具有减脂瘦身功能的益生菌组合物及其制备方法与应用_2

文档序号:9917314阅读:来源:国知局
,结合后激活PPARy,在 前脂肪细胞增殖、分化过程中,刺激PPARy表达增多,可以诱导与脂肪细胞分化相关基因的 表达,CLA在PPARy被激活的同时也发挥了抑制作用,使得脂肪细胞在增殖、分化过程中受 到阻碍,因而CLA降低了体脂。因此,益生菌制剂可以作为一种改善肥胖的新疗法,并且具有 来源安全、效果显著、无任何毒副作用等优点。
[0032] 金银花、青蒿、黄芪、葛根、黄苓这些中药的主要有效成分通过抑制外源性脂质的 吸收,减少内源性脂质的合成,促进脂质的转运和排泄,调节脂肪代谢四个方面而达到改善 肥胖的目的。具有毒副作用小、材料容易获得且可长期服用等优势。
[0033] 传统上中药的使用,绝大多数以方剂的形式通过口服吸收而发挥作用,中药中的 有效成分在进入肠道之后不可避免地与肠道菌群发生关联,某些成分经相应细菌的作用发 生生物转化后被吸收,因此,体内环境中肠道菌群是完成中药有效成分生物转化的重要因 素之一。有益菌和中药是两类国际公认的益生物质,两者在基本理论观点上极为相似、一脉 相通;在作用机理上显示极大的统一性;在具体使用过程中也能完美互补,共同发挥优势。 因而中药对于有益菌而言,是绝佳的益生元。本发明将益生菌与中药完美结合,找出了具有 明显减脂瘦身效果的益生菌组合物配方。
[0034] 本发明的有益效果在于:本发明的益生菌组合物以益生菌干粉、金银花提取物粉、 青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉为原料直接投料,按重量科学 配比而成。其含有维生素 K,维生素 B12、吡哆醇、生物素、叶酸、烟酸和硫胺素等营养成分,制 备工艺简单,避免了提取时造成的药物损失和由于原药材质量差异造成的不同产品质量差 异较大的缺点,使产品纯度更高,杂质少,安全性更高,且不同批次间质量差异小,质量更均 匀稳定。通过传统中药与益生菌合理配伍用药,经药学实验证明,药效优于单独使用任何一 种原料,各有效成分呈协同作用,具有减脂瘦身、排毒养颜等功效。 【【具体实施方式】】
[0035] 为了更好地理解本发明,以下将结合具体实例对本发明进行详细的说明。
[0036] 实施例1
[0037] (1)选料制备益生菌干粉:
[0038] 1)分别将双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌经培养基活化后,接种于发酵培养基 中,振荡培养,使菌体浓度达到对数生长期〇. 5~1.0 X 109cfu/ml;
[0039] 双歧杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管,用双歧杆菌固体培养基划平板进行复 苏,37度厌氧培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升双歧杆菌培养基中,在培养箱 中37度厌氧培养48小时。种子采用5 %的接种量,接种至IOL大三角瓶中(装液量为9.5L),37 度厌氧培养20-28小时,检测其菌液浓度,菌含量超过10亿/毫升,即可作为双歧杆菌液体菌 种接种。其中所述的双歧杆菌培养基:蛋白胨5. Og/L,酵母提取物5g/L,牛肉膏5. Og/L,胰蛋 白胨10.0 g/L,葡萄糖10.0 g/L,醋酸钠5. Og/L,柠檬酸二铵2. Og/L,吐温-801.0ml/L,硫酸镁 〇. lg/L,硫酸锌0.25g/L,磷酸氢二钾2g/L,固体培养基中加入琼脂2 %。培养基灭菌的条件 为:0.10-(hl5MPa,12rC 灭菌 30 分钟。
[0040] 乳杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管,用MRS固体培养基划平板进行复苏,37度 厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种250毫升MRS培养基中,在培养箱中37度厌氧 培养24小时。种子采用5%的接种量,接种至10L大三角瓶中(装液量为9L),37度厌氧培养 20-28小时,检测其菌液浓度,菌含量超过100亿/毫升,即可作为乳杆菌液体菌种接种。其中 所述的MRS培养基:蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L,牛肉膏10g/L,葡萄糖20g/L,醋酸钠5g/ U柠檬酸二铵2g/L,吐温-801ml/L,硫酸镁0.6g/L,硫酸锰0.05g/L,磷酸氢二钾2g/L,琼脂 20g/L,碳酸钙20g/L,固体培养基中加入琼脂2%。其中所述的乳酸菌种子培养基:葡萄糖 5%,蛋白胨1.5%,牛肉膏0.75%,氯化钠0.1%,硫酸锰0.001%,硫酸镁0.02%,醋酸钠 0.05 %,碳酸钙1 %,pH6.0。各培养基灭菌的条件为:0.10-0.15MPa,121°C灭菌30分钟。
[0041 ] 2)将各菌种发酵液混合后离心,弃上清,菌体沉淀洗涤,离心,灭菌,得菌泥;
[0042] 3)配制干粉保护剂;其中干粉保护剂的配方组成为:β-环状糊精10g、乳糖2_5g、海 藻糖0·5-2g、酵母膏0·5-2g、维生素 E0.05-0.1g、蒸馏水IOOmL。
[0043] 4)将干粉保护剂和菌泥混合,进行成膜反应,然后,将混合物预冻,再冷冻干燥,制 成具有包埋层的活性益生菌干粉;
[0044] 金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉均 购自西安天一生物技术有限公司。
[0045] (2)过筛
[0046] 将步骤(1)中的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根 提取物粉、黄苓提取物粉分别过80~100目筛。
[0047] (3)配料
[0048] 称量过筛后的原料,按益生菌干粉50%、金银花提取物粉5%、青蒿提取物粉10%、 黄芪提取物粉15%、葛根提取物粉10%、黄苓提取物粉10%配料,以上含量均为重量百分比 含量。
[0049] (4)混合
[0050] 将配好的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取 物粉、黄苓提取物粉于三维混合机中混合至色泽均匀一致,无色差,即得到具有减脂瘦身 功能的益生菌组合物。
[0051 ] 实施例2
[0052]具体步骤同实施例1,不同之处在于:步骤(3)中配料:称量过筛后的原料,按益生 菌干粉50%、金银花提取物粉10%、青蒿提取物粉5%、黄芪提取物粉10%、葛根提取物粉 15%、黄苓提取物粉10%配料,以上含量均为重量百分比含量。
[0053] 实施例3
[0054]具体步骤同实施例1,不同之处在于:步骤(3)中配料:称量过筛后的原料,按益生 菌干粉50%、金银花提取物粉5%、青蒿提取物粉5%、黄芪提取物粉15%、葛根提取物粉 10%、黄苓提取物粉15%配料,以上含量均为重量百分比含量。
[0055] 实施例4
[0056] 具体步骤同实施例1,不同之处在于:步骤(3)中配料:称量过筛后的原料,按益生 菌干粉50%、金银花提取物粉10%、青蒿提取物粉5%、黄芪提取物粉10%、葛根提取物粉 15%、黄苓提取物粉10%配料,以上含量均为重量百分比含量。
[0057] 实施例5
[0058]具体步骤同实施例1,不同之处在于:步骤(3)中配料:称量过筛后的原料,按益生 菌干粉55%、金银花提取物粉6%、青蒿提取物粉6%、黄芪提取物粉11 %、葛根提取物粉 11%、黄苓提取物粉11%配料,以上含量均为重量百分比含量。
[0059] 实验例1具有减脂瘦身功能的益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响
[0060] (1)营养性肥胖大鼠模型的建立
[0061 ]大鼠在武汉大学生命科学学院实验动物中心饲养室饲养。饲养期间大鼠4只一笼, 自由摄食和饮水,明暗周期为12h,室温22~25°C,相对湿度40%~60 %,通风良好。取80只 雄性SD大鼠,按体重随机分为普食组(10只)和造模组(70只)。普食组投喂基础饲料,造模组 投喂高脂饲料。每天称一次体重,喂养7周后,肥胖饲料组大鼠中有38只大鼠的平均体重超 过基础饲料组大鼠平均体重加1.4倍标准差,成模率54.3%。
[0062] (2)分组与给药
[0063]随机取24只作为益生菌组合物干预实验大鼠,分为3组,分别为模型对照组、实施 例1组合物组、益生菌干粉组,每组8只;基础饲料组中随机取8只作为正常对照组,共4组,各 组与正常对照组相比差异显著(P〈〇.〇l)(表1)。用药组与模型组继续给食高脂饲料,正常对 照组投喂基础饲料。实施例1组合物和益生菌干粉分别为1000,500mg · kg<,用纯净水配成 10 %、5 %的混悬液,灌胃给药体积为IOmL · kg+1,连续6周。给药时间在下午15:00- 17:00。 模型组灌胃给予等体积的纯净水,正常对照组不作任何处理。
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