一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001 ]本发明设及一种吸血类水赔饲养巧料及其制备方法和应用，具体属于水赔养殖技 术领域。
【背景技术】
[0002] 水赔养殖一般采用种赔水旱相间大田垄沟式养殖，自然产卵解化后集中育苗分池 养殖或亲本与幼苗同池混合养殖方式，使用此两种方式养殖为仿生养殖法，操作步骤简单 易于管理，但是受自然灾害影响较大，野外环境水赔天敌多，病害防治难度较大，育苗周期 长且密度小。现有吸血类水赔养殖巧料，通常W动物血为主，尤其现有的研究成果显示W新 鲜牛血清为巧料，水赔单体增重率高，但抗凝血酶含量不高。广东、广西一带农民养殖户在 生产上W牛血块为主、猪血块为辅，但是受牛血清饲喂操作复杂、鲜牛血市场供应量不足等 因素约束。水赔作为一味名贵中药材，水赔养殖中个体增重率固然重要，提高水赔单位质量 的抗凝血酶含量对提高药用价值和增加生产产值方面意义更大。因此研发一种能同时提高 水赔单位质量的抗凝血酶含量和个体增重率的饲养巧料显得尤为必要。
【发明内容】
[0003] 为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种吸血类水赔饲养巧料及其制 备方法和应用，该巧料能够有效提高水赔单位质量的抗凝血酶含量和个体重量。
[0004] 为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：
[000引一种吸血类水赔饲养巧料，按照体积比，由蔬菜汁:动物血清=1~5:6~10混合而 成。
[0006] 前述吸血类水赔饲养巧料中，动物血清为牛血清或猪血清。
[0007] 前述吸血类水赔饲养巧料中，蔬菜汁为芹菜汁、渡菜汁或野芹菜汁。
[0008] 前述吸血类水赔饲养巧料优选为由芹菜汁:牛血清=2:8(体积比）混合而成。
[0009] 本发明吸血类水赔饲养巧料的制备方法，包括W下步骤：
[0010] (1)取动物血块揽碎，40目筛网过滤，所得滤液即动物血清，备用；
[0011] (2)将蔬菜洗净渐干，切成3~5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤 液即蔬菜汁，备用；
[001引（3)将动物血清和蔬菜汁按比例混合即得。
[0013] 本发明吸血类水赔饲养巧料在提高水赔抗凝血酶活性饲养方法中的应用。
[0014] 前述应用方式之一为，用所述巧料替代现用水赔巧料按常规方法饲养水赔，投喂 巧料的时间间隔为4~6天。
[0015] 前述应用方式之二为，用所述巧料替代现用水赔巧料按常规方法饲养水赔2个月， 然后改变饲养溫度至30°C，停食1个月。
[0016] 为了体现本发明巧料的应用效果，发明人对其进行了试验研究和考察。
[0017] 采用本发明的巧料饲养水赔，具体包括W下步骤：（1)幼苗采集:收集解化后的的 水赔幼苗，集中育苗20天后进行分苗处理；（2)养殖:a.养殖密度:75尾/L;b.清洗换水:每天 用相同溫度的洁净水清洗更换一次，同时挑出死亡水赔；C.每4天W仿生膜为介质投喂一 次，投喂之前将水赔清洗干净滤干水后进行喂食，时间选择在上午12:00之前，进食时间控 制在30minW内，30min后将水赔和投喂容器分离，将水赔清洗干净放回瓶中存放，清洗投喂 容器，晒干备下次投喂时重复使用，水赔进食过程中随时挑出过大的个体，W控制其单次进 食量，防止胀死;（3)收获:养殖2个月后收获。
[0018] -、巧料对水赔生长的影响试验
[0019] ( - )试验目的；
[0020] 通过采用不同种类的巧料养殖水赔，记录统计水赔采食不同巧料种类后体重及抗 凝血酶活性变化情况，分析确定最适于水赔生长的饲养巧料种类。
[00引](二)试验内容：
[0022] 1、试验设计
[0023] (1)设置牛原血、牛血清、猪原血、猪血清、芹菜汁+牛血清(2:8 )、野芹菜汁+牛血清 (1:9)、渡菜汁+猪血清(3:7)、芹菜汁+猪血清(4:8)、小球藻、塘角鱼十个种类，每种巧料3个 重复，每个重复对应50尾Ig左右健康水赔苗。
[0024] (2)基质:水
[0025] (3)湿度：自然环境湿度
[0026] (4)密度:62.5 尾/L
[0027] (5)试验周期:60天
[002引 2、试验材料
[0029] (1)试验容器:2000mL大烧杯
[0030] (2)基质用量:800mL
[0031 ] (3)防逃网：40目尼龙网
[0032] (4)巧料:新鲜牛原血、牛血清、猪原血、猪血清、芹菜汁+牛血清（2:8)、野芹菜汁+ 牛血清（1:9)、渡菜汁+猪血清(3:7)、芹菜汁+猪血清(4:8)、小球藻、塘角鱼
[0033] 3、试验日常管理
[0034] (1)清洗换水:每天清水清洗一遍
[0035] (2)投喂方式:仿生膜晚吸式、直接投喂
[0036] (3)投喂频率:4天一次
[0037] (4)投喂时长:30min/次
[0038] (5)死亡统计:每天统计一次死亡水赔数量与重量
[0039] (立)实验结果：
[0040] 1、巧料对水赔抗凝血酶活性的影响
[0041 ]水赔抗凝血酶活性是通过水赔单位质量的抗凝血酶含量来体现的，本发明采用下 述方法测定水赔单位质量的抗凝血酶含量。
[0042] 1.1、溶液的配制
[0043] (1 )0.2mol/LS径基甲基氨基甲烧溶液的配制
[0044] 取S径基甲基氨基甲烧(分析纯）2.4228g，加水至1 OOmL，即为0.2mo 1/LS径基甲 基氨基甲烧溶液。
[004引（2)0.1mol/L盐酸溶液的配制
[0046] 取浓盐酸9mL，加水至1000 mL即为0.1mol/L盐酸溶液。
[0047] (3)=径基甲基氨基甲烧盐酸缓冲液的制备
[0048] 取0.2mol/LS径基甲基氨基甲烧溶液25mL与O.lmol/L盐酸溶液40mL加水至 1 OOmL充分混匀，调节pH至7.4，即得。
[0049] (4)0.5%牛纤维蛋白原（W凝固物记)溶液的配制
[0050] 取牛纤维蛋白原(含凝固物59% )0.085g至IOmL容量瓶中，用预先加热至37°C的S 径基甲基氨基甲烧盐酸缓冲液稀释至刻度，37°C水浴轻摇缓慢使溶(放入水浴时间不宜超 过10分钟）。
[0051] (5)凝血酶溶液的配制
[0052] 取含量为560U/支凝血酶1支，取其全部内容物至IOmL容量瓶中，用生理盐水稀释 至刻度，轻轻摇匀即为5抓/mL，盛于玻璃管中。
[0053] (6)供试品溶液的配制
[0054] 取水赔粉末(3号筛)约Ig，精密称定，精密加入0.9 %氯化钢溶液5mL，充分揽拌，浸 提30分钟，并时时振摇，35(K)r/min离屯、，离屯、15分钟，取上清液。
[00巧]1.2、含量测定操作步骤
[0056] (1)精密量取上清液10化L，置于（IOmm X 7 5mm)试管中；
[0057] (2)精密加入含0.5%牛纤维蛋白原的S径基甲基氨基甲烧盐酸缓冲液20化L，摇 匀；
[0058] (3)将试管置于水浴锅(37±0.5°C)中（用溫度计置水浴中观察测量溫度)缓缓滴 加每ImL含56单位U的凝血酶溶液(每分钟化L，边滴加边轻轻摇匀），滴加凝血酶溶液时尽量 不取出试管，W使其保持在37±0.5°C溫度中。当接近凝固时，5化分次滴加，每次滴加1~化 L，边滴加边轻摇，密切观察其是否凝固（可置试管于透光处），可用注射器针尖轻挑，看是否 有丝状物产生，若有丝状物或絮状物产生可判为已凝固。每个样品置水浴中检测的时间不 得超过30分钟。
[0059] (4)记录消耗凝血酶溶液的体积，按照下式计算其含量。
[0061] 式中，U为每Ig含凝血酶活性单位，U/g;Ci为凝血酶溶液的浓度，U/mLC2为供试品 溶液的浓度，g/mM Vi为消耗凝血酶溶液的体积，V2为供试品溶液的加入量，中和一个 单位的凝血酶的量，为一个抗凝血酶活性单位。
[0062] 按照上述试验内容，每4天W仿生膜为介质投喂一次十种不同的巧料，2个月后测 定水赔单位质量的抗凝血酶含量;实验结果如表1所示。
[0063] 表1不同巧料饲养2个月后的水赔抗凝血酶含量测定结果
[0066] 由表1可知，采用本发明的巧料进行饲养，水赔单位质量的抗凝血酶含量显著提 局。
[0067] 2、巧料对水赔增重率的影响
[0068] 按照上述试验内容，每4天W仿生膜为介质投喂一次十种不同的巧料，2个月后测 定水赔的重量，并计算增重率;实验结果如表2所示。
[0069] 表2不同巧料饲养水赔的增重率
[0071]
[0072] 由表2可知，采用本发明的巧料进行饲养，水赔的增重率相对于单用牛血清、猪血 清而言略有降低，但变化不大。
[0073] 二、投喂时间间隔对水赔抗凝血酶活性及水赔增重率的影响
[0074] 参照上述一、（二）中试验内容，选用本发明的巧料，即W体积比芹菜汁：牛血清=2 :8作为巧料，投喂时间间隔分别为2(1、4(1、6(1、8(1、12(1和16(1，2个月后测定水赔单位质量的抗 凝血酶含量;实验结果如表3所示。
[0075] 表3不同投喂时间间隔饲养2个月后的水赔抗凝血酶含量测定结果
[0077]
[0078] 由表3可知，投喂时间间隔为16d时饲