染色透射电镜观察并摄片。 [00化]所有数据均采用充ts表示，采用SPSS 13.0软件进行统计，显著性检测采用单因素 方差分析，对肝脏的病理学检查结果采用等级资料的秩和检测。
[0066] 3、实验结果
[0067] 本发明冲剂对肝脏系数和血清脂质的影响见表2。结果显示，高脂性脂肪肝模型组 与对照组相比较，肝脏系数显著升高(P<〇.01)。本发明冲剂连续给药4周后，肝脏系数(P< 0.05、0.0 l)。与对照组比较，模型组大鼠血清TC、TG和戶常明显升高(P<0.0 l)，但FFA 无差异性。本发明冲剂连续灌胃4周后，与模型组相比，高、中、低剂量组大鼠血清TC、TG、 LDkC、FFA的水平均显著降低(P<0.05、0.0 l)，对血清皿心(：有一定的升高作用(P<0.05)。
[006引表2本发明冲剂对大鼠肝脏系数、血清脂质的影响（化S，n = 30)
[0070] 备注:与对照组比较P<0.0 l;与模型组比较P<0.0 l。
[0071] 本发明冲剂对血清41；1、451\500、104的影响见表3，结果表示模型组与对照组比 较，ALT和AST水平的变化无统计学意义。本发明冲剂高、中、低给药组大鼠血清ALT和AST水 平明显降低。<0.05、0.01)。与对照组比较，模型组大鼠血清中800明显降低。<0.01)，但 MDA无显著变化。本发明冲剂连续灌胃4周后，高、中、低剂量显著降低高脂性脂肪肝大鼠血 清中 MDA 水平。<0.05、0.01)，显著升高500活性。<0.05,0.01)。
[0072] 表3本发明冲剂对大鼠血清中41；1'、451'、500、104的影响（父±3,〇 = 3〇)
[0075] 备注:与对照组比较P<0.0 l;与模型组比较P<0.0 l。
[0076] 本发明冲剂对肝脏脂质及MDA、S0D变化的影响见表4,结果表示模型组与对照组相 比，肝组织中TC、TG水平极显著增加(P<0.01)，MDA也明显增加(P<0.05)。本发明冲剂连续 灌胃4周后，高、中、低剂量显著降低高脂性脂肪肝大鼠肝组织中TC、TG、FFA和MDA的量(P< 0.05、0.01)，同时显著升高500活性。<0.05)。
[0077] 表4本发明冲剂对大鼠肝脏脂质及S0D、MDA水平的影响（x±s，n = 30)
[0079] 备注:与对照组比较P<0.01;与模型组比较P<0.05，P<0.01。
[0080] 本发明冲剂对脂肪肝大鼠的病理组织学观察的实验数据见表5,光镜下观察结果 显示：对照组肝细胞排列呈索状，结构正常；模型组大鼠明显可见肝细胞弥漫性的脂质空 泡，并伴有融合现象，给予高、中、低剂量的本发明冲剂4周后，肝细胞脂质变性的程度明显 减轻，肝细胞结构趋于正常。电子显微镜下观察可见对照组肝细胞结构正常，而模型组大鼠 肝细胞超微结构明显改变，肝细胞线粒体轻微肿胀、染色体边集、空泡变形，并且充满大小 不等的脂滴等。给予高、中、低剂量的本发明冲剂4周后，明显改善肝细胞线粒体肿胀、染色 体边集和空泡变形和脂滴。
[0081] 表5本发明冲剂对大鼠肝脏脂肪变性组织学变化的影响（x±s，n = 30)
[0084] 备注:与对照组比较#胖<0.0 l;与模型组比较*冲<0.0 l。
[0085] 综上所述，得出W下结论:本发明冲剂灌胃给予高脂性脂肪肝大鼠4周后，肝脏系 数显著降低，血清TC、TG、DレC、FFA、MDA、ALT和AST水平显著降低，血清皿レC水平显著增强， 血清SOD活性显著增加，肝组织中的^^6少。4、104水平显著降低，500活性显著增强。光镜 和电镜检查结果显示，给予本发明冲剂4周后大鼠肝细胞脂肪变性程度和超微结构改变得 到明显的改善。上述实验结果表明本发明冲剂可显著调节高脂性脂肪肝大鼠体内的脂质水 平，改善肝脏脂肪变性的程度，提示其对高脂性脂肪肝大鼠具有一定的防治作用。
[00化]S、临床试验 [0087] 1、基本资料
[008引选取确诊为脂肪肝的患者420例，其中男性232例，女性188例，年龄35~75岁，平均 年龄52.3岁，病程2个月~8年，平均病程4.2年。将该400例患者随机分为治疗1~5组、对照1 ~2组共屯组，每组60例，各组患者的性别、年龄、病程、病情轻重等无显著性差异，具有可比 性。
[0089] 诊断标准为：西医诊断标准参照叶维法主编《临床肝胆病学》中的脂肪肝诊断标 准；中医诊断标准参照国家中医药管理局发布的《中医病症诊断疗效标准》，分为气虚型、肝 郁气滞型、肝胆湿热型、肾阴不足型、阴虚阳亢型及疲疲交阻型六种，多数患者不同程度出 现神疲乏力、食欲不振、倦怠懒言、肝区不适、大便漉薄、舌质暗苔厚腻。
[0090] 2、治疗方法
[0091] 治疗1~5组分别服用本发明实施例1~5制得的冲剂，成人每日1次，每次食用50g 所述黑木耳饮品冲剂，用200~300ml的45~60°C溫度的开水冲泡，揽匀后，服用即可。30天 为1个疗程，连续服用2~4个疗程。
[0092] 对照1组服用的冲剂仅含有黑木耳和首乌藤，其余与实施例5完全相同。成人每日1 次，每次食用50g所述黑木耳饮品冲剂，用200~300ml的45~60°C溫度的开水冲泡，揽匀后， 服用即可。30天为1个疗程，连续服用2~4个疗程。
[0093] 对照2组服用的散剂仅含有鸡冠花，其余与实施例5完全相同。成人每日1次，每次 食用50g所述黑木耳饮品冲剂，用200~300ml的45~60°C溫度的开水冲泡，揽匀后，服用即 可。30天为1个疗程，连续服用2~4个疗程。
[0094] 3、疗效判定标准
[0095] 治愈:主要症状消失，肝肿大消失或回缩，肝区无明显压痛或叩击痛，肝功能正常， 超声回声图及声像图正常，血脂趋于正常或明显改善，体重下降。
[0096] 好转:主要症状基本消失，肝肿大有所恢复，超声图像明显好转，血脂有所改善，体 重有所下降。
[0097] 无效:症状、体征、化验、超声图像及体重无改变者。
[009引4、治疗结果
[0099] 表6各组的疗效比较
[0101] 经过2~4个疗程的治疗，各组的疗效如表6所示：治疗组的治愈率为7 3.3~ 86.7%，总有效率为95~100%，平均治愈率为79.3%，平均总有效率为97.0% ;对照组的治 愈率及总有效率均远远低于治疗组，尤其对照1组和对照2组的治愈率及总有效率之和仍明 显低于治疗5组的疗效，说明本发明冲剂是在各原料的相互配伍作用下才具有如此高的治 愈率及总有效率，本发明冲剂适用于脂肪肝的预防及治疗。在治疗期间，治疗组及对照组均 未出现不良反应及毒副作用。
[0102] 对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够W其他的具体形式实现本发明。因此，无论 从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权 利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有 变化囊括在本发明内。
[0103]此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加 W描述，但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案，说明书的运种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可W经适当组合，形成本领域技术人员 可W理解的其他实施方式。
【主权项】
1. 一种预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂，其特征在于，按照质量份计，由以下原料制成： 鸡冠花4~7份、黑木耳30~45份、首乌藤7~12份。2. 根据权利要求1所述的预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂，其特征在于，按照质量份计， 由以下原料制成:鸡冠花5~7份、黑木耳35~42份、首乌藤8~10份。3. 根据权利要求1所述的预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂，其特征在于，按照质量份计， 由以下原料制成:鸡冠花6份、黑木耳38份、首乌藤9份。4. 根据权利要求1~3任一所述的预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂的制备方法，其特征在 于，包括以下步骤： (1) 将鸡冠花洗净，粉碎，放入其质量的6~8倍量的体积浓度为65~78%的乙醇溶液浸 泡2~3小时，回流提取两次，回流时间为1~2小时，过滤得到滤液，将所得滤液合并后，经减 压浓缩为60°C下相对密度为1.16~1.18的浸膏，提取后的滤渣保留，备用； (2) 将首乌藤洗净，与步骤（1)提取后的滤渣混合，加入8~10倍量的蒸馏水，浸泡4~6 小时后，煮沸3~4小时，提取;再次加入6~8倍量的蒸馏水，煮沸2~3小时，提取;最后，加入 4~6倍量的蒸馏水，加热煮沸1~2小时，提取;合并三次提取液，过滤得滤液，将所得滤液浓 缩成60°C下相对密度为1.12~1.14的稠膏，备用； (3) 将黑木耳放入其质量的3~5倍量的25~30°C的水中浸泡2~4小时后，捞出，去除根 部杂质，洗净;接着将洗净的黑木耳置于蒸锅上，往锅内加冷水，点火，以武火烧开，文火蒸 25~30分钟，关火，待蒸好的木耳自然冷却后，研磨成黑木耳糊，备用； (4) 将步骤（1)的浸膏、步骤(2)的稠膏与步骤(3)的黑木耳糊混合，减压干燥，经超微粉 碎成粒度为1~3μπι的粉末，即为所述的预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂。5. 根据权利要求1~3任一所述的黑木耳饮品冲剂在制备预防脂肪肝的食品中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种预防脂肪肝的黑木耳饮品冲剂及其制备方法及应用，所述冲剂按照质量份计，由以下原料制成：鸡冠花4～7份、黑木耳30～45份、首乌藤7～12份；将鸡冠花洗净，粉碎，乙醇回流提取两次，合并滤液，浓缩为浸膏，滤渣备用；将首乌藤洗净，与滤渣混合，加水浸泡，煮沸提取三次，合并提取液，过滤，浓缩成稠膏；将黑木耳泡发，洗净，蒸熟，冷却，研磨成糊；将浸膏、稠膏与黑木耳糊混合，减压干燥，粉碎成粒度为1～3μm的粉末，即得。本发明冲剂具有保肝护肝的作用，对中老年人因脂代谢紊乱所致脂肪肝疾病具有显著的预防和治疗作用，无不良反应及毒副作用。
【IPC分类】A23L33/00, A23L2/52, A23L2/39
【公开号】CN105533384
【申请号】CN201510908466
【发明人】刘可
【申请人】刘可
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月7日